• / 16
  • 下載費用:30 金幣  

皇家马德里对维戈塞尔塔直播: 用于治療神經退化疾病和其它疾病的組合治療劑和方法.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201380070968.5

申請日:

20131126

公開號:

CN105228614A

公開日:

20160106

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A61K31/357 主分類號: A61K31/357
申請人: 阿菲歐斯公司
發明人: T.P.卡斯托爾
地址: 美國馬薩諸塞州
優先權: 61/730761
專利代理機構: 中國專利代理(香港)有限公司 代理人: 劉辛;李炳愛
PDF完整版下載: PDF下載
法律狀態
申請(專利)號:

CN201380070968.5

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明的實施方案是針對施用苔蘚抑素以及苔蘚抑素和視黃素用于治療響應α分泌酶活性增加的疾病。本申請的發明是針對治療神經退化疾病,諸如哈欽森病、帕金森氏病、唐氏綜合癥以及阿爾茨海默氏??;以及病毒潛伏疾病,諸如HIV和皰疹;癌癥,諸如前列腺癌、黑素瘤、淋巴瘤以及腎癌;食管和眼部疾病,諸如青光眼。

權利要求書

1.一種包含有效量的類苔蘚抑素和有效量的視黃素的劑型,其用于治療增強的α分泌酶加工有益的一種或多種疾病。2.如權利要求1所述的制品,其中所述類苔蘚抑素選自由苔蘚抑素1-20組成的群組并且包括第一類苔蘚抑素、第二類苔蘚抑素以及第三類苔蘚抑素。3.如權利要求3所述的制品,其中所述視黃素是視黃酸。4.如權利要求4所述的制品,其中所述視黃素以增加α分泌酶表達的量存在。5.如權利要求1所述的制品,其中所述類苔蘚抑素以刺激α分泌酶產生的量存在。6.如權利要求1所述的制品,其中所述類苔蘚抑素以每周每平方米表面積0.1至50微克的劑量存在以供施用。7.如權利要求7所述的制品,其中所述類苔蘚抑素以每周每平方米表面積5至10微克的劑量存在以供施用。8.如權利要求3所述的制品,其中所述視黃素以每天1.0至240毫克的劑量存在。9.如權利要求9所述的制品,其中所述視黃素選自由視黃酸、視黃醇、視黃醇乙酸酯、視黃醇棕櫚酸酯、13-順視黃酸以及蓓薩羅丁組成的口服視黃素的群組。10.一種有效量的類苔蘚抑素和視黃素于生物聚合物中的制品,所述生物聚合物包含多個球,其中所述球具有1至1000納米的直徑,所述制品用于治療響應α分泌酶活性增加的疾病。11.如權利要求10所述的制品,其中所述生物聚合物對酸具抗性。12.如權利要求11所述的制品,其中所述生物聚合物是聚(D,L-丙交酯-共乙交酯)。13.如權利要求12所述的制品,其中所述聚(D,L-丙交酯-共-乙交酯)的丙交酯與乙交酯的比率為25-75%丙交酯。14.如權利要求10所述的制品,其中所述微球被凍干用于在水溶液中復原。15.如權利要求10所述的制品,其中所述微球保持于供口服施用的懸浮液中。16.如權利要求10所述的制品,其中所述微球保持于選自片劑、膠囊、凝膠帽以及粉末的群組的口服劑型中。17.一種治療神經退化疾病的方法,其包括施用有效量的保持于多個微球中的類苔蘚抑素和視黃素的步驟,所述微球包含生物聚合物并且具有1至1000納米的直徑。18.如權利要求17所述的方法,其中所述類苔蘚抑素選自由苔蘚抑素1-20組成的群組并且包括第一類苔蘚抑素、第二類苔蘚抑素以及第三類苔蘚抑素。