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埃瓦尔对维戈塞尔塔: 一種富硒猴頭菇菌絲體的培養方法及其應用.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201810713972.3

申請日:

20180629

公開號:

CN109076881A

公開日:

20181225

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A01G18/40,A01G18/20 主分類號: A01G18/40,A01G18/20
申請人: 江西天和食用菌開發有限公司
發明人: 邱桂根,邱耀民
地址: 330700 江西省宜春市奉新縣奉新工業園區苗圃路555號
優先權: CN201810713972A
專利代理機構: 東莞市華南專利商標事務所有限公司 代理人: 姜華
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201810713972.3

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明涉及食用菌培養及應用的技術領域,具體涉及一種富硒猴頭菇菌絲體的培養方法及其應用。該富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,包括以下步驟:(1)猴頭菇液體菌種的培養;(2)有機硒猴頭菇菌液的培養;(3)富硒原料的制備;(4)富硒固體培養基的培養。本發明的培養方法采用液體發酵培養結合固體培養基培養,大大縮短了猴頭菇菌絲體的培養時間,其生產周期只有固體培養基的1/2?1/3,生產成本低,并易于進行工業化生產,并且通過猴頭菇菌種的自身代謝,將無機硒轉化為人體更能吸收的有機硒后再進行富硒猴頭菇菌絲的培養,得到的富硒猴頭菇菌絲體的硒含量高,更易被人體吸收,具有更好的營養價值和保健價值。

權利要求書

1.一種富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)猴頭菇液體菌種的培養:將猴頭菇母種依次經過PDA培養基培養、搖瓶培養和發酵罐充氣培養得到猴頭菇液體菌種;(2)有機硒猴頭菇菌液的培養:制備無機硒培養基,并將所述步驟(1)中得到的部分猴頭菇液體菌種接種至無機硒培養基中進行培養,得到有機硒猴頭菇菌液;(3)富硒原料的制備:將大豆、玉米和小麥按一定比例混合而成的混合物使用所述步驟(2)中得到的有機硒猴頭菇菌液浸泡一定時間,然后晾干,得到富硒原料;(4)富硒固體培養基的培養:將步驟(3)中制備的富硒原料滅菌、冷卻后制備成富硒固體培養基,然后接種所述步驟(1)中的剩余猴頭菇液體菌種并進行培養,得到富硒猴頭菇菌絲體。2.根據權利要求1所述的富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,其特征在于:所述步驟(1)中,PDA培養基培養的溫度為20-25℃,培養時間為12-15d;所述PDA培養基的制備方法包括如下步驟:取馬鈴薯100-300g加入1000mL的水煮熟,然后過濾,得到濾液,往濾液依次加入10-30g葡萄糖、10-30g瓊脂、0.2-1g硫酸鎂、0.5-2g磷酸氫二鉀、3-10g豆粕粉、2-5g蛋白胨和1-5g酵母粉,加熱至溶解,并補水至1000mL,將得到的培養液在121-130℃溫度下滅菌20-40min,然后冷卻至20-30℃后即得到PDA培養基。3.根據權利要求1所述的富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,其特征在于:所述步驟(1)中,搖瓶培養的溫度為20-25℃,培養時間為5-7d,每1000mL搖瓶培養基的原料包括:1-6g豆箔粉、20-30g白糖、0.5-1.5g酵母膏、0.5-1.5g磷酸二氫鉀和0.5-1.5g硫酸鎂。4.根據權利要求1所述的富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,其特征在于:所述步驟(1)中,發酵罐充氣培養的溫度為20-25℃,充氣培養時間為10-13d,充氣壓強為0.01-0.03MPa,每1000mL發酵罐充氣培養的培養基的原料包括:1-6g豆箔粉、20-30g白糖、0.5-3g硫酸鎂、0.5-3g蛋白胨和0.5-3g磷酸二氫鉀。5.根據權利要求1所述的富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,其特征在于:所述步驟(2)中,將猴頭菇液體菌種接種至無機硒培養基中進行充氣培養,培養溫度為20-25℃,培養時間為10-13d,充氣壓強為0.01-0.03MPa,每1000mL無機硒培養基的原料包括:1-6g豆箔粉、20-30g白糖、0.5-1.5g蛋白胨、0.5-1.5g磷酸二氫鉀、0.5-1.5g硫酸鎂和180-600mg無機硒。6.根據權利要求1所述的富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,其特征在于:所述步驟(3)中,加入的大豆、玉米、小麥與有機硒猴頭菇菌液形成的混合物的初始液體含量為38%-50%,并浸泡至混合物中的液體被完全吸收,浸泡溫度為35-50℃,所述的大豆、玉米和小麥為粒徑為4-8mm的顆粒。7.根據權利要求6所述的富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,其特征在于:浸泡前,先將步驟(2)得到的有機硒猴頭菇菌液搖勻,使有機硒猴頭菇菌液中的猴頭菇菌絲體均勻分散在菌液中。8.根據權利要求1所述的富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,其特征在于:所述步驟(4)中,富硒固體培養基的原料按照質量百分比包括:3-7%大豆和20-30%小麥,余量為玉米。9.根據權利要求1所述的富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,其特征在于:所述步驟(4)的具體培養方法包括以下步驟:在百級凈化培養房中,將接種的猴頭菇液體菌種先在20-25℃溫度下,培養10-15d,然后在無菌條件下將富硒固體培養基表面生長的猴頭菇菌絲體搓散后,繼續在20-25℃溫度下,培養7-10d,再次在無菌條件下將富硒固體培養基表面生長的猴頭菇菌絲體搓散后,繼續在20-25℃溫度下,培養5-8d,得到富硒猴頭菇菌絲體。10.一種富硒猴頭菇菌絲體的應用,其特征在于:使用如權利要求1-9中任一項富硒猴頭菇菌絲體的培養方法培養的猴頭菇菌絲體連同所述富硒固體培養基烘干后,粉碎成80-100目的細粉,得到富硒猴頭菇菌絲粉。

