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皇家马德里vs维戈塞尔塔直播: 一種銀杏酚酸鼠李糖脂復合殺菌劑及其制備方法和應用.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201811316473.7

申請日:

20181107

公開號:

CN109258703A

公開日:

20190125

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A01N65/08,A01N61/00,A01N37/40,A01N25/30,A01P1/00,A01P3/00 主分類號: A01N65/08,A01N61/00,A01N37/40,A01N25/30,A01P1/00,A01P3/00
申請人: 臨沂大學
發明人: 張素軍,冷鵬,張祥勝,王軍,楊加鑫
地址: 276000 山東省臨沂市蘭山區工業大道北段西側
優先權: CN201811316473A
專利代理機構: 濟南泉城專利商標事務所 代理人: 石運芹
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201811316473.7

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開一種銀杏酚酸?鼠李糖脂復合殺菌劑及其制備方法和應用,屬于農藥技術領域。本發明是由以下重量份的原料制備而成:銀杏酚酸提取物15?25份、鼠李糖脂10?15份、增效劑3?5份、潤濕劑1?3份、分散劑1?3份、防腐劑0.5?1份、抗凍劑0.5?0.8份和填料10?15份。本發明采用膜技術和大孔吸附樹脂相結合的方式分離純化銀杏酚酸,實現了銀杏酚酸的高效提取。本發明添加魚腥草和竹醋液作為增效劑,兩者相互配合促進本發明殺菌劑發揮殺菌功效,同時竹醋還具有促進農作物種子發芽、生根、生長的作用,提高作物產量。本發明選用廢棄的銀杏葉廢渣和外種皮作原料制備殺菌劑,減少了化學農藥的使用,減輕環境污染。

權利要求書

1.一種銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑,其特征在于,是由以下重量份的原料制備而成:銀杏酚酸提取物15-25份、鼠李糖脂10-15份、增效劑3-5份、潤濕劑1-3份、分散劑1-3份、防腐劑0.5-1份、抗凍劑0.5-0.8份和填料10-15份;所述銀杏酚酸提取物是通過以下方法提取而得:(1)將銀杏葉廢渣和銀杏外種皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃下浸提6-12h,浸提后超聲粉碎1-2h,然后用紗布粗濾,得到粗提液;(2)將步驟(1)得到的粗提取液在室溫下用超濾膜超濾,將經過超濾膜的、分子量小于30000的超濾液在室溫下用納濾膜過濾,截留分子量大于300,取分子量大于300的濃縮液備用;(3)使用大孔樹脂LSA-21裝柱層析,柱規格為φ3.0×60cm,取步驟(2)所得濃縮液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脫2次,流速2ml/min,得洗脫液,將其真空濃縮除去乙醇后得到銀杏酚酸粗提物;(4)將步驟(3)所得銀杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱規格為φ3.0×60cm的硅膠柱純化,使用體積比為80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸為洗脫劑以流速2ml/min洗脫1-3次得到洗脫液,然后將洗脫液真空濃縮去除有機溶劑后冷凍干燥得到白色粉末,即為銀杏酚酸提取物。2.根據權利要求1所述銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑,其特征在于,所述增效劑為魚腥草提取液和竹醋液按照重量比1:2-5混合而成,所述魚腥草提取液是通過以下方法制備得到:稱取魚腥草400g,加適量蒸餾水煎煮三次,每次30min,合并濾液濃縮至1L,即為魚腥草提取液;所述竹醋液PH為2-4。3.根據權利要求1所述銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑,其特征在于,所述潤濕劑為皂角粉、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基硫酸鹽、脂肪醇乙氧基化物、烷基酚乙氧基化物中的一種;所述分散劑為木質素或者聚丙烯酸鈉;所述填料為硅藻土、膨潤土、高嶺土中的一種;所述防腐劑為山梨酸鹽、對羥基苯甲酸甲酯、雙乙酸鈉和乳酸鈉中的一種;所述抗凍劑為乙二醇或者丙二醇。4.一種權利要求1-3任意一項所述銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)將銀杏葉廢渣和銀杏外種皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃下浸提6-12h,浸提后超聲粉碎1-2h,然后用紗布粗濾,得到粗提液;(2)將步驟(1)得到的粗提取液在室溫下用超濾膜超濾,將經過超濾膜的、分子量小于30000的超濾液在室溫下用納濾膜過濾,截留分子量大于300,取分子量大于300的濃縮液備用;(3)使用大孔樹脂LSA-21裝柱層析,柱規格為φ3.0×60cm,取步驟(2)所得濃縮液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脫2次,流速2ml/min,得洗脫液,將其真空濃縮除去乙醇后得到銀杏酚酸粗提物;(4)將步驟(3)所得銀杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱規格為φ3.0×60cm的硅膠柱純化,使用體積比為80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸為洗脫劑以流速2ml/min洗脫1-3次得到洗脫液,然后將洗脫液真空濃縮去除有機溶劑后冷凍干燥得到白色粉末,即為銀杏酚酸提取物;(5)稱取魚腥草400g,加適量蒸餾水煎煮三次,每次30min,合并濾液濃縮至1L,即為魚腥草提取液;所述竹醋液PH為2-4,將魚腥草提取液和竹醋液按重量比混合均勻,得增效劑;(6)按配比稱取填料和步驟(4)所得銀杏提取物置于攪拌釜中攪拌混合均勻,然后氣流粉碎,過篩,取10-20μm粉體;(7)按配比稱取鼠李糖脂溶解于20倍重量50%的乙醇溶液中,再加入配比量的潤濕劑、分散劑、防腐劑、抗凍劑、步驟(5)所得增效劑和步驟(6)所得粉體,混合均勻即得到所述銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑。

