• / 8
  • 下載費用:30 金幣  

西班牙人对维戈塞尔塔集锦: 茯苓皮提取物及其在制備利尿作用藥物中的應用.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201210168614.1

申請日:

20120528

公開號:

CN102697820A

公開日:

20121003

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A61K36/076,A61P7/10 主分類號: A61K36/076,A61P7/10
申請人: 西北大學
發明人: 趙英永,林瑞超,程顯隆,魏鋒,孫文基
地址: 710069 陜西省西安市太白北路229號
優先權: CN201210168614A
專利代理機構: 西安西達專利代理有限責任公司 代理人: 謝鋼
PDF完整版下載: PDF下載
法律狀態
申請(專利)號:

CN201210168614.1

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種茯苓皮提取物,其通過以下步驟得到:(1)茯苓皮經干燥、粉碎后,乙醇浸泡、滲漉,回收乙醇,濃縮得棕色膏狀物;(2)棕色膏狀物用水溶解,乙酸乙酯萃取,回收乙酸乙酯,濃縮得膏狀物;(3)步驟(2)所得膏狀物溶于乙醇,用硅膠拌樣,上100-200目的硅膠柱,石油醚-乙酸乙酯洗脫液洗脫,收集洗脫液,合并,濃縮,最后得茯苓皮提取物。本發明提取物有保鉀排鈉的作用,其利尿作用比速尿作用時間長,具有長效、毒副作用低等特點,可為臨床提供一種新的利尿藥物候選藥物。

權利要求書

1.茯苓皮提取物,其特征在于:茯苓皮提取物通過以下步驟得到:(1)茯苓皮經干燥、粉碎后,乙醇浸泡、滲漉,回收乙醇,濃縮得棕色膏狀物;(2)棕色膏狀物用水溶解,乙酸乙酯萃取,回收乙酸乙酯,濃縮得膏狀物;(3)步驟(2)所得膏狀物溶于乙醇,用硅膠拌樣,上100-200目的硅膠柱,石油醚-乙酸乙酯洗脫液洗脫,收集洗脫液,合并,濃縮,最后得茯苓皮提取物。2.根據權利要求1所述的茯苓皮提取物,其特征在于:步驟(1)中,用3-7倍體積的95%乙醇浸泡12-36小時后開始滲漉。3.根據權利要求1所述的茯苓皮提取物,其特征在于:步驟(2)中,用乙酸乙酯萃取3-5次。4.根據權利要求1所述的茯苓皮提取物,其特征在于:步驟(3)中,使用石油醚-乙酸乙酯體積比為7:3~5:5洗脫液洗脫。5.權利要求1所述茯苓皮提取物的提取方法,其特征在于包括以下步驟:(1)茯苓皮經干燥、粉碎后,乙醇浸泡、滲漉,回收乙醇,濃縮得棕色膏狀物;(2)棕色膏狀物用水溶解,乙酸乙酯萃取,回收乙酸乙酯,濃縮得膏狀物;(3)膏狀物溶于乙醇,用硅膠拌樣,上100-200目的硅膠柱,石油醚-乙酸乙酯洗脫液洗脫,收集洗脫液,合并,濃縮,最后得茯苓皮提取物。6.根據權利要求5所述的茯苓皮提取物的提取方法,其特征在于:步驟(1)中,用3-7倍體積的95%乙醇浸泡12-36小時后開始滲漉。7.根據權利要求5所述的茯苓皮提取物的提取方法,其特征在于:步驟(2)中,用乙酸乙酯萃取3-5次。8.根據權利要求5所述的茯苓皮提取物的提取方法,其特征在于:步驟(3)中,使用石油醚-乙酸乙酯體積比為7:3~5:5洗脫液洗脫。9.權利要求1所述茯苓皮提取物在制備利尿作用藥物中的應用。