說明書

技術領域

本發明涉及食用菌培養及應用的技術領域,具體涉及一種富硒猴頭菇菌絲體的培養方法及其應用。

背景技術

硒是人體生命活動中必需的微量元素,有“生命的火種”之美稱,在人體中含量雖微,但它對人體生理機能的調控和維持人體最佳營養狀態起很大作用。硒具有清除自由基、抗衰老、提高免疫力等功能。人體對硒的吸收主要從食物中獲取,而食物中的硒含量決定了補硒的效果,自然界中,有些生物具有富硒功能,可以提高食物的硒含量。

食藥用菌菌絲體含有子實體相同的營養物質和藥用成分,特別是多糖含量比子實體更豐富。所以食藥用菌菌絲粉,特別是富硒有機食藥用菌菌絲粉是大健康產業的瑰寶,是保健品,功能食品的重要原料,值得大力開發。猴頭菇就是富硒菌類之一(參見《湖北農業科學》2005年第4期發表的何冬蘭的論文“亞硒酸鈉等猴頭菇菌絲生長的影響”,1999年第3期《食用菌學報》發表的尚德靜的論文“四種食用菌富硒能力的比較”)。

猴頭菇是我國著名的食藥兼用真菌,素稱“蘑菇之王”,它與熊掌、燕窩、魚翅并列為四大名菜,自古以來被譽為“山珍”。猴頭菇屬于木腐菌,野生猴頭菇一般生長在枯樹上,人工栽培猴頭菇主要以木屑、棉籽殼、玉米芯等固體原料進行栽培,一般采用菌袋臥式排放于菇床或者菇架上進行大田栽培。中國專利CN101803536A公開了一種大田栽培猴頭菇方法;中國專利CN101919338A公開了一種猴頭菇工廠化栽培方法,以玉米芯、木屑、棉籽殼為主要原料,采用工廠化生產技術進行猴頭菇栽培。這些培養方法,培養周期長,成本高。

發明內容

為了克服現有技術中存在的缺點和不足,本發明的目的在于提供一種富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,采用液體發酵培養和固體培養基培養,培養周期短,成本低,硒含量高。

本發明的另一目的,在于提供一種富硒猴頭菇菌絲體的應用,生產簡單,成本低,得到的富硒猴頭菇菌絲粉營養豐富。

本發明的目的通過下述技術方案實現:一種富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,包括以下步驟:

(1)猴頭菇液體菌種的培養:將猴頭菇母種依次經過PDA培養基培養、搖瓶培養和發酵罐充氣培養得到猴頭菇液體菌種;

(2)有機硒猴頭菇菌液的培養:制備無機硒培養基,并將所述步驟(1)中得到的部分猴頭菇液體菌種接種至無機硒培養基中進行培養,得到有機硒猴頭菇菌液;

(3)富硒原料的制備:將大豆、玉米和小麥按一定比例混合而成的混合物使用所述步驟(2)中得到的有機硒猴頭菇菌液浸泡一定時間,然后晾干,得到富硒原料;

(4)富硒固體培養基的培養:將步驟(3)中制備的富硒原料滅菌、冷卻后制備成富硒固體培養基,然后接種所述步驟(1)中的剩余猴頭菇液體菌種并進行培養,得到富硒猴頭菇菌絲體。