說明書

技術領域

本發明涉及農藥技術領域,具體涉及一種銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑及其制備方法和 應用。

背景技術

我國銀杏資源豐富,尤其是魯南地區的銀杏和銀杏葉,因有效成分含量高而享譽國內外。 銀杏葉中的黃酮類和銀杏內酯類物質對心、腦血管疾病具有顯著療效,銀杏葉提取物在國內 外市場上銷量較大,因此國內外研究和開發的重點是黃酮和內酯的提取及應用。銀杏酚酸也 是銀杏葉、果實和外種皮中不可忽略的重要成分,占銀杏葉(干)的1~2%,占銀杏外種皮(干) 的3~5%,提取過黃酮和內酯的銀杏葉廢渣和廢液中仍含有大量的銀杏酚酸。由于對銀杏酚酸 認識不夠,長期以來銀杏酚酸作為有毒成分被丟棄。這些廢棄的銀杏外種皮長期露天堆放、 自然腐爛降解,其中所含的酚酸等有毒成分隨雨水而排入河溝,不但影響堆放場所周邊環境, 氣味難聞,造成資源浪費,更重要的是對周圍水域造成污染,毒死魚蝦,威脅到人畜飲用水 的安全,破壞生態平衡。

隨著國內外科學家對銀杏葉提取物及其制劑的深入研究和國際上對銀杏葉提取物中銀杏 酚酸含量的嚴格控制,促進了對銀杏酚酸類物質的研究興趣。研究表明:銀杏酚酸具有抗氧 化、抗炎、抗腫瘤、抗過敏、抑菌、防治病蟲害等作用,在化妝品、生物農藥和醫藥方面潛 在的應用價值。植物源農藥作為生物合理性農藥的一部分,其開發研究一直是新農藥研究的 熱點課題之一。植物源農藥來源于自然,能在自然界降解,一般不會污染環境及農產品。在 環境和人體中積累毒性的可能性不大,對人和牲畜相對安全,對害蟲天敵傷害小,具有低毒、 低殘留的特點,能夠保持農產品的高品質。因此植物源農藥具有廣闊的市場。

目前有利用銀杏酚酸制備殺蟲殺菌劑的發明,例如CN201711376980.5、專利 CN105145666A、專利CN105284955A等,但均存在著活性成分提取率不高、制備工藝復雜、 成本高以及滅殺效果不理想等諸多不足之處。