說明書

技術領域

本發明涉及茯苓皮提取物及其在制備利尿作用藥物中的應用,屬于醫藥技術領域。

背景技術

茯苓皮為多孔菌科真菌茯苓[Poria?cocos?(Schw.)?Wolf.]的菌核的外皮,主要分布在亞洲(中國、日本、韓國等)、北美洲等地。始載于《神農草本經》,在以后的《中華本草》、《中國醫學大辭典》、《醫學啟源》都有記載,為歷屆《中國藥典》所收載?!侗靜莞倌俊芳竊剴蜍咂ぁ爸魎追粽?,開水道,開腠理”?!端拇ㄖ幸┲盡芳竊剴蜍咂ぁ靶云?,味甘淡,無毒”,入腎,膀胱二經。主要用于水腫,小便不利等。茯苓菌核內部(茯苓)在中國主要用于治療水腫尿少,痰飲眩悸,脾虛食少,便溏泄瀉,心神不安,驚悸失眠等,茯苓的表皮(茯苓皮)主要用于治療水腫,小便不利等;在日本,僅僅茯苓應用于臨床,茯苓皮作為廢料處理。茯苓皮含有化學成分包括四環三萜酸(茯苓酸、去氫土莫酸、去氫齒孔酮酸等)、多糖(β-茯苓聚糖)、戊聚糖等。茯苓酸A具有抗腫瘤作用和一定的細胞毒作用,3-表去氫土莫酸能夠被人體小腸的上皮細胞吸收且具有清除自由基的活性,兩者均為茯苓皮藥材所含的活性成分。

長期以來,國內外的研究者對茯苓皮研究主要集中在多糖類成分及其抗腫瘤活性研究,這與傳統醫學認為茯苓皮的利水滲濕功效偏離較大。國內外部分學者在茯苓皮(或復方制劑)等利水滲濕作用的基礎研究和臨床應用方面有不少報道,但主要集中于水煎煮提取物為主,少有新的發現和突破。到目前為止,茯苓皮具有利尿的活性部位一直不明確。為了明確茯苓皮的活性部位,充分的利用茯苓皮,發明人對茯苓皮的非極性和極性部位進行了利尿研究,發現茯苓皮的非極性部位具有明顯的利尿作用,這與中醫茯苓皮利水滲濕作用相一致。另外,目前的利尿藥吲達帕胺、速尿藥物的缺點是大量應用容易引起低血鉀、心律不齊;噻嗪類利尿劑(如氯噻嗪、氯噻酮和雙氫克尿塞)一個很大的缺點是常?;嶠檔吞迥詰募睪?,另外,噻嗪類利尿劑可增加患者膽汁中膽固醇的飽和度,可能增加膽囊炎的發病風險。因此,有待于進一步從天然資源中尋找新的利尿藥。

發明內容

本發明的目的是提供一種茯苓皮提取物,特別是一種乙酸乙酯提取物;

本發明的另一目的是提供上述茯苓皮提取物的提取方法;

本發明還有一個目的是克服現有利尿藥物的缺點,提供茯苓皮提取物在制備利尿作用藥物中的應用。

本發明實現過程如下:

一種茯苓皮提取物,其通過以下步驟得到:

(1)茯苓皮經干燥、粉碎后,乙醇浸泡、滲漉,回收乙醇,濃縮得棕色膏狀物;

(2)棕色膏狀物用水溶解,乙酸乙酯萃取,回收乙酸乙酯,濃縮得膏狀物;

(3)步驟(2)所得膏狀物溶于乙醇,用硅膠拌樣,上100-200目的硅膠柱,石油醚-乙酸乙酯洗脫液洗脫,收集洗脫液,合并,濃縮,最后得茯苓皮提取物。

上述步驟(1)中,用3-7倍體積的95%乙醇浸泡12-36小時后開始滲漉。

上述步驟(2)中,用乙酸乙酯萃取3-5次。

上述步驟(3)中,使用石油醚-乙酸乙酯體積比為7:3~5:5洗脫液洗脫。

2010版《中國藥典》收載茯苓皮的功能主治利水消腫,用于水腫,小便不利等。發明人以生理鹽水負荷的水潴溜大鼠模型,尿量、尿液中pH值、鈉、鉀、氯,鈉鉀比值為指標,以活性追蹤的方式,茯苓皮乙酸乙酯和水提取物進行利尿實驗,發現乙酸乙酯提取物有利尿作用,增加尿量的同時亦能增加大鼠體內鈉、鉀、氯排出。