本發明的培養方法,先將猴頭菇母種依次經過PDA培養基培養、搖瓶培養和發酵罐充氣培養得到猴頭菇液體菌種,然后將得到的部分猴頭菇液體菌種在無機硒培養基中培養至長出菌絲體,猴頭菇液體菌種在生長的過程中,通過吸收和代謝,將培養基中的無機硒轉變為有機硒,最終得到有機硒猴頭菇菌液,此時有機硒猴頭菇菌液中包含富含有機硒元素的猴頭菇菌絲體等固體和培養液,培養液中也會含有一定量的硒元素,包括大部分的有機硒元素和少量的無機硒元素,再使用得到的有機硒猴頭菇菌液浸泡大豆、小麥和玉米,使大豆、小麥和玉米充分吸收有機硒猴頭菇菌液中的有機硒元素,并將浸泡后的大豆、小麥和玉米作為原料制備富硒固體培養基,此時富硒固體培養基中富含豐富的有機硒元素,最后使用這種富硒固體培養基培養猴頭菇液體菌種至長出菌絲體,即得到富硒猴頭菇菌絲體。

本發明的培養方法采用液體發酵培養結合固體培養基培養,大大縮短了猴頭菇菌絲體的培養時間,其生產周期只有固體培養基的1/2-1/3,生產成本低,并易于進行工業化生產,并且通過猴頭菇菌種的自身代謝,將無機硒轉化為人體更能吸收的有機硒后再進行富硒猴頭菇菌絲的培養,得到的富硒猴頭菇菌絲體的硒含量高,更易被人體吸收,具有更好的營養價值和保健價值。每100g本發明的培養方法培養的干猴頭菇菌絲體中硒含量達到45-78微克,其中人體易于吸收的有機硒元素的含量≥88%。

本發明的培養方法通過采用大豆、小麥和玉米作為主體通過浸泡來吸收由猴頭菇菌絲體自身將無機硒轉化而得到的有機硒,并制備成富硒固體培養基來培養猴頭菇液體菌種,改變了作為木腐菌的猴頭菇必須依靠木質培養基生長的傳統觀念。

優選的,所述步驟(1)中,PDA培養基培養的溫度為20-25℃,培養時間為7-9d;所述PDA培養基的制備方法包括如下步驟:取馬鈴薯100-300g加入1000mL的水煮熟,然后過濾,得到濾液,往濾液依次加入10-30g葡萄糖、10-30g瓊脂、0.2-1g硫酸鎂、0.5-2g磷酸氫二鉀、3-10g豆粕粉、2-5g蛋白胨和1-5g酵母粉,加熱至溶解,并補水至1000mL,將得到的培養液在121-130℃溫度下滅菌20-40min,然后冷卻至20-30℃后即得到PDA培養基。

本發明通過采用上述原料和方法配置PDA培養基,并配合以上培養條件,能極大的提高的猴頭菇菌種的培養效率和培養效果。具體的,PDA培養基的制備方法的具體操作過程為:按上述質量稱取馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、硫酸鎂、磷酸氫二鉀、豆粕粉、蛋白胨和酵母粉,先將馬鈴薯切成小方塊,加入1L的水煮熟而保持不爛,然后用紗布過濾,慮后的濾液與稱好的其它原料一起煮,至全部物品溶解,混合均勻為準,最后分裝到培養皿內,并使用紗布做好封口處理,然后將封好口的培養皿放在高壓蒸汽滅菌鍋中在121-130℃,滅菌20-40min,滅菌結束后,待冷卻后使用,即得到PDA培養基。

優選的,所述步驟(1)中,搖瓶培養的溫度為20-25℃,培養時間為5-7d,每1000mL搖瓶培養基的原料包括:1-6g豆箔粉、20-30g白糖、0.5-1.5g酵母膏、0.5-1.5g磷酸二氫鉀、0.5-1.5g硫酸鎂。

本發明通過采用上述原料和方法配置搖瓶培養基培養猴頭菇液體菌種,并配合以上培養條件,能使猴頭菇菌種的繁殖更均勻,避免猴頭菇菌種集中繁殖于某空間,提高了猴頭菇菌種的繁殖效率和繁殖效果。具體的,本發明的搖瓶培養基的制備方法包括以下步驟:稱取1-6g豆箔粉、20-30g白糖、0.5-1.5g酵母膏、0.5-1.5g磷酸二氫鉀、0.5-1.5g硫酸鎂,并將上述原料依次溶于1000mL水中加熱溶解,溶解完全后補水至1000mL,調pH值6.9—7.5,然后在121-130℃下滅菌20-45min,冷卻至20-30℃,即得到搖瓶培養基。另一優選的,所述步驟(1)中,稱取3g豆箔粉、25g白糖、0.83g酵母膏、0.83g磷酸二氫鉀、0.83g硫酸鎂,并將上述原料依次溶于1000mL水中加熱溶解,溶解完全后補水至1000mL,調pH值6.9—7.5,然后在124℃下滅菌35min,冷卻至23℃,即得到搖瓶培養基。