因此,開發利用銀杏酚酸來開發一種高效環保低成本的植物源殺菌劑很有必要。

發明內容

本發明目的在于克服現有技術中銀杏活性成分提取率不高、殺菌效果不理想等缺陷,提 供一種從銀杏葉廢渣、廢液和外種皮中提取銀杏酚酸,制備植物源殺菌劑。既省去化學合成 過程,避免由此帶來的污染,也可以充分利用丟棄的銀杏葉廢渣和外種皮,變廢為寶,提高 原料附加值。為實現所述目的,本發明所采用的技術方案是:

一種銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑,是由以下重量份的原料制備而成:銀杏酚酸提取物15-25份、鼠李糖脂10-15份、增效劑3-5份、潤濕劑1-3份、分散劑1-3份、防腐劑0.5-1份、 抗凍劑0.5-0.8份和填料10-15份;所述銀杏酚酸提取物是通過以下方法提取而得:

(1)將銀杏葉廢渣和銀杏外種皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃ 下浸提6-12h,浸提后超聲粉碎1-2h,然后用紗布粗濾,得到粗提液;

(2)將步驟(1)得到的粗提取液在室溫下用超濾膜超濾,將經過超濾膜的、分子量 小于30000的超濾液在室溫下用納濾膜過濾,截留分子量大于300,取分子量大于300的濃 縮液備用;

(3)使用大孔樹脂LSA-21裝柱層析,柱規格為φ3.0×60cm,取步驟(2)所得濃縮 液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脫2次,流速2ml/min,得洗脫液,將其真 空濃縮除去乙醇后得到銀杏酚酸粗提物;

(4)將步驟(3)所得銀杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱規格為φ3.0×60cm 的硅膠柱純化,使用體積比為80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸為洗脫劑以流速2ml/min 洗脫1-3次得到洗脫液,然后將洗脫液真空濃縮去除有機溶劑后冷凍干燥得到白色粉末,即 為銀杏酚酸提取物。

所述增效劑為魚腥草提取液和竹醋液按照重量比1:2-5混合而成,所述魚腥草提取液是通 過以下方法制備得到:取魚腥草400g,加適量蒸餾水煎煮三次,每次30min,合并濾液濃 縮至1L,即為魚腥草提取液;所述竹醋液ph為2-4;購自浙江麗水中林高科有限公司。

所述潤濕劑為皂角粉、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基硫酸鹽、脂肪醇乙氧基化物、烷基酚乙 氧基化物中的一種;所述分散劑為木質素或者聚丙烯酸鈉;所述填料為硅藻土、膨潤土、高 嶺土中的一種;所述防腐劑為山梨酸鹽、對羥基苯甲酸甲酯、雙乙酸鈉和乳酸鈉中的一種; 所述抗凍劑為乙二醇或者丙二醇。

本發明所述銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑的制備方法,包括以下步驟:

(1)將銀杏葉廢渣和銀杏外種皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃ 下浸提6-12h,浸提后超聲粉碎1-2h,然后用紗布粗濾,得到粗提液;

(2)將步驟(1)得到的粗提取液在室溫下用超濾膜超濾,將經過超濾膜的、分子量 小于30000的超濾液在室溫下用納濾膜過濾,截留分子量大于300,取分子量大于300的濃 縮液備用;

(3)使用大孔樹脂LSA-21裝柱層析,柱規格為φ3.0×60cm,取步驟(2)所得濃縮 液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脫2次,流速2ml/min,得洗脫液,將其真 空濃縮除去乙醇后得到銀杏酚酸粗提物;

(4)將步驟(3)所得銀杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱規格為φ3.0×60cm 的硅膠柱純化,使用體積比為80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸為洗脫劑以流速2ml/min 洗脫1-3次得到洗脫液,然后將洗脫液真空濃縮去除有機溶劑后冷凍干燥得到白色粉末,即 為銀杏酚酸提取物;

