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维戈塞尔塔是什么球队: 利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201810926012.5

申請日:

20180815

公開號:

CN109122261A

公開日:

20190104

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A01G31/00,A01C1/00,G01N30/02 主分類號: A01G31/00,A01C1/00,G01N30/02
申請人: 魯東大學
發明人: 金成武,孫永云,況鵬群,孫燕琳,周瑩,段樹成,曲珊珊
地址: 264025 山東省煙臺市芝罘區紅旗中路186號
優先權: CN201810926012A
專利代理機構: 北京金宏來專利代理事務所(特殊普通合伙) 代理人: 許振強;苗彩娟
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201810926012.5

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,包括以下方法步驟:預處理蘿卜種子;將適量預處理后種子,均勻灑在育苗盤中,育苗盤底部鋪設經過一定濃度的海水預潤濕的種子培養基,將育苗盤放在恒溫的保溫箱中進行培養;采收培養后的蘿卜芽,沖洗去除鹽分后置于密封袋中,進行冷凍干燥并研磨;將所得研磨粉末置于極性有機溶劑中溶解得待檢測溶液,采用高效液相色譜法分析檢測經海水處理后的蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷提取物的含量。本發明的優點為以蘿卜種子在一定濃度海水培養后,促進蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷的生成,顯著提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷的含量。

權利要求書

1.一種利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,其特征在于,包括以下方法步驟:預處理蘿卜種子;將適量預處理后種子,均勻灑在育苗盤中,育苗盤底部鋪設經過一定濃度的海水預潤濕的種子培養基,將育苗盤放在恒溫的保溫箱中進行培養;采收培養后的蘿卜芽,沖洗去除鹽分后置于密封袋中,進行冷凍干燥并研磨;所得研磨粉末置于極性有機溶劑中溶解得待檢測溶液;采用高效液相色譜法分析檢測待檢測溶液中經海水處理后的蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷提取物的含量。2.根據權利要求1所述的利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,其特征在于:所述種子培養基為經過一定濃度的海水預潤濕的紗布層,所述紗布層為包括多層紗布,海水的濃度為0%~20%,所述育苗盤貼上與海水濃度相對應的標簽。3.根據權利要求1或2所述的利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,其特征在于:所述種子培養基為經過一定濃度的海水預潤濕的紗布層,,所述紗布層為包括多層紗布,海水的濃度為5%,所述育苗盤貼上與海水濃度相對應的標簽。4.根據權利要求1所述的利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,其特征在于:所述預處理蘿卜種子的具體過程為:去除蘿卜種子的雜物,用蒸餾水清洗蘿卜種子,清洗過程中多次重復攪拌蒸餾水,靜置后撇去蒸餾水上層漂浮物,以擇取粒大飽滿的蘿卜種子,用作預處理后種子。5.根據權利要求1所述的利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,其特征在于:所述培養時,定期更換種子培養基相應濃度的海水和對蘿卜種子噴淋,更換后種子培養基的海水預潤濕濃度與更換前種子培養基的海水預潤濕濃度保持不變。6.根據權利要求1所述的利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,其特征在于:所述沖洗去除鹽分為采用蒸餾水反復沖洗,直至去除蘿卜芽的鹽分,所述冷凍干燥過程采用冷凍干燥機,所述冷凍干燥機的冷凍溫度為-70℃,冷凍干燥時長為24小時。7.根據權利要求1所述的利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,其特征在于:所述采用高效液相色譜法的檢測條件如下:4.6×150mm,5um的InerstilODSC色譜柱;流動相A為:1%甲醇-水溶液,其中的水溶液為含0.1%三氟乙酸;流動相B為:30%甲醇-水溶液,其中的水溶液為含0.1%三氟乙酸;梯度洗脫程序:時長0-30min,比例0-100%;流動相流速為1ml/min;柱溫30℃;檢測波長235nm;進樣量:10μL。8.根據權利要求1-7任一項所述的利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,其特征在于:所述培養包括黑暗培養,所述黑暗培養的培養條件為:培養溫度為20~30℃,培養周期為7~10天。9.根據權利要求1-7任一項所述的利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,其特征在于:所述培養包括光照培養,所述光照培養的培養條件為:培養光照時間為8~20h/d,光照強度為1000~3000lx,培養溫度為20~30℃,培養周期為7~10天。

說明書

技術領域

本發明涉及天然產物轉化及提取技術領域,具體涉及一種利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷的方法。