優選的,所述步驟(1)中,發酵罐充氣培養的溫度為20-25℃,充氣培養時間為10-13d,充氣壓強為0.01-0.03MPa,每1000mL發酵罐充氣培養的培養基的原料包括:1-6g豆箔粉、20-30g白糖、0.5-3g硫酸鎂、0.5-3g蛋白胨、0.5-3g磷酸二氫鉀。

本發明通過采用上述原料和方法配置發酵罐充氣培養的培養基培養猴頭菇液體菌種,并配合以上培養條件,能縮短猴頭菇菌種的生長時間,使猴頭菇菌種的繁殖更均勻,具有良好的培養效率和培養效果。具體的,本發明的發酵罐充氣培養的培養基的制備方法包括以下步驟,稱取1-6g豆箔粉、20-30g白糖、0.5-3g硫酸鎂、0.5-3g蛋白胨、0.5-3g磷酸二氫鉀,并將以上原料依次溶解于1000mL水中加熱溶解,溶解完全后補水至1000mL,調pH值6.9—7.5,然后在121-130℃下滅菌20-45min,冷卻至20-30℃,即得到發酵罐充氣培養的培養基。另一優選的,所述步驟(1)中,稱取3g豆箔粉、25g白糖、1g硫酸鎂、1g蛋白胨、1g磷酸二氫鉀,并將以上原料依次溶解于1000mL水中加熱溶解,溶解完全后補水至1000mL,調pH值6.9—7.5,然后在124℃下滅菌35min,冷卻至23℃,即得到發酵罐充氣培養的培養基。

優選的,所述步驟(2)中,將猴頭菇液體菌種接種至無機硒培養基中進行充氣培養,培養溫度為20-25℃,培養時間為10-13d,充氣壓強為0.01-0.03MPa,每1000mL無機硒培養基的原料包括:1-6g豆箔粉、20-30g白糖、0.5-1.5g蛋白胨、0.5-1.5g磷酸二氫鉀、0.5-1.5g硫酸鎂和180-600mg無機硒。

本發明通過采用上述原料和方法配置無機硒培養基培養猴頭菇液體菌種,并配合以上培養條件,能縮短猴頭菇菌種的生長時間,使猴頭菇菌種的繁殖更均勻,具有良好的培養效率和培養效果,有利于增強猴頭菇菌種在生長過程中對無機硒的吸收與轉化的能力。具體的,本發明的無機硒培養基的制備方法包括以下步驟:稱取1-6g豆箔粉、20-30g白糖、0.5-1.5g蛋白胨、0.5-1.5g磷酸二氫鉀、0.5-1.5g硫酸鎂和180-600mg無機硒,并將上述原料依次溶于1000mL水中加熱溶解,溶解完全后補水至1000mL,調pH值6.9—7.5,然后在121-130℃下滅菌20-45min,冷卻至20-30℃,即得到無機硒培養基。另一優選的,所述步驟(2)中,稱取3g豆箔粉、25g白糖、0.83g蛋白胨、0.83g磷酸二氫鉀、0.83g硫酸鎂和400mg無機硒,并將上述原料依次溶于1000mL水中加熱溶解,溶解完全后補水至1000mL,調pH值6.9—7.5,然后在124℃下滅菌35min,冷卻至23℃,即得到無機硒培養基。

優選的,所述步驟(3)中,加入的大豆、玉米、小麥與有機硒猴頭菇菌液形成的混合物的初始液體含量為38%-50%,并浸泡至混合物中的液體被完全吸收,浸泡溫度為35-50℃,所述的大豆、玉米和小麥為粒徑為4-8mm的顆粒。