(5)稱取魚腥草400g,加適量蒸餾水煎煮三次,每次30min,合并濾液濃縮至1L, 即為魚腥草提取液;所述竹醋液PH為2-4,將魚腥草提取液和竹醋液按重量比混合均勻,得 增效劑;

(6)按配比稱取填料和步驟(4)所得銀杏提取物置于攪拌釜中攪拌混合均勻,然后 氣流粉碎,過篩,取10-20μm粉體;

(7)按配比稱取鼠李糖脂溶解于20倍重量50%的乙醇溶液中,再加入配比量的潤濕劑、 分散劑、防腐劑、抗凍劑、步驟(5)所得增效劑和步驟(6)所得粉體,混合均勻即得到所 述銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑。

本發明所述的殺菌劑可用于防治各類作物的病害。

本發明所用的鼠李糖脂為市購成品,購自陜西億康龍生物技術有限公司。

鼠李糖脂是由假單胞菌或伯克氏菌類產生的一種生物代謝性質的生物表面活性劑。同時 也是一種研究時間最長、應用技術最為成熟的一種生物表面活性劑。它在土壤、水體和植物 中都自然存在。它屬于一種糖脂類的陰離子表面活性劑。鼠李糖脂作為生物型表面活性劑應 用于農業生產,可刺激作物生長,輔助吸收營養、增加農藥藥效,且對人和動物無毒副作用。

有益效果:本發明從銀杏廢渣廢液中提取銀杏酚酸,與鼠李糖脂共同作為活性成分制備 殺菌劑,實現其殺菌抑菌功效。

1、銀杏酚酸屬于植物源農藥,植物源農藥開發中的一個突出問題是,從植物中提取的有效 成分的量有限,生產成本高。本發明采用膜技術和大孔吸附樹脂相結合的方式分離純化 銀杏酚酸,采用超濾進行純化,去除色素、顆粒物、多糖和蛋白質等雜質,可以解決分 離柱堵塞問題;用大孔吸附樹脂分離,可以提高銀杏酚酸的收率和純度,實現了銀杏酚 酸的高效提取。鼠李糖脂作為環保綠色的生物表面活性劑,添加于殺菌劑中,在噴灑過 程中,以疏水基通過色散力吸附在葉面蠟質層的表面,親水基則伸入藥劑中形成定向吸 附膜取代了疏水的蠟質層,改善藥劑在蠟質層的潤濕狀況,使殺菌劑充分鋪展,促進銀 杏酚酸最大限度的被利用。同時對其它的農藥殘留物具備降解能力。

2、魚腥草為一種具有殺菌抑菌效果的中草藥,其活性成分,對各種微生物均有抑制作用。 而竹醋液是竹材炭化、熱解過程中產生的一種淡黃色液體,具有獨特的煙熏香氣。竹醋 的組成成分復雜,主要成分是水(約占80%),其次是有機酸、酚類、醇類等。竹醋中的 有機成分能夠幫助本發明銀杏酚酸抑菌物質在植物體表及內部深入滲透,從而增強防治 效果。兩者相互配合共促進本發明殺菌劑發揮殺菌功效,同時竹醋還具有促進農作物種 子發芽、生根、生長的作用,提高作物產量。

我國銀杏資源豐富,本發明選用廢棄的銀杏葉廢渣和外種皮作原料,充分利用其中的活 性物質,減少了化學農藥的使用,減輕環境污染,實現對銀杏資源利用的最大化。本發明所 得殺菌劑高效環保,且制備工藝簡單易行,易于操作。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明的技術方案做進一步說明,但不限于此。

實施例1

一種銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑,是由以下重量份的原料制備而成:銀杏酚酸提取物 15份、鼠李糖脂10份、增效劑3份、潤濕劑1份、分散劑1份、防腐劑0.5份、抗凍劑0.5 份和填料10份。