19.如權利要求17所述的方法,其中所述視黃素是視黃酸。20.如權利要求19所述的方法,其中所述視黃素以增加α分泌酶表達的量存在。21.如權利要求17所述的方法,其中所述類苔蘚抑素以刺激α分泌酶產生的量存在。22.如權利要求17所述的方法,其中所述類苔蘚抑素以每周每平方米表面積0.1至50微克的劑量施用。23.如權利要求22所述的方法,其中所述類苔蘚抑素以每周每平方米表面積5至10微克的劑量施用。24.如權利要求20所述的方法,其中所述視黃素以每天1.0至240毫克的劑量施用。26.如權利要求20所述的方法,其中所述視黃素選自由視黃酸、視黃醇、視黃醇乙酸酯、視黃醇棕櫚酸酯、13-順視黃酸以及蓓薩羅丁組成的口服視黃素的群組。27.如權利要求17所述的方法,其中所述生物聚合物對酸具抗性。28.如權利要求27所述的方法,其中所述生物聚合物是聚(D,L-丙交酯-共乙交酯)。29.如權利要求28所述的方法,其中所述聚(D,L-丙交酯-共-乙交酯)的丙交酯與乙交酯的比率為25-75%丙交酯。30.如權利要求17所述的方法,其中所述微球被凍干用于在水溶液中復原。31.如權利要求17所述的方法,其中所述微球保持于供口服施用的懸浮液中。32.如權利要求17所述的方法,其中所述微球保持于選自片劑、膠囊、明膠膠囊以及粉末的群組的口服劑型中。33.一種有效量的類苔蘚抑素和視黃素溶解于口服可接受的油介質中的制品,其用于口服施用以供治療神經退化疾病、癌癥、病毒潛伏以及眼部疾病。34.如權利要求33所述的制品,其中所述神經退化疾病選自由阿爾茨海默氏病、哈欽森氏病、帕金森氏病、庫魯病、庫賈氏病、唐氏綜合癥以及海綿狀腦病組成的群組。35.如權利要求33所述的制品,其中所述癌癥是前列腺癌、黑素瘤、淋巴瘤和腎癌、食管癌以及其它癌癥。36.如權利要求33所述的制品,其中所述病毒潛伏與HIV和皰疹相關。37.如權利要求33所述的制品,其中所述有效量的類苔蘚抑素為每天每公斤體重約3至10微克。38.如權利要求33所述的制品,其中所述有效量的視黃素以每天1.0至240毫克的劑量施用。39.一種治療神經退化疾病的方法,其包括口服施用有效量的溶解于口服可接受的油介質中的類苔蘚抑素和視黃素的步驟。40.一種治療神經退化疾病的方法,其包括通過靜脈內施用來口服施用有效量的類苔蘚抑素和視黃素的步驟。41.如權利要求39所述的方法,其中所述有效量的類苔蘚抑素為每天每公斤體重約3至10微克。42.如權利要求39所述的方法,其中所述有效量的視黃素以每天1.0至240毫克的劑量施用。43.一種治療癌癥的方法,其包括口服施用有效量的溶解于口服可接受的油介質中的類苔蘚抑素和視黃素的步驟。44.一種治療癌癥的方法,其包括通過靜脈內施用來口服施用有效量的類苔蘚抑素和視黃素的步驟。45.如權利要求43所述的方法,其中所述有效量的類苔蘚抑素為每天每公斤體重約3至10微克。46.如權利要求43所述的方法,其中所述有效量的視黃素以每天1.0至240毫克的劑量施用。47.一種治療病毒潛伏的方法,其包括口服施用有效量的溶解于口服可接受的油介質中的類苔蘚抑素和視黃素的步驟。48.一種治療病毒潛伏的方法,其包括通過靜脈內施用來口服施用有效量的類苔蘚抑素和視黃素的步驟。49.如權利要求48所述的方法,其中所述有效量的類苔蘚抑素為每天每公斤體重約3至10微克。50.如權利要求48所述的方法,其中所述有效量的視黃素以每天1.0至240毫克的劑量施用。