本發明的培養方法通過采用大豆、小麥和玉米作為主體通過浸泡來吸收由猴頭菇菌絲體自身將無機硒轉化而得到的有機硒,并制備成富硒固體培養基來培養猴頭菇液體菌種,改變了作為木腐菌的猴頭菇必須依靠木質培養基生長的傳統觀念,并且培養的猴頭菇菌絲體的有機硒含量較高,每100g本發明的培養方法培養的干猴頭菇菌絲體中硒含量達到45-78微克,其中人體易于吸收的有機硒元素的含量≥88%。本發明中,向有機硒猴頭菇菌液中添加粒徑為4-8mm的大豆顆粒、玉米顆粒、小麥顆粒,直至整個混合系統的液含量為38%-50%,然后再35-50℃溫度下進行浸泡,直至混合體系中的液體被完全吸收,此時,大豆顆粒、玉米顆粒和小麥顆粒的含水量為38%-50%,然后將大豆顆粒、小麥顆粒和玉米顆粒晾干,得到富含有機硒的大豆顆粒、小麥顆粒和玉米顆粒,使用它們制備固體培養基培養猴頭菇液體菌種,猴頭菇液體菌種直接吸收有機硒元素,大大增加了富硒猴頭菇菌絲體的有機硒元素的含量。另一優選的,所述步驟(3)中,加入的大豆、玉米、小麥與有機硒猴頭菇菌液形成的混合物的初始液體含量為40%-45%,并浸泡至混合物中的液體被完全吸收,浸泡溫度為35-50℃,所述的大豆、玉米和小麥為粒徑為5-6mm的顆粒,浸泡后大豆、玉米和小麥的含水量為40%-45%。

優選的,浸泡前,先將步驟(2)得到的有機硒猴頭菇菌液搖勻,使有機硒猴頭菇菌液中的猴頭菇菌絲體均勻分散在菌液中。

浸泡前,先將有機硒猴頭菇菌液搖勻,使猴頭菇菌絲體均勻分散在菌液中,使猴頭菇菌絲體中的有機硒也能更均勻的分散至菌液中,使菌液和猴頭菇菌絲體一起作為有機硒源,為浸泡其中的大豆、小麥和玉米提供有機硒元素,提高了浸泡后大豆、小麥和玉米的有機硒含量。

優選的,所述步驟(4)中,富硒固體培養基的原料按照質量百分比包括:3-7%大豆和20-30%小麥,余量為玉米。

本發明通過采用以上比例的大豆、小麥和玉米,為猴頭菇菌絲體的生長提供合適的營養比例,有利于猴頭菇菌絲的培養效率和培養效果。另一優選的,所述步驟(4)中,富硒固體培養基的原料按照質量百分比包括:5%大豆和25%小麥,余量為玉米。

優選的,所述步驟(4)的具體培養方法包括以下步驟:在百級凈化培養房中,將接種的猴頭菇液體菌種先在20-25℃溫度下,培養10-15d,然后在無菌條件下將富硒固體培養基表面生長的猴頭菇菌絲體搓散后,繼續在20-25℃溫度下,培養7-10d,再次在無菌條件下將富硒固體培養基表面生長的猴頭菇菌絲體搓散后,繼續在20-25℃溫度下,培養5-8d,得到富硒猴頭菇菌絲體。

本發明通過三次培養可以提高猴頭菇菌絲體的得率,從而大大提高猴頭菇菌絲體中多糖和其他有效成分的含量。

本發明的另一目的通過下述技術方案實現:一種富硒猴頭菇菌絲體的應用,將所述猴頭菇菌絲體連同所述富硒固體培養基烘干后,粉碎成80-100目的細粉,得到富硒猴頭菇菌絲粉。

本發明的富硒猴頭菇菌絲粉含有豐富的有機硒元素,利于人體吸收,具有極大的保健價值。

本發明的有益效果在于:本發明的培養方法采用液體發酵培養結合固體培養基培養,大大縮短了猴頭菇菌絲體的培養時間,其生產周期只有固體培養基的1/2-1/3,生產成本低,并易于進行工業化生產,并且通過猴頭菇菌種的自身代謝,將無機硒轉化為人體更能吸收的有機硒后再進行富硒猴頭菇菌絲的培養,得到的富硒猴頭菇菌絲體的硒含量高,更易被人體吸收,具有更好的營養價值和保健價值。每100g本發明的培養方法培養的干猴頭菇菌絲體中硒含量達到45-78微克,其中人體易于吸收的有機硒元素的含量≥88%。

本發明的培養方法通過采用大豆、小麥和玉米作為主體通過浸泡來吸收由猴頭菇菌絲體自身將無機硒轉化而得到的有機硒,并制備成富硒固體培養基來培養猴頭菇液體菌種,改變了作為木腐菌的猴頭菇必須依靠木質培養基生長的傳統觀念。

具體實施方式

為了便于本領域技術人員的理解,下面結合實施例對本發明作進一步的說明,實施方式提及的內容并非對本發明的限定。

實施例1

一種富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,包括以下步驟:

(1)猴頭菇液體菌種的培養:將猴頭菇母種依次經過PDA培養基培養、搖瓶培養和發酵罐充氣培養得到猴頭菇液體菌種;

(2)有機硒猴頭菇菌液的培養:制備無機硒培養基,并將所述步驟(1)中得到的部分猴頭菇液體菌種接種至無機硒培養基中進行培養,得到有機硒猴頭菇菌液;