所述增效劑為魚腥草提取液和竹醋液按照重量比1:2混合而成,所述魚腥草提取液是通 過以下方法制備得到:取魚腥草400g,加適量蒸餾水煎煮三次,每次30min,合并濾液濃 縮至1L,即為魚腥草提取液;所述竹醋液ph為2-4;購自浙江麗水中林高科有限公司。

所述潤濕劑為皂角粉;所述分散劑為木質素;所述填料為硅藻土;所述防腐劑為山梨酸 鹽,本實施例采用山梨酸鉀,所述抗凍劑為乙二醇。

本發明所述銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑的制備方法,包括以下步驟:

(1)將銀杏葉廢渣和銀杏外種皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃ 下浸提6h,浸提后超聲粉碎1h,然后用紗布粗濾,得到粗提液;

(2)將步驟(1)得到的粗提取液在室溫下用超濾膜超濾,將經過超濾膜的、分子量 小于30000的超濾液在室溫下用納濾膜過濾,截留分子量大于300,取分子量大于300的濃 縮液備用;

(3)使用大孔樹脂LSA-21裝柱層析,柱規格為φ3.0×60cm,取步驟(2)所得濃縮 液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脫2次,流速2ml/min,得洗脫液,將其真 空濃縮除去乙醇后得到銀杏酚酸粗提物;

(4)將步驟(3)所得銀杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱規格為φ3.0×60cm 的硅膠柱純化,使用體積比為80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸為洗脫劑以流速2ml/min 洗脫1-3次得到洗脫液,然后將洗脫液真空濃縮去除有機溶劑后冷凍干燥得到白色粉末,即 為銀杏酚酸提取物;

(5)稱取魚腥草400g,加適量蒸餾水煎煮三次,每次30min,合并濾液濃縮至1L, 即為魚腥草提取液;所述竹醋液PH為2-4,將魚腥草提取液和竹醋液按重量比混合均勻,得 增效劑;

(6)按配比稱取填料和步驟(4)所得銀杏提取物置于攪拌釜中攪拌混合均勻,然后 氣流粉碎,過篩,取10-20μm粉體;

(7)按配比稱取鼠李糖脂溶解于20倍重量50%的乙醇溶液中,再加入配比量的潤濕 劑、分散劑、防腐劑、抗凍劑、步驟(5)所得增效劑和步驟(6)所得粉體,混合均勻即得 到所述銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑。

本實施例所用的鼠李糖脂為市購成品,購自陜西億康龍生物技術有限公司。

實施例2

一種銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑,是由以下重量份的原料制備而成:銀杏酚酸提取物 20份、鼠李糖脂12份、增效劑4份、潤濕劑2份、分散劑2份、防腐劑0.8份、抗凍劑0.6 份和填料12份。

所述增效劑為魚腥草提取液和竹醋液按照重量比1:3混合而成,所述魚腥草提取液是通 過以下方法制備得到:取魚腥草400g,加適量蒸餾水煎煮三次,每次30min,合并濾液濃 縮至1L,即為魚腥草提取液;所述竹醋液ph為2-4;購自浙江麗水中林高科有限公司。

所述潤濕劑為脂肪醇聚氧乙烯醚;所述分散劑為聚丙烯酸鈉;所述填料為膨潤土;所述 防腐劑為對羥基苯甲酸甲酯,所述抗凍劑為丙二醇。

本發明所述銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑的制備方法,包括以下步驟:

(1)將銀杏葉廢渣和銀杏外種皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃ 下浸提10h,浸提后超聲粉碎1.5h,然后用紗布粗濾,得到粗提液;

(2)將步驟(1)得到的粗提取液在室溫下用超濾膜超濾,將經過超濾膜的、分子量 小于30000的超濾液在室溫下用納濾膜過濾,截留分子量大于300,取分子量大于300的濃 縮液備用;

(3)使用大孔樹脂LSA-21裝柱層析,柱規格為φ3.0×60cm,取步驟(2)所得濃縮 液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脫2次,流速2ml/min,得洗脫液,將其真 空濃縮除去乙醇后得到銀杏酚酸粗提物;