用茯苓皮提取物制備利尿藥物以常規藥用制劑的形式來使用;所述的常規藥物用制劑含作為活性組分在制劑中與藥學上可接受的載體,如適宜于腸胃內和腸胃外給藥的有機或無機的固體或液體賦形劑混合,該藥用制劑可以是固體形式如片劑、膠囊劑、散劑、丸劑、顆粒劑等。

上述制劑中可含有輔助物質、穩定劑、潤濕劑和其它常用的添加劑,如乳糖、檸檬酸、酒石酸、硬脂酸、硬脂酸鎂、石膏粉、蔗糖、玉米淀粉、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、花生油、橄欖油、可可脂、乙二醇、抗壞血酸、甘露醇等。

上述的制劑可按照各種制劑常規的制備工藝制成。

附圖說明

圖1為不同時間段茯苓皮乙酸乙酯提取物P.?O.給藥大鼠尿量的影響。

具體實施方式

實施例1?茯苓皮提取物的制備

茯苓皮經干燥、粉碎后,用3-7倍體積的95%乙醇浸泡12-36小時后開始滲漉6天,回收乙醇,濃縮得棕色膏狀物;棕色膏狀物用水溶解,乙酸乙酯萃取4次,回收乙酸乙酯,濃縮得膏狀物;將膏狀物溶于乙醇,用硅膠拌樣,上100-200目的硅膠柱,使用石油醚-乙酸乙酯體積比為7:3~5:5洗脫液洗脫,收集洗脫液,合并,濃縮,最后得茯苓皮提取物。

滲漉時間的確定:茯苓皮經干燥、粉碎后,乙醇浸泡、滲漉,用95%乙醇滲漉,考察1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天滲漉提取時間對提取效率的影響。結果顯示1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天的提取率(浸膏/生藥量)分別為1.2%、2.2%、3.5%、4.7%、5.5%、6.1%、6.2%,最終確定滲漉時間為6天。

乙酸乙酯萃取次數的考察:當用乙酸乙酯萃取提取物時,萃取1次、2次、3次、4次、5次的結果分別為71%、89%、95%、98%、99%(萃取量/總乙酸乙酯萃取物),所以最總確定乙酸乙酯的萃取次數為4次。

實施例2

為了驗證茯苓皮提取物利尿的效果,發明人采用生理鹽水負荷的水潴溜大鼠模型進行了藥效學試驗,各種試驗情況如下:

1.?實驗藥物

茯苓皮提取物(實施例1制備)懸濁液,含2%的阿拉伯樹膠粉的自來水配制。

實驗動物??

雄性SD大鼠,體重200-220g,由第四軍醫大學動物中心提供。

實驗儀器??

ZH-B6型大鼠代謝籠(安徽淮北正華生物儀器有限公司);TD型電子天平(余姚市金諾天平儀器有限公司);美特列-托利多十萬分子一分析天平。

實驗方法

(1)藥物利尿實驗

SD大鼠隨機分為生理鹽水組、茯苓皮乙酸乙酯提取物小劑量組(2.5g生藥/kg)、中劑量組(5g生藥/kg)、大劑量組劑量組(10g生藥/kg)、速尿組(20mg/kg),每組8只大鼠,與禁食(不禁水)24h后各組均按5ml/100g體重灌胃給予生理鹽水負荷,并用手輕壓腹部使其排盡余尿,給藥各組均按1ml/100g體重灌胃,生理鹽水對照組給自來水1ml/100g。給藥后立即將大鼠分別放入方形不銹鋼的代謝籠中,每籠1只。給藥后在代謝籠下面放置帶刻度的試管,每小時記錄尿液1次,連續收集6小時尿量(ml),記錄每小時每只動物的尿量,計算每組動物每小時的尿量的平均值和標準差,計算6h每組動物總尿量的平均值和標準差,測定尿液的pH值,并測定尿樣中Na+、K+及Cl-的量(mmol/L),并作統計學分析。結果見圖?1和表1,2。

(2)藥效計算

結果均以平均值±SD表示,采用t檢驗,計算t,P值,將治療組與空白組進行組間差異性比較,t檢驗,P?<?0.05為有顯著性差異;P?<0.01為有非常顯著性差異,判斷茯苓皮提取物的利尿效果。