背景技術

蘿卜(Raphanus sativus)為十字花科蘿卜屬的一二年生草本雙子葉植物,是原產我國的一種根菜類蔬菜。蘿卜芽是蘿卜種子萌發形成的肥嫩幼苗,又叫娃娃蘿卜、娃娃纓蘿卜或貝殼菜。蘿卜芽具有很高的營養價值,能夠降低多種癌癥的發生危險。作為十字花科芽苗菜中最常見的一種,蘿卜芽富含還原型蘿卜硫苷(Glucoraphasatin),即4-甲硫基-3-丁烯基硫代葡萄糖(4-Methylsulfanyl-3-butenyl glucosinolate)。蘿卜硫苷作為脂肪族硫代葡萄糖苷,是一類具有強大抗癌活性的天然活性物質,其降解物為異硫代氰酸鹽,其酶解產物為具有顯著抗癌活性的還原型蘿卜硫素(Raphasatin)?;乖吐懿妨蛩胤腫詠峁怪械囊熗蚯杷嶧歐淺;釔?,極易與含巰基或羥基的化合物反應,致使其失去抗癌活性。隨著生活水平的提高,人們對于食物多樣性和健康的關注與日俱增,世界各國對芽苗菜的營養價值和藥用價值進行了廣泛的研究,認為其是一種難得的優質食品及功能食品能源,因其營養豐富,具保健功效而備受消費者青睞。

海水含有豐富的離子、微量元素和其他有機、無機物質的復合鹽體系,它對植物具有滲透作用、營養作用和毒害作用。低濃度的海水對植物的傷害可被自身的緩解功能所抵消,甚至可促進植物的生長及有效成分的合成。

近幾年來,由于淡水資源的短缺匱乏,農作物生長和產量受到限制,水資源的缺乏是影響農業發展的主要原因,因而,海水灌溉農業成了新的農業發展方向。山東省比鄰黃海和渤海,又是我國黃河入??謔》?,具備優越的海水資源,利用開發海水資源對發展山東省農業也具有重大影響。

蘿卜芽可以作為可食用的新型蔬菜,并用于開發各種新型的風味食品和功能性食品。目前,蘿卜芽在國內外市場比較短缺,要加強對蘿卜芽產業的研究和開發,切實解決生產中的問題,開發適應市場的新型產品,使得蘿卜芽產品具有更大的發展空間和更廣闊的發展前景。

發明內容

(一)解決的技術問題

針對現有技術的不足,本發明提供了一種利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,以蘿卜種子在一定濃度海水培養后,促進蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷的生成,顯著提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷的含量。

(二)技術方案

為實現以上目的,本發明通過以下技術方案予以實現:

一種利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,包括以下方法步驟:預處理蘿卜種子;將適量預處理后種子,均勻灑在育苗盤中,育苗盤底部鋪設經過一定濃度的海水預潤濕的種子培養基,將育苗盤放在恒溫的保溫箱中進行培養;采收培養后的蘿卜芽,沖洗去除鹽分后置于密封袋中,進行冷凍干燥并研磨;所得研磨粉末置于極性有機溶劑中溶解得待檢測溶液;采用高效液相色譜法分析檢測待檢測溶液中經海水處理后的蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷提取物的含量。

優選的是,所述種子培養基為經過一定濃度的海水預潤濕的紗布層,所述紗布層為包括多層紗布,海水的濃度為0%~20%,所述育苗盤貼上與海水濃度相對應的標簽。

優選的是,所述種子培養基為經過一定濃度的海水預潤濕的紗布層,,所述紗布層為包括多層紗布,海水的濃度為5%,所述育苗盤貼上與海水濃度相對應的標簽。

優選的是,所述預處理蘿卜種子的具體過程為:去除蘿卜種子的雜物,用蒸餾水清洗蘿卜種子,清洗過程中多次重復攪拌蒸餾水,靜置后撇去蒸餾水上層漂浮物,以擇取粒大飽滿的蘿卜種子,用作預處理后種子。

優選的是,所述培養時,定期更換紗布層更換種子培養基相應濃度的海水和對蘿卜種子噴淋,更換后種子培養基的海水預潤濕濃度與更換前種子培養基的海水預潤濕濃度保持不變。

優選的是,所述沖洗去除鹽分為采用蒸餾水反復沖洗,直至去除蘿卜芽的鹽分,所述冷凍干燥過程采用冷凍干燥機,所述冷凍干燥機的冷凍溫度為-70℃,冷凍干燥時長為24小時。

優選的是,所述采用高效液相色譜法的檢測條件如下:4.6×150mm,5um的Inerstil ODS C18色譜柱;流動相A為:1%甲醇-水溶液,其中的水溶液為含0.1%三氟乙酸;流動相B為:30%甲醇-水溶液,其中的水溶液為含0.1%三氟乙酸;梯度洗脫程序:時長0-30min,比例0-100%;流動相流速為1ml/min;柱溫30℃;檢測波長235nm;進樣量:10μL。