(3)富硒原料的制備:將大豆、玉米和小麥按一定比例混合而成的混合物使用所述步驟(2)中得到的有機硒猴頭菇菌液浸泡一定時間,然后晾干,得到富硒原料;

(4)富硒固體培養基的培養:將步驟(3)中制備的富硒原料滅菌、冷卻后制備成富硒固體培養基,然后接種所述步驟(1)中的剩余猴頭菇液體菌種并進行培養,得到富硒猴頭菇菌絲體。

所述步驟(1)中,PDA培養基培養的溫度為20℃,培養時間為15d;所述PDA培養基的制備方法包括如下步驟:取馬鈴薯100g加入1000mL的水煮熟,然后過濾,得到濾液,往濾液依次加入10g葡萄糖、10g瓊脂、0.2g硫酸鎂、0.5g磷酸氫二鉀、3g豆粕粉、2g蛋白胨和1g酵母粉,加熱至溶解,并補水至1000mL,將得到的培養液在121℃溫度下滅菌40min,然后冷卻至20℃后即得到PDA培養基。

所述步驟(1)中,搖瓶培養的溫度為20℃,培養時間為7d,每1000mL搖瓶培養基的原料包括:1g豆箔粉、20g白糖、0.5g酵母膏、0.5g磷酸二氫鉀、0.5g硫酸鎂。

所述步驟(1)中,發酵罐充氣培養的溫度為20℃,充氣培養時間為13d,充氣壓強為0.01MPa,每1000mL發酵罐充氣培養的培養基的原料包括:1g豆箔粉、20g白糖、0.5g硫酸鎂、0.5g蛋白胨、0.5g磷酸二氫鉀。

所述步驟(2)中,培養溫度為20℃,培養時間為13d,每1000mL無機硒培養基的原料包括:1g豆箔粉、20g白糖、0.5g蛋白胨、0.5g磷酸二氫鉀、0.5g硫酸鎂和180mg無機硒。

所述步驟(3)中,加入的大豆、玉米、小麥與有機硒猴頭菇菌液形成的混合物的初始液體含量為38%%,并浸泡至混合物中的液體被完全吸收,浸泡溫度為35℃,所述的大豆、玉米和小麥為粒徑為4mm的顆粒。

浸泡前,先將步驟(2)得到的有機硒猴頭菇菌液搖勻,使有機硒猴頭菇菌液中的猴頭菇菌絲體均勻分散在菌液中。

所述步驟(4)中,富硒固體培養基的原料按照質量百分比包括:3%大豆和20%小麥,余量為玉米。

所述步驟(4)的具體培養方法包括以下步驟:在百級凈化培養房中,將接種的猴頭菇液體菌種先在20℃溫度下,培養15d,然后在無菌條件下將富硒固體培養基表面生長的猴頭菇菌絲體搓散后,繼續在20℃溫度下,培養10d,再次在無菌條件下將富硒固體培養基表面生長的猴頭菇菌絲體搓散后,繼續在20℃溫度下,培養8d,得到富硒猴頭菇菌絲體。

實施例2

一種富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,包括以下步驟:

(1)猴頭菇液體菌種的培養:將猴頭菇母種依次經過PDA培養基培養、搖瓶培養和發酵罐充氣培養得到猴頭菇液體菌種;

(2)有機硒猴頭菇菌液的培養:制備無機硒培養基,并將所述步驟(1)中得到的部分猴頭菇液體菌種接種至無機硒培養基中進行培養,得到有機硒猴頭菇菌液;

(3)富硒原料的制備:將大豆、玉米和小麥按一定比例混合而成的混合物使用所述步驟(2)中得到的有機硒猴頭菇菌液浸泡一定時間,然后晾干,得到富硒原料;

(4)富硒固體培養基的培養:將步驟(3)中制備的富硒原料滅菌、冷卻后制備成富硒固體培養基,然后接種所述步驟(1)中的剩余猴頭菇液體菌種并進行培養,得到富硒猴頭菇菌絲體。

所述步驟(1)中,PDA培養基培養的溫度為25℃,培養時間為12d;所述PDA培養基的制備方法包括如下步驟:取馬鈴薯300g加入1000mL的水煮熟,然后過濾,得到濾液,往濾液依次加入30g葡萄糖、30g瓊脂、1g硫酸鎂、2g磷酸氫二鉀、10g豆粕粉、5g蛋白胨和5g酵母粉,加熱至溶解,并補水至1000mL,將得到的培養液在130℃溫度下滅菌20min,然后冷卻至30℃后即得到PDA培養基。