說明書

相關申請

本申請要求2012年11月28日提交的美國臨時專利申請號61/730,761的權益,其全部內容以引用的方式并入本文中。

關于聯邦支持的聲明

本發明是在包括國家衛生研究院(NationalInstitutesofHealth)批準號1R44AG034760-01A1的聯邦支持下進行。

技術領域

本申請的發明是針對治療神經退化疾病,諸如哈欽森病(HutchinsonDisease)、帕金森氏病(Parkinson′sdisease)、唐氏綜合癥(Down′ssyndrome)以及阿爾茨海默氏病(Alzheimer′sdisease);以及病毒潛伏疾病,諸如HIV和皰疹;癌癥,諸如前列腺癌、黑素瘤、淋巴瘤以及腎癌;食管和眼部疾病,諸如青光眼。

背景技術

神經退化疾病,諸如阿爾茨海默氏病、哈欽森氏病(Hutchinson′sDisease)、帕金森氏病、庫魯病(Kuru)、庫賈氏病(Creutzfeldt-Jakobdisease)以及其它海綿狀腦病仍然是主要的健康問題。關于阿爾茨海默氏病、哈欽森氏病以及帕金森氏病,這些疾病傾向于在老年個體中并且隨著疾病發展而自己顯現出來;罹病的個體很少能夠自理。關于癌癥,諸如(但不限于)前列腺癌,苔蘚抑素1(Bryostatin1)通過差異化調節蛋白激酶C(PKC)δ易位并且防止PKCδ介導的腫瘤壞死因子-α釋放來抑制佛波酯(phorbolester)誘導的前列腺癌細胞凋亡。關于病毒潛伏疾病,諸如HIV潛伏,苔蘚抑素-1以及許多PKC激動劑活化細胞轉錄因子,諸如結合HIV-1啟動子并且調控其轉錄活性的NF-kB。在HIV-1潛伏中,病毒啟動子較難接近細胞轉錄因子,因為圍繞病毒啟動子的核組蛋白被脫乙?;?致密的染色質)。因此,HDAC抑制劑可以增加組蛋白的乙?;?松弛的染色質),并且然后轉錄因子可以容易接近HIV啟動子。關于眼部疾病,諸如(但不限于)青光眼,β淀粉樣蛋白的存在與升高的眼內壓相關。當前存在非常有限的手段來治療這些疾病。

因此,極其需要具有有效的治療劑、協同起作用的組合治療劑、有效的配制方法以及簡單的施用方法(例如,口服制劑),而無需受過專門訓練的保健提供者。

發明內容

本發明的實施方案是針對用于治療神經退化疾病、癌癥、病毒潛伏以及眼病的單一和組合療法、藥物遞送系統、劑型以及方法。作為本發明的治療對象的神經退化疾病由阿爾茨海默氏病、哈欽森氏病、帕金森氏病、庫魯病、庫賈氏病、唐氏綜合癥以及海綿狀腦病例示。其它疾病包括癌癥,諸如前列腺癌;以及病毒潛伏,諸如HIV和皰疹。針對制品的實施方案包括一種劑型,其包含有效量的苔蘚抑素或類苔蘚抑素(Bryoid)與有效量的視黃素(Retinoid)。如本文所用的術語“劑型”指的是用于施用藥物的工具,諸如(但不限于)膠囊、片劑、丸劑、薄膜、軟膏、乳膏、溶液、懸浮液、氣霧劑、糊劑、滴劑、栓劑、用于復原的粉末、可注射劑、靜脈內溶液,等等。

如本文所用的術語“苔蘚抑素”或“類苔蘚抑素”指的是任何和所有苔蘚抑素以及其衍生物。已經鑒別出二十種苔蘚抑素,并且某些實施例關于作為苔蘚抑素-1的苔蘚抑素。本發明的實施方案關于分子量為約896至898Amu(質量+鈉)并且純度為約50%至晶體成形純度的第一類苔蘚抑素組合物。第一類苔蘚抑素組合物還可以特征在于分子量為約873至875Amu(單同位素質量)并且純度為約50%和晶體成形純度的類苔蘚抑素化合物。第一類苔蘚抑素組合物的測量質量+鈉為897.2Amu并且測量單同位素質量為874.2Amu。以下詳細論述將這種類苔蘚抑素稱作B10。