(4)將步驟(3)所得銀杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱規格為φ3.0×60cm 的硅膠柱純化,使用體積比為80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸為洗脫劑以流速2ml/min 洗脫1-3次得到洗脫液,然后將洗脫液真空濃縮去除有機溶劑后冷凍干燥得到白色粉末,即 為銀杏酚酸提取物;

(5)稱取魚腥草400g,加適量蒸餾水煎煮三次,每次30min,合并濾液濃縮至1L, 即為魚腥草提取液;所述竹醋液PH為2-4,將魚腥草提取液和竹醋液按重量比混合均勻,得 增效劑;

(6)按配比稱取填料和步驟(4)所得銀杏提取物置于攪拌釜中攪拌混合均勻,然后 氣流粉碎,過篩,取10-20μm粉體;

(7)按配比稱取鼠李糖脂溶解于20倍重量50%的乙醇溶液中,再加入配比量的潤濕 劑、分散劑、防腐劑、抗凍劑、步驟(5)所得增效劑和步驟(6)所得粉體,混合均勻即得 到所述銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑。

本實施例所用的鼠李糖脂為市購成品,購自陜西億康龍生物技術有限公司。

實施例3

一種銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑,是由以下重量份的原料制備而成:銀杏酚酸提取物 25份、鼠李糖脂15份、增效劑5份、潤濕劑3份、分散劑3份、防腐劑1份、抗凍劑0.8份 和填料15份。

所述增效劑為魚腥草提取液和竹醋液按照重量比1:5混合而成,所述魚腥草提取液是通 過以下方法制備得到:取魚腥草400g,加適量蒸餾水煎煮三次,每次30min,合并濾液濃 縮至1L,即為魚腥草提取液;所述竹醋液ph為2-4;購自浙江麗水中林高科有限公司。

所述潤濕劑為烷基硫酸鹽;所述分散劑為木質素;所述填料為高嶺土;所述防腐劑為雙 乙酸鈉,所述抗凍劑為丙二醇。

本發明所述銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑的制備方法,包括以下步驟:

(1)將銀杏葉廢渣和銀杏外種皮干燥粉碎后,置于5倍重量95%的乙醇溶液中,于60℃ 下浸提6-12h,浸提后超聲粉碎1-2h,然后用紗布粗濾,得到粗提液;

(2)將步驟(1)得到的粗提取液在室溫下用超濾膜超濾,將經過超濾膜的、分子量 小于30000的超濾液在室溫下用納濾膜過濾,截留分子量大于300,取分子量大于300的濃 縮液備用;

(3)使用大孔樹脂LSA-21裝柱層析,柱規格為φ3.0×60cm,取步驟(2)所得濃縮 液5ml上柱,使用20%和80%的乙醇溶液交替洗脫2次,流速2ml/min,得洗脫液,將其真 空濃縮除去乙醇后得到銀杏酚酸粗提物;

(4)將步驟(3)所得銀杏酚酸粗提物溶解于50ml石油醚中,使用柱規格為φ3.0×60cm 的硅膠柱純化,使用體積比為80:20:3的石油醚、乙酸乙酯和冰醋酸為洗脫劑以流速2ml/min 洗脫1-3次得到洗脫液,然后將洗脫液真空濃縮去除有機溶劑后冷凍干燥得到白色粉末,即 為銀杏酚酸提取物;

(5)稱取魚腥草400g,加適量蒸餾水煎煮三次,每次30min,合并濾液濃縮至1L, 即為魚腥草提取液;所述竹醋液PH為2-4,將魚腥草提取液和竹醋液按重量比混合均勻,得 增效劑;

(6)按配比稱取填料和步驟(4)所得銀杏提取物置于攪拌釜中攪拌混合均勻,然后 氣流粉碎,過篩,取10-20μm粉體;

(7)按配比稱取鼠李糖脂溶解于20倍重量50%的乙醇溶液中,再加入配比量的潤濕 劑、分散劑、防腐劑、抗凍劑、步驟(5)所得增效劑和步驟(6)所得粉體,混合均勻即得 到所述銀杏酚酸-鼠李糖脂復合殺菌劑。