優選的是,所述培養包括黑暗培養,所述黑暗培養的培養條件為:培養溫度為20~30℃,培養周期為7~10天。

優選的是,所述培養包括光照培養,所述光照培養的培養條件為:培養光照時間為8~20h/d,光照強度為1000~3000lx,培養溫度為20~30℃,培養周期為7~10天。

(三)有益效果

本發明具備以下有益效果:

本發明利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,以蘿卜種子在一定濃度海水培養后,促進蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷的生成,提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷的含量,原材料價格低廉易取,生產效率高,易于實現工業化,切實解決提高還原型蘿卜硫苷含量生產中的問題,開發適應市場的新型產品,使得蘿卜芽產品具有更大的發展空間和更廣闊的發展前景。

附圖說明

圖1為不同濃度海水處理蘿卜芽的還原型蘿卜硫苷的高效液相色譜對比圖。

圖2為5%濃度下海水處理蘿卜芽的還原型蘿卜硫苷的高效液相色譜對比圖。

圖3為5%濃度下海水處理蘿卜芽的還原型蘿卜硫苷的含量柱狀圖。

具體實施方式

下面將結合本發明實施例中的附圖,對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述,顯然,所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例,而不是全部的實施例?;詒痙⒚髦械氖凳├?,本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例,都屬于本發明?;さ姆段?。

實施例一:

本發明公開一種利用海水處理提高蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的方法,該方法有以下制備步驟得到,具體為:

(1)預處理蘿卜種子。

(2)將適量預處理后種子,均勻灑在育苗盤中,育苗盤底部鋪設經過一定濃度的海水預潤濕的種子培養基,將育苗盤放在恒溫的保溫箱中進行培養;

(3)采收培養后的蘿卜芽,沖洗去除鹽分后置于密封袋中,進行冷凍干燥并研磨;

(4)所得研磨粉末置于乙醇、甲醇等極性有機溶劑中溶解得待檢測溶液;

(5)采用高效液相色譜法分析檢測待檢測溶液中經海水處理后的蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷提取物的含量。

在蘿卜種子培養前,需要預處理蘿卜種子,預處理包括種子清理、清洗和挑選過程。預處理蘿卜種子的具體過程為:去除蘿卜種子的雜物,將種子置于大燒杯中,加入適量的蒸餾水沒過種子,用蒸餾水清洗蘿卜種子,清洗過程中用玻璃棒多次重復攪拌蒸餾水,以重復三次為宜,靜置后撇去蒸餾水上層漂浮物,留下沉淀的種子,以擇取粒大飽滿的蘿卜種子,用作預處理后種子。

在蘿卜種子經過預處理后,對蘿卜種子進行海水中的黑暗培養,黑暗條件下,培養溫度為20~30℃、培養周期為7~10天。此處蘿卜芽的培養溫度以25℃為宜、培養周期以7天為宜。海水培養過程中所使用的海水預潤濕的種子培養基,上述種子培養基一方面可用于固定培養中的蘿卜芽,使其直立生長,另一方面可為蘿卜芽培養過程中提供海水等養分來源。種子培養基,需具有透氣性和吸水性特點。例如種子培養基為經過一定濃度的海水預潤濕的紗布層,紗布層可包括多層紗布。所得研磨粉末置于乙醇、甲醇等極性有機溶劑中溶解得待檢測溶液。采用高效液相色譜法分析檢測經海水處理后的蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷提取物的含量,其中采用高效液相色譜法的檢測條件如下:4.6×150mm,5um的Inerstil ODS C18色譜柱;流動相A為:1%甲醇-水溶液,其中水溶液含0.1%三氟乙酸;流動相B為:30%甲醇-水溶液,其中水溶液含0.1%三氟乙酸;梯度洗脫程序:時長0-30min,比例0-100%;流動相流速為1ml/min;柱溫30℃;檢測波長235nm;進樣量:10μL。

實施例二:

繼續實施例一,本發明所使用的海水濃度區間為0%~20%,即分為多濃度區間以統計海水濃度對蘿卜芽中蘿卜硫苷的含量的影響。例如在海水培養過程中,選取蘿卜種子為100g均勻置于育苗盤中,選取的海水濃度分別為:0%,5%,10%,15%,20%,共5組濃度,將育苗盤貼上與上述海水濃度相對應的標簽。同時,為確保培養過程的可靠性,可在5組濃度的海水下各設3個育苗盤,各組濃度均做三組平行試驗,以確保試驗結果。紗布層為包括四層紗布,并用上述相應的濃度的海水預潤濕,然后放在恒溫的保溫箱中進行黑暗培養,黑暗培養時,海水預潤濕的紗布層采用醫用紗布,種子在發芽生根過程中會透過該醫用紗布生根,長成一體,可定期更換紗布層對應濃度的海水和對蘿卜種子噴淋。在經過一定培養周期的海水培養后,需對蘿卜芽進行采集、干燥和磨粉。此處,沖洗去除鹽分時應除掉種皮后用蒸餾水反復沖洗,以沖洗3次為宜。將沖洗后,同一濃度下培養的蘿卜芽放置在一個密封袋中,在冷凍干燥時采用冷凍干燥機,-70℃下干燥24個小時,最后用研缽研成粉末狀,密封并做好標記以備用。