本發明的實施方案關于分子量為約910至912Amu(質量+鈉)并且純度為約50%至晶體成形純度的第二類苔蘚抑素組合物。第二類苔蘚抑素組合物還可以特征在于分子量為約888至890Amu(單同位素質量)并且純度為約50%和晶體成形純度的類苔蘚抑素化合物。第二類苔蘚抑素組合物的測量質量+鈉為911.5Amu并且測量單同位素質量為888.9Amu。以下詳細論述將這種類苔蘚抑素稱作B12。

本發明的實施方案關于分子量為約868至870Amu(質量+鈉)并且純度為約50%至晶體成形純度的第三類苔蘚抑素組合物。第三類苔蘚抑素組合物還可以特征在于分子量為約846至848Amu(單同位素質量)并且純度為約50%和晶體成形純度的類苔蘚抑素化合物。第三類苔蘚抑素組合物的測量質量+鈉為869.5Amu并且測量單同位素質量為846.6Amu。以下詳細論述將這種類苔蘚抑素稱作B14B。

本發明的實施方案關于分子量為約895至897Amu(質量+鈉)并且純度為約50%至晶體成形純度的第四類苔蘚抑素組合物。第四類苔蘚抑素組合物還可以特征在于分子量為約872至874Amu(單同位素質量)并且純度為約50%和晶體成形純度的類苔蘚抑素化合物。第四類苔蘚抑素組合物的測量質量+鈉為895.5Amu并且測量單同位素質量為872.6Amu。以下詳細論述將這種類苔蘚抑素稱作B14C。

本發明的這些類苔蘚抑素化合物具有不同于苔蘚抑素1-20的分子量的分子量。

如本文所用的晶體成形純度意味著組合物具有使組合物能夠形成晶體的純度。所述純度通常高于90%,并且更常高于95%純度。本申請中所呈現的實施例關于純度高于99%的組合物。晶體純度將包含沒有雜質能被檢測到的組合物,但并不限于此。

上文所描述的第一類苔蘚抑素、第二類苔蘚抑素、第三類苔蘚抑素以及第四類苔蘚抑素是本發明者和申請者于2012年11月27日提交的共同未決專利申請序列號US61/730,227的主題。這個共同未決申請的全部內容以引用的方式并入。

本發明的實施方案關于以刺激α分泌酶產生的量存在的類苔蘚抑素。舉例來說,類苔蘚抑素以每周每平方米表面積0.1至50微克的劑量存在以供施用。本發明的另一個實施方案關于以每周每平方米表面積5至10微克的劑量存在以供施用的類苔蘚抑素。

制品的其它實施方案包括視黃素。視黃素以口服形式是生物可利用的并且選自包含視黃酸、視黃醇、視黃醇乙酸酯、視黃醇棕櫚酸酯、13-順視黃酸以及蓓薩羅丁(bexarotene)的群組。實施例將關于視黃素、視黃酸。實施例關于增加α分泌酶表達的量的視黃素。舉例來說(但不限于此),視黃素以每天1.0至240毫克的劑量存在。

本發明的實施方案關于包含對酸具抗性的生物聚合物的納米球。舉例來說(但不限于此),一種生物聚合物是聚(D,L-丙交酯-共乙交酯)。這種生物聚合物具有兩種組分。本發明的實施方案關于丙交酯與乙交酯的比率為25-75%丙交酯并且其余部分包含乙交酯的聚(D,L-丙交酯-共-乙交酯)。如以重量測定,常用比率為50∶50的丙交酯∶乙交酯。這種生物聚合物對胃酸降解具抗性并且允許口服遞送藥物至小腸以供吸收。納米球的直徑為約1至1000納米。

本發明的實施方案關于被凍干用于在水溶液中復原的球。另一個實施方案關于保持于供口服施用的懸浮液中和/或保持于選自片劑、膠囊、凝膠帽以及粉末的群組的口服劑型中的球。供口服施用的懸浮液優選地加以調味以改善患者接受性。