本發明所用的鼠李糖脂為市購成品,購自陜西億康龍生物技術有限公司。

對比例1

本對比例原料配方及制備方法基本同實施例3,與之不同的是不包含銀杏酚酸提取物的 添加及其制備的部分。

對比例2

本對比例原料配方及制備方法基本同實施例3,與之不同的是不包含鼠李糖脂的添加。

對比例3

本對比例原料配方及制備方法基本同實施例3,與之不同的是不包含增效劑的添加及其 制備的部分。

殺菌效果實驗:

選取黑曲霉菌、金黃色葡萄球菌以及白色念珠菌作為驗證菌劑,制備菌懸液進行驗證試 驗。取各試驗指標菌的純培養分離的典型菌落接種營養肉湯經增菌培養,參照麥氏比濁法, 配制含菌量在1×108cfu/L~5×108cfu/L的菌懸液,備用。

在無菌試管內加入菌懸液0.1ml與實施例1-3以及對比例1-3所得殺菌劑5ml,作用至 設定時間,吸取0.1ml混合液置于營養瓊脂培養基平板上涂布均勻。置于37℃培養后計數 菌落數,計算平均殺滅率。試驗重復3次。

評價指標:

存活率(%)=1一殺菌率(%)。

協同系數(T/E)值=各因子單獨作用時細菌存活百分率之乘積/多因子共同作用實測細 菌存活百分率(存活率為0時,按0.0001%計算)。T/E值為判斷復合增效作用強弱的標準, T/E值小于1為拮抗作用,等于1為相加作用,大于1為協同作用,其值愈大,協同作用愈 強。實驗結果如下表所示:

表1 殺菌效果實驗數據

通過對比例1、2和實施例3,計算銀杏酚酸和鼠李糖脂的T/E值,我們可以看出,其值 均大于1,且時間越長,協同作用越明顯。這是因為,鼠李糖脂作為生物型表面活性劑,其 可促進植物源活性成分銀杏酚酸更好的鋪展與作用在菌體,促進其高效的發揮其殺菌功能。 應用試驗

試驗地:山東省臨沂市的某蔬菜種植基地作為試驗田,采用隨機區組設計,共設7個處 理,分別為S1-S7,實驗其對番茄、白菜病害的防治效果。

S1:實施例1所得殺菌劑,稀釋倍數500后使用;

S2:實施例2所得殺菌劑,稀釋倍數500倍使用;

S3:實施例3所得殺菌劑,稀釋倍數500倍使用;

S4:對比例1所得殺菌劑,稀釋倍數500倍使用;

S5:對比例2所得殺菌劑,稀釋倍數500倍使用;

S6:對比例3所得殺菌劑,稀釋倍數500倍使用;

S7為空白對照,施加同等重量的清水。

2015年至2017年連續3年在該試驗田以露天種植方式進行白菜、番茄種植試驗,7處理 組,每處理組種植方法及種植密度均相同,其他田間管理各個處理組均相同,收獲期統計產 量和病株率,并統計整個生長周期病害發生情況。實驗結果見表2:

表2 白菜、番茄種植實驗結果

從實驗數據可以看出使用本發明實施例的試驗組,其產量明顯高于對比例和空白對照組, 病株率控制于2%左右,大大減少番茄和白菜的病害率。究其原因,是由于本發明使用膜分離、 樹脂分離相結合的方式實現了銀杏酚酸的高效提取,同時添加鼠李糖脂、魚腥草和竹醋液等 成分,促進銀杏酚酸活性成分高效發揮抑菌殺菌作用。

需要說明的是,上述實施例僅僅是實現本發明的優選方式的部分實施例,而非全部實施 例。顯然,基于本發明的上述實施例,本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動的前提下 所獲得的其他所有實施例,都應當屬于本發明?;さ姆段?。

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一種 銀杏 酚酸鼠李 糖脂 復合 殺菌劑 及其 制備 方法 應用
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