(3)實驗結果

A.?茯苓皮乙酸乙酯提取物對大鼠尿量的影響。

圖1和表1顯示,小、中、大3個劑量的乙酸乙酯提取物組尿量有增加的趨勢,與生理鹽水組比較,小劑量和大劑量組存在顯著性差異。若以對照組尿量為100%,則3組尿量增加百分率分別為16.1%、10.7%、27.7%。增加率均超過10%,特別是大劑量效果非常明顯,與陽性藥速尿的尿量接近,提示茯苓皮乙酸乙酯提取物有較好的利尿效果。但茯苓皮乙酸乙酯提取物?3個不同的劑量組大鼠6h尿量低于速尿組,說明利尿程度弱于速尿,與速尿組比較,茯苓皮乙酸乙酯提取物的利尿作用呈現溫和、持久的特點。

B.?茯苓皮乙酸乙酯提取物對大鼠尿液中Na+、K+及Cl-排出量的影響。

表2顯示,從Na+、K+及Cl-排出量結果可知,茯苓皮乙酸乙酯提取物在增加尿量的同時,也可明顯增加電解質Na+及Cl-的排出特別是Na+排出而減少K+排出。

與生理鹽水對照組比較,小、中、大3個劑量茯苓皮乙酸乙酯提取物對Na+的排出量分別增加了12.3%、16.1%、27.0%,均存在著統計學的顯著性差異;小、中、大3個劑量茯苓皮乙酸乙酯提取物對Cl-的排出量均有增加的趨勢,Cl-的排出量分別增加了5.0%、6.3%、13.9%,但僅大劑量茯苓皮乙酸乙酯提取物對Cl-的排出量存在著統計學的顯著性差異。與生理鹽水對照組比較,小、中、大3個劑量茯苓皮乙酸乙酯提取物對K+的排出量分別減少了7.5%、11.0%、17.0%,小、中、大3個劑量茯苓皮乙酸乙酯提取物對K+的排出量均有降低的趨勢,但僅大劑量茯苓皮乙酸乙酯提取物對K+的排出量存在著統計學的顯著性差異。與生理鹽水對照組比較,小、中、大3個劑量茯苓皮乙酸乙酯提取物Na+/K+比值均有增加的趨勢,且均存在著統計學的顯著性差異,大劑量組Na+/K+比值接近于呋塞米組。小和大劑量茯苓皮乙酸乙酯提取物對尿液pH有顯著的影響。

上述結果證明茯苓皮乙酸乙酯提取物在促進鈉排泄的同時具有保鉀的作用。茯苓皮乙酸乙酯提取物的利尿作用可能主要是由于抑制了腎小管對電解質和水的重吸收而產生的,茯苓皮主要含有三萜類化學成分,三萜成分與醛固酮及醛固酮的拮抗劑(如螺內酯等)結構相似,所以茯苓皮乙酸乙酯提取物的利尿作用也可能是拮抗醛固酮使Na+/?K+平衡發生改變。

結論

茯苓皮乙酸乙酯提取物對正常的大鼠有較好的利尿作用,且利尿作用維持時間可高達?6h以上,隨藥量的增加利尿作用增強,同時促進鈉的排出,但對鉀幾乎沒有影響,說明該提取物有保鉀排鈉的作用。其利尿作用雖然不及速尿快,但是卻比速尿作用時間長,具有長效、毒副作用低等特點,可為臨床提供一種新的利尿藥物候選藥物。

關 鍵 詞:
茯苓皮 提取物 及其 制備 利尿 作用 藥物 中的 應用
  專利查詢網所有資源均是用戶自行上傳分享,僅供網友學習交流,未經上傳用戶書面授權,請勿作他用。
關于本文
本文標題:茯苓皮提取物及其在制備利尿作用藥物中的應用.pdf
鏈接地址://www.vmyqew.com.cn/p-6882262.html
關于我們 - 網站聲明 - 網站地圖 - 資源地圖 - 友情鏈接 - 網站客服客服 - 聯系我們

[email protected] 2017-2018 www.vmyqew.com.cn網站版權所有
經營許可證編號:粵ICP備17046363號-1 
 


收起
展開