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西班牙人vs维戈塞尔塔直播: 扭瓣美冠蘭的快速繁殖方法.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201810396521.1

申請日:

20180428

公開號:

CN108739376A

公開日:

20181106

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A01H4/00 主分類號: A01H4/00
申請人: 中國科學院武漢植物園
發明人: 李洪林,王青鋒,胡光萬,鐘志強
地址: 430074 湖北省武漢市洪山區魯磨路特1號
優先權: CN201810396521A
專利代理機構: 武漢宇晨專利事務所 代理人: 黃瑞棠
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201810396521.1

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種扭瓣美冠蘭的快速繁殖方法,涉及植物組織培養技術,具體是一種借助MS基本培養基和附加的不同成份物質對扭瓣美冠蘭進行快速繁殖的方法。本方法是:①以扭瓣美冠蘭自花授粉植株的果莢作為外植體,切開果莢,將種子接入配制好的固體改良MS培養基中;②培養基包括改良的MS基本培養基和附加的不同成份物質;③暗培養,培養溫度為20~25℃,培養時間為30~60天;④種子萌發后,轉入每天16小時光培養,形成原球莖或長出新芽,以后每25~30天擴繁一次。與現有技術相比,方法易行,操作方便,繁殖速度快,不受季節限制,每個果莢有幾千至幾萬個種子,所以可以實現其規?;?,以滿足市場的要求。

權利要求書

1.一種扭瓣美冠蘭的快速繁殖方法,其特征在于包括下了步驟:①以扭瓣美冠蘭自花授粉植株的果莢作為外植體,首先將果莢的表面洗凈,用75%酒精浸泡10~30秒鐘,用0.1%氯化汞加吐溫兩滴消毒15~20分鐘,用無菌水沖洗6~8次,將消毒好的果莢放在濾紙上吸去表面水份,切開果莢,將種子接入配制好的固體改良MS培養基中;②培養基包括改良的MS基本培養基和附加的不同成份物質:A、改良的MS基本培養基組分及其單位:mg/L:硝酸氨800~1650,硝酸鉀850~1900,二水氯化鈣400~550,七水硫酸鎂180~370,磷酸二氫鉀80~170,碘化鉀0.83,硼酸6.2,四水硫酸錳22.3,七水硫酸鋅8.6,二水鉬酸鈉0.25,五水硫酸銅0.025,六水氯化鈷0.025,七水硫酸亞鐵27.8,乙二胺四乙酸二鈉37.3,肌醇100,煙酸0.5,鹽酸吡哆醇0.5,鹽酸硫胺素0.1,甘氨酸2;B、附加的不同成份物質組分及其單位:mg/L:6-芐氨基嘌呤2.0~6.0mg/L,萘乙酸0.5~5.0mg/L,吲哚丁酸0.5~1.0mg/L,花寶1號1~2g/L,花寶2號2~4g/L,瓊脂5~6g/L,明膠1.5~2.5g/L,糖40~60g/L,活性炭0.2%~0.5%;③暗培養,培養溫度為20~25℃,培養時間為30~60天;④種子萌發后,轉入每天16小時光培養,形成原球莖或長出新芽,以后每25~30天擴繁一次。

說明書

技術領域

本發明涉及植物組織培養技術,尤其涉及一種扭瓣美冠蘭的快速繁殖方法;具體地說,是一種借助MS基本培養基和附加的不同成份物質對扭瓣美冠蘭進行快速繁殖的方法。

背景技術

扭瓣美冠蘭(Eulophia streptopetala Lindl.)為蘭科美冠蘭屬植物,是陸生多年生草本。此屬植物主要分布于非洲,常見于東非海拔650-3000米高的石質性灌叢、草地等地方;其次是亞洲熱帶與亞熱帶地區,美洲和澳大利亞也有分布。扭瓣美冠蘭觀賞價值較高,其植株高度可達1.5米,假鱗莖圓錐形,叢生于地面;葉片長4-9cm,帶狀至披針狀,整株呈披散型;地下根較為粗壯肥厚;總狀花序,花序最高可達1.5米;單花萼片呈淺綠色帶紫褐色半點,花瓣黃色,兩微扭曲,故此得名;花冠直徑3-5cm;果梗長約1厘米;花期4-5月,果期5-6月。根據養護條件的差異和物種生態型的不同,扭瓣美冠蘭的花型大小以及花色變異較大。

扭瓣美冠蘭花期較長,易于養護和管理,是一種資源極為豐富的花卉,可作為一種理想的園藝觀賞品種進行推廣和應用。傳統的扭瓣美冠蘭繁殖方法是采用分株法進行繁殖,但其繁殖系數極低;因此,盡管擁有優越的觀賞價值,卻無法進行大規模工廠化生產,遠遠不能滿足人們的觀賞需求。目前,急需開發新的技術和方法來提高扭瓣美冠蘭的繁殖效率。