本發明的另一個實施方案是針對一種治療神經退化疾病的方法。這種方法包括施用有效量的保持于多個球中的苔蘚抑素的步驟,每個球包含生物聚合物和苔蘚抑素,并且每個球具有1至1000納米的直徑。

本發明方法的實施方案關于選自由苔蘚抑素1-20組成的群組的苔蘚抑素。某些實施例關于作為苔蘚抑素-1的苔蘚抑素。具有很大效力的幾種苔蘚抑素是苔蘚抑素-3;以及上文所提及的第一類苔蘚抑素、第二類苔蘚抑素以及第三類苔蘚抑素。

本發明的實施方案關于以刺激α分泌酶產生的量施用的苔蘚抑素。舉例來說,苔蘚抑素以每周每平方米表面積0.1至50微克的劑量施用。本發明的另一個實施方案關于以每周每平方米表面積5至10微克的劑量施用的苔蘚抑素。

這種方法的其它實施方案包括共同施用視黃素。視黃素以口服形式是生物可利用的并且選自包含視黃酸、視黃醇、視黃醇乙酸酯、視黃醇棕櫚酸酯、13-順視黃酸以及蓓薩羅丁的群組。實施例將關于視黃素、視黃酸。實施例關于增加α分泌酶表達的量的視黃素。舉例來說(但不限于此),視黃素以每天1.0至240毫克的劑量施用。

本發明的一個實施方案關于對酸具抗性的生物聚合物。舉例來說(但不限于此),一種抗酸的生物聚合物是聚(D,L-丙交酯-共乙交酯)。聚(D,L-丙交酯-共-乙交酯)具有丙交酯與乙交酯的比率。優選的比率為25-75%丙交酯并且其余部分包含乙交酯。

優選地,微球被凍干用于在水溶液中復原,或保持于供口服施用的懸浮液中或保持于選自片劑、膠囊、凝膠帽以及粉末的群組的口服劑型中。

作為另一種制品,本發明的實施方案關于有效量的溶解于醫藥學上可接受的油中的苔蘚抑素,其用于口服施用以供治療神經退化疾病。如本文所用的術語“醫藥學上可接受的油”指的是對于以5至10毫升少量口服攝取合理地良好耐受的油。本發明的實施方案關于橄欖油。其它實施方案包括例如,但不限于包括棉籽油、魚肝油、蓖麻油、紅花油、花生油、芝麻油、玉米油、植物油、起源于動物的油,以及通常用于食品工業中的其它油。油優選地于凝膠帽中施用。

用于人類的苔蘚抑素的有效量為于醫藥學上可接受的油中每天約0.1至3.0毫克以及于微球中每天約100微克至2毫克。

制品的其它實施方案包括溶解于醫藥學上可接受的油中的視黃素,其用于口服施用以供治療神經退化疾病、癌癥以及病毒潛伏。優選地,醫藥學上可接受的油具有以口服形式生物可利用的視黃素并且選自包含視黃酸、視黃醇、視黃醇乙酸酯、視黃醇棕櫚酸酯、13-順視黃酸以及蓓薩羅丁的群組。實施例將關于視黃素、視黃酸。實施例關于增加α分泌酶表達的量的視黃素。舉例來說(但不限于此),視黃素以每天1.0至240毫克的劑量存在。

制品的其它實施方案包括溶解于醫藥學上可接受的油中的苔蘚抑素和視黃素,其用于口服施用以供治療神經退化疾病、癌癥、病毒潛伏以及眼病。

本發明的另一個實施方案是針對一種治療神經退化疾病、癌癥、病毒潛伏和/或眼病的方法,其包括口服施用有效量的溶解于醫藥學上可接受的油中的苔蘚抑素的步驟。

因此,作為神經退化疾病的治療,本發明的實施方案關于用于口服施用有效量的伴有和不伴有視黃素的苔蘚抑素