所述步驟(1)中,搖瓶培養的溫度為25℃,培養時間為5d,每1000mL搖瓶培養基的原料包括:6g豆箔粉、30g白糖、1.5g酵母膏、1.5g磷酸二氫鉀、1.5g硫酸鎂。

所述步驟(1)中,發酵罐充氣培養的溫度為25℃,充氣培養時間為10d,充氣壓強為0.03MPa,每1000mL發酵罐充氣培養的培養基的原料包括:6g豆箔粉、30g白糖、3g硫酸鎂、3g蛋白胨、3g磷酸二氫鉀。

所述步驟(2)中,培養溫度為25℃,培養時間為10d,每1000mL無機硒培養基的原料包括:6g豆箔粉、30g白糖、1.5g蛋白胨、1.5g磷酸二氫鉀、1.5g硫酸鎂和600mg無機硒。

所述步驟(3)中,加入的大豆、玉米、小麥與有機硒猴頭菇菌液形成的混合物的初始液體含量為50%,并浸泡至混合物中的液體被完全吸收,浸泡溫度為50℃,所述的大豆、玉米和小麥為粒徑為8mm的顆粒。

浸泡前,先將步驟(2)得到的有機硒猴頭菇菌液搖勻,使有機硒猴頭菇菌液中的猴頭菇菌絲體均勻分散在菌液中。

所述步驟(4)中,富硒固體培養基的原料按照質量百分比包括:7%大豆和30%小麥,余量為玉米。

所述步驟(4)的具體培養方法包括以下步驟:在百級凈化培養房中,將接種的猴頭菇液體菌種先在25℃溫度下,培養10d,然后在無菌條件下將富硒固體培養基表面生長的猴頭菇菌絲體搓散后,繼續在25℃溫度下,培養7d,再次在無菌條件下將富硒固體培養基表面生長的猴頭菇菌絲體搓散后,繼續在25℃溫度下,培養5d,得到富硒猴頭菇菌絲體。

實施例3

一種富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,包括以下步驟:

(1)猴頭菇液體菌種的培養:將猴頭菇母種依次經過PDA培養基培養、搖瓶培養和發酵罐充氣培養得到猴頭菇液體菌種;

(2)有機硒猴頭菇菌液的培養:制備無機硒培養基,并將所述步驟(1)中得到的部分猴頭菇液體菌種接種至無機硒培養基中進行培養,得到有機硒猴頭菇菌液;

(3)富硒原料的制備:將大豆、玉米和小麥按一定比例混合而成的混合物使用所述步驟(2)中得到的有機硒猴頭菇菌液浸泡一定時間,然后晾干,得到富硒原料;

(4)富硒固體培養基的培養:將步驟(3)中制備的富硒原料滅菌、冷卻后制備成富硒固體培養基,然后接種所述步驟(1)中的剩余猴頭菇液體菌種并進行培養,得到富硒猴頭菇菌絲體。

所述步驟(1)中,PDA培養基培養的溫度為23℃,培養時間為13d;所述PDA培養基的制備方法包括如下步驟:取馬鈴薯200g加入1000mL的水煮熟,然后過濾,得到濾液,往濾液依次加入20g葡萄糖、20g瓊脂、0.5g硫酸鎂、1g磷酸氫二鉀、5g豆粕粉、3g蛋白胨和3g酵母粉,加熱至溶解,并補水至1000mL,將得到的培養液在124℃溫度下滅菌35min,然后冷卻至23℃后即得到PDA培養基。

所述步驟(1)中,搖瓶培養的溫度為23℃,培養時間為6d,每1000mL搖瓶培養基的原料包括:3g豆箔粉、25g白糖、0.83g酵母膏、0.83g磷酸二氫鉀、0.83g硫酸鎂。

所述步驟(1)中,發酵罐充氣培養的溫度為23℃,充氣培養時間為12d,充氣壓強為0.02MPa,每1000mL發酵罐充氣培養的培養基的原料包括:3g豆箔粉、25g白糖、1g硫酸鎂、1g蛋白胨、1g磷酸二氫鉀。

所述步驟(2)中,培養溫度為23℃,培養時間為12d,每1000mL無機硒培養基的原料包括:3g豆箔粉、25g白糖、0.83g蛋白胨、0.83g磷酸二氫鉀、0.83g硫酸鎂和400mg無機硒。

所述步驟(3)中,加入的大豆、玉米、小麥與有機硒猴頭菇菌液形成的混合物的初始液體含量為43%,并浸泡至混合物中的液體被完全吸收,浸泡溫度為40℃,所述的大豆、玉米和小麥為粒徑為5mm的顆粒。