表1不同濃度海水處理蘿卜芽的還原型蘿卜硫苷含量

表1為不同濃度海水處理蘿卜芽的還原型蘿卜硫苷含量,圖1為不同濃度海水處理蘿卜芽的還原型蘿卜硫苷的高效液相色譜對比圖,其中,海水濃度區間為上述選取的0%~20%。

實驗數據表明,蘿卜種子在經過不同濃度海水培養后,蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷的含量會發生不同程度的變化。海水濃度為5%、10%、15%和20%處理的蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷的含量,與海水濃度0%,即未處理的蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量相比分別增加了3.71倍、2.28倍、1.57倍和1.46倍。

由此可見,海水處理促進蘿卜芽中蘿卜硫苷的生成,尤其是,在海水濃度為0%~5%之間隨著海水濃度的升高而增加,而在海水濃度為5%~20%之間隨著海水濃度的升高而降低,但海水處理濃度20%的蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷的含量依然比0%,即未處理時的還原型蘿卜芽含量高。尤其是海水濃度為5%時,蘿卜芽中蘿卜硫苷的含量最高。

實施例三

繼續實施例一,

本發明所使用的海水濃度為5%,分別統計蘿卜種子在5%海水培養過程中,黑暗和光照處理引起蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的變化。

例如在海水培養過程中,選取蘿卜種子為100g均勻置于育苗盤中,選取的海水濃度為5%,將育苗盤貼上與上述海水濃度相對應的標簽。同時,為確保培養過程的可靠性,可在該濃度的海水下設兩組育苗盤,各組育苗盤均做三組平行試驗,以確保試驗結果。紗布層為包括四層紗布,并用5%濃度的海水預潤濕,然后放在恒溫的保溫箱中進行培養。黑暗培養的培養條件為:培養溫度為20~30℃,培養周期為7~10天。光照培養的培養條件為:培養光照時間為8~20h/d,光照強度為1000~3000lx,培養溫度為20~30℃,培養周期為7~10天,此處,培養光照時間最優為16h/d,光照強度最優為2000lx。在黑暗培養和光照培養同時,海水預潤濕的紗布層采用醫用紗布,種子在發芽生根過程中會透過該醫用紗布生根,長成一體,可定期更換紗布層對應濃度的海水和對蘿卜種子噴淋。在經過一定培養周期的海水培養后,需對蘿卜芽進行采集、干燥和磨粉。此處,沖洗去除鹽分時應除掉種皮后用蒸餾水反復沖洗,以沖洗3次為宜。將沖洗后,同一濃度下培養的蘿卜芽放置在一個密封袋中,在冷凍干燥時采用冷凍干燥機,-70℃下干燥24個小時,最后用研缽研成粉末狀,密封并做好標記以備用。

圖2為5%濃度下海水處理蘿卜芽的還原型蘿卜硫苷的高效液相色譜對比圖。圖3為5%濃度下海水處理蘿卜芽的還原型蘿卜硫苷的含量柱狀圖。實驗數據表明,蘿卜種子在5%海水培養過程中,黑暗和光照處理會引起蘿卜芽中還原型蘿卜硫苷含量的變化。實驗結果表明,在經過5%濃度海水培養后,還原型蘿卜硫苷含量在光照處理比黑暗處理增加1.97倍。

由此可見,海水處理和光照均促進蘿卜芽中蘿卜硫苷的生成,尤其是海水濃度為5%時,且適宜的光照培養條件下,蘿卜芽中蘿卜硫苷的含量明顯高于未經過海水處理或黑暗處理下的蘿卜硫苷的含量。

需要說明的是,在本文中,諸如術語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含,從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設備不僅包括那些要素,而且還包括沒有明確列出的其他要素,或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設備所固有的要素。

盡管已經示出和描述了本發明的實施例,對于本領域的普通技術人員而言,可以理解在不脫離本發明的原理和精神的情況下可以對這些實施例進行多種變化、修改、替換和變型,本發明的范圍由所附權利要求及其等同物限定。

關 鍵 詞:
利用 海水 處理 提高 蘿卜 芽中還 原型 含量 方法
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