發明內容

本發明的目的就在于提供一種扭瓣美冠蘭的快速繁殖方法,此方法易行,操作方便,繁殖速度快,可加快扭瓣美冠蘭優良單株的快速繁殖。

本發明的目的是這樣實現的:

具體地說,包括下列步驟:

①以扭瓣美冠蘭自花授粉植株的果莢作為外植體,首先將果莢的表面洗凈,用75%酒精浸泡10~30秒鐘,用0.1%氯化汞加吐溫兩滴消毒15~20分鐘,用無菌水沖洗6~8次,將消毒好的果莢放在濾紙上吸去表面水份,切開果莢,將種子接入配制好的固體改良MS培養基中;

②培養基包括改良的MS基本培養基和附加的不同成份物質:

A、改良的MS基本培養基

組分及其單位:mg/L:

硝酸氨(NH4NO3)800~1650,

硝酸鉀(KNO3)850~1900,

二水氯化鈣(CaCl2·2H2O)400~550,

七水硫酸鎂(MgSO4·7H2O)180~370,

磷酸二氫鉀(KH2PO4)80~170,

碘化鉀(KI)0.83,

硼酸(H3BO3)6.2,

四水硫酸錳(MnSO4·4H2O)22.3,

七水硫酸鋅(ZnSO4·7H2O)8.6,

二水鉬酸鈉(Na2MoO4·2H2O)0.25,

五水硫酸銅(CuSO4·5H2O)0.025,

六水氯化鈷(CoCl2·6H2O)0.025,

七水硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O)27.8,

乙二胺四乙酸二鈉(Na2·EDTA·2H2O)37.3,

肌醇100,

煙酸0.5,

鹽酸吡哆醇0.5,

鹽酸硫胺素0.1,

甘氨酸2;

B、附加的不同成份物質

組分及其單位:mg/L:

6-芐氨基嘌呤(6-Benzyl aminopurine,簡稱BA)2.0~6.0mg/L,

萘乙酸(I-NaphthyIacetic acid,簡稱NAA)0.5~5.0mg/L,

吲哚丁酸(I-NaphthyIacetic acid,簡稱IBA)0.5~1.0mg/L,

花寶1號(N-P-K,7-6-19)1~2g/L,

花寶2號(N-P-K,20-20-20)2~4g/L,瓊脂5~6g/L,

明膠(Phytagel)1.5~2.5g/L,

糖40~60g/L,

活性炭0.2%~0.5%;

③暗培養,培養溫度為20~25℃,培養時間為30~60天;

④種子萌發后,轉入每天16小時光培養,形成原球莖或長出新芽,以后每25~30天擴繁一次。

工作機理:

每個植物細胞里都含有該植物一整套遺傳物質,都有可能發展成一株完整的植物(即細胞全能性),只不過在特定條件下才會表達;組織培養基于此原理,可以將已分化的終端細胞或正在分化的植物組織脫分化,誘導形成愈傷組織,再在愈傷組織上形成新的叢生芽,然后,經過誘導形成正常的根及完整的植株;蘭科植物外植體的組培,正是基于此原理。

除了外植體可以組培繁殖,蘭科植物種子也常作為組培的材料。

蘭科植物的種子因為沒有胚乳,所以在自然環境種很難發芽,只有與特定的共生菌共生后,由共生菌提供營養才能發芽;除了共生發芽,組培也能達到使之萌發的目的;本發明利所采用是用組織培養的方式人為提供營養物質,在無菌條件下促使蘭花種子萌發。

種子萌發后長出的原球莖,在一定條件下形成根和芽,進而形成完整植株;當然,原球莖也可以用作增殖培養。

與現有技術相比,本發明具有以下優點和積極效果:

方法易行,操作方便,繁殖速度快,不受季節限制,每個果莢有幾千至幾萬個種子,所以可以實現其規?;?,以滿足市場的要求。

附圖說明

圖1是種子萌動圖片;

圖2是種子萌芽圖片;

圖3是抽芽生根圖片;

圖4是移栽苗圖片;

圖5是半年生苗圖片。

具體實施方式

下面結合實施例詳細說明:

1、實施例1

以植物扭瓣美冠蘭的果莢作為外植體,首先將種表皮洗凈,將果莢用75%酒精浸泡30秒鐘,用0.1%氯化汞加兩滴吐溫消毒20分鐘,用無菌水沖洗8次;并將消毒好的果莢放在濾紙上吸去表面水份,從果莢中切開,將種子接入配制好的改良MS培養基中,這種培養基包括改良MS基本培養基附加不同成份的物質,其中附加成份為6-芐氨基嘌呤(6-Benzyl aminopurine 簡稱BA)2mg/L、萘乙酸(I-NaphthyIacetic acid簡稱NAA)0.5mg/L、花寶1號(N-P-K,7-6-19)1.5g/L、花寶2號(N-P-K,20-20-20)2.5g/L、瓊脂粉5g/L、糖40g/L、在暗培養,溫度為20~25℃,培養30~60天,種子萌發,轉入每天16小時光培養,長出新的原球莖,再將原球莖接入新的(增殖)培養基中抽芽;

改良MS基本培養基和增殖培養基的附加成份,單位:mg/L:

硝酸氨(NH4NO3)800~1650,

硝酸鉀(KNO3)850~1900,

二水氯化鈣(CaCl2·2H2O)400~550,

七水硫酸鎂(MgSO4·7H2O)180~370,

磷酸二氫鉀(KH2PO4)80~170,

碘化鉀(KI)0.83,

硼酸(H3BO3)6.2,

四水硫酸錳(MnSO4·4H2O)22.3,

七水硫酸鋅(ZnSO4·7H2O)8.6,

二水鉬酸鈉(Na2MoO4·2H2O)0.25,

五水硫酸銅(CuSO4·5H2O)0.025,

六水氯化鈷(CoCl2·6H2O)0.025,

七水硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O)27.8,

乙二胺四乙酸二鈉(Na2·EDTA·2H2O)37.3,

肌醇100,

煙酸0.5,

鹽酸吡哆醇0.5,

鹽酸硫胺素0.1,

甘氨酸2。

其結果是:在暗培養,溫度為20~25℃的條件下,培養30~60天,種子萌發;種子萌發后轉入每天16小時光培養,長出新的原球莖,如圖1。

2、實施例2

以扭瓣美冠蘭果莢作為外植體,首先將果莢表面洗凈,將果莢用75%酒精浸泡30秒鐘,用0.1%氯化汞加兩滴吐溫消毒20分鐘,用無菌水沖洗8次;然后將消毒好的果莢從中間切開,將種子接入配制好的培養基中,這種培養基包括改良MS基本培養基附加不同成份的物質,其中附加成份為6-芐氨基嘌呤(6-Benzyl aminopurine 簡稱BA)2.5mg/L、萘乙酸(I-NaphthyIacetic acid簡稱NAA)0.5mg/L、花寶1號(N-P-K,7-6-19)1g/L、花寶2號(N-P-K,20-20-20)1.5g/L、明膠(Phytagel)1.5g/L、糖20g/L、暗培養,溫度為20~25℃,培養30~60天,便長出原球莖(形成原球莖后調整培養條件為每天16小時的光培養),使原球莖抽出幼芽,以后每30~45天擴繁一次。

其結果是:在實施例2中所用的培養基,可以使種子萌發、形成原莖并長出幼芽,不需要轉入增殖培養基中長出幼芽,如圖2。

3、實施例3:

當實施例1、實施例2增殖到所需苗木數量時,利用配制好的壯苗培養基促進幼芽長大從而達到壯苗目的,改良MS基本培養基成份同上,附加物質為:6-芐氨基嘌呤(6-Benzyl aminopurine 簡稱BA)1.0mg/L、萘乙酸(I-NaphthyIacetic acid簡稱NAA)0.5mg/L、活性炭0.2%、花寶1號(N-P-K,7-6-19)1g/L、瓊脂5g/L、糖60g/L,活性炭0.2%;光照培養,光照強度2000 Lx,每天光照16小時,溫度為25℃,培養30天,待苗長至3-4 cm高時即可進行生根培養。將3~4㎝高的苗接入配制好的生根培養基中,生根培養基包括1/2MS基本培養基和附加不同成份的物質,1/2 MS基本培養基是將改良MS基本培養基成份用量減半,改良MS基本培養基成份同上,附加物質為:吲哚丁酸IBA 0.5mg/L、花寶1號(N-P-K,7-6-19)1g/L、明膠(Phytagel)1.5g/L、糖30g/L、活性炭0.3%;光照培養,光強2000 Lx,每天光照16小時,溫度為25℃,培養25天,即可長出2~3條根,根粗壯,約2cm長。

其結果是:在壯苗培養基中培養幼苗長到3~4厘米高的壯苗,從而達到可以生根培養的要求;把3~4厘米高的壯苗轉入生根培養基中即可生根,如圖3。

圖4是移栽苗圖片,可看出一個月后移栽成活苗。

圖5是半年生苗圖片,可看出半年生長的健壯苗。

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扭瓣美冠蘭 快速 繁殖 方法
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