浸泡前,先將步驟(2)得到的有機硒猴頭菇菌液搖勻,使有機硒猴頭菇菌液中的猴頭菇菌絲體均勻分散在菌液中。

所述步驟(4)中,富硒固體培養基的原料按照質量百分比包括:5%大豆和25%小麥,余量為玉米。

所述步驟(4)的具體培養方法包括以下步驟:在百級凈化培養房中,將接種的猴頭菇液體菌種先在23℃溫度下,培養12d,然后在無菌條件下將富硒固體培養基表面生長的猴頭菇菌絲體搓散后,繼續在23℃溫度下,培養8d,再次在無菌條件下將富硒固體培養基表面生長的猴頭菇菌絲體搓散后,繼續在23℃溫度下,培養6d,得到富硒猴頭菇菌絲體。

實施例4

一種富硒猴頭菇菌絲體的培養方法,包括以下步驟:

(1)猴頭菇液體菌種的培養:將猴頭菇母種依次經過PDA培養基培養、搖瓶培養和發酵罐充氣培養得到猴頭菇液體菌種;

(2)有機硒猴頭菇菌液的培養:制備無機硒培養基,并將所述步驟(1)中得到的部分猴頭菇液體菌種接種至無機硒培養基中進行培養,得到有機硒猴頭菇菌液;

(3)富硒原料的制備:將大豆、玉米和小麥按一定比例混合而成的混合物使用所述步驟(2)中得到的有機硒猴頭菇菌液浸泡一定時間,然后晾干,得到富硒原料;

(4)富硒固體培養基的培養:將步驟(3)中制備的富硒原料滅菌、冷卻后制備成富硒固體培養基,然后接種所述步驟(1)中的剩余猴頭菇液體菌種并進行培養,得到富硒猴頭菇菌絲體。

所述步驟(1)中,PDA培養基培養的溫度為22℃,培養時間為14d;所述PDA培養基的制備方法包括如下步驟:取馬鈴薯250g加入1000mL的水煮熟,然后過濾,得到濾液,往濾液依次加入25g葡萄糖、25g瓊脂、0.8g硫酸鎂、1.5g磷酸氫二鉀、7g豆粕粉、4g蛋白胨和2.5g酵母粉,加熱至溶解,并補水至1000mL,將得到的培養液在122℃溫度下滅菌30min,然后冷卻至22℃后即得到PDA培養基。

所述步驟(1)中,搖瓶培養的溫度為22℃,培養時間為6d,每1000mL搖瓶培養基的原料包括:4g豆箔粉、28g白糖、1.2g酵母膏、1.2g磷酸二氫鉀、1.2硫酸鎂。

所述步驟(1)中,發酵罐充氣培養的溫度為22℃,充氣培養時間為12d,充氣壓強為0.02MPa,每1000mL發酵罐充氣培養的培養基的原料包括:4g豆箔粉、28g白糖、2g硫酸鎂、2g蛋白胨、2g磷酸二氫鉀。

所述步驟(2)中,培養溫度為22℃,培養時間為12d,每1000mL無機硒培養基的原料包括:4g豆箔粉、28g白糖、1.2g蛋白胨、1.2g磷酸二氫鉀、1.2g硫酸鎂和500mg無機硒。

所述步驟(3)中,加入的大豆、玉米、小麥與有機硒猴頭菇菌液形成的混合物的初始液體含量為44%,并浸泡至混合物中的液體被完全吸收,浸泡溫度為42℃,所述的大豆、玉米和小麥為粒徑為6mm的顆粒。

浸泡前,先將步驟(2)得到的有機硒猴頭菇菌液搖勻,使有機硒猴頭菇菌液中的猴頭菇菌絲體均勻分散在菌液中。

所述步驟(4)中,富硒固體培養基的原料按照質量百分比包括:4%大豆和28%小麥,余量為玉米。

所述步驟(4)的具體培養方法包括以下步驟:在百級凈化培養房中,將接種的猴頭菇液體菌種先在22℃溫度下,培養13d,然后在無菌條件下將富硒固體培養基表面生長的猴頭菇菌絲體搓散后,繼續在22℃溫度下,培養8d,再次在無菌條件下將富硒固體培養基表面生長的猴頭菇菌絲體搓散后,繼續在22℃溫度下,培養7d,得到富硒猴頭菇菌絲體。

實施例5

一種富硒猴頭菇菌絲體的應用,將實施例1-4中得到的猴頭菇菌絲體連同所述富硒固體培養基一起烘干后,粉碎成80-100目的細粉,得到富硒猴頭菇菌絲粉。

上述實施例為本發明較佳的實現方案,除此之外,本發明還可以其它方式實現,在不脫離本發明構思的前提下任何顯而易見的替換均在本發明的?;し段е?。

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一種 猴頭菇 菌絲體 培養 方法 及其 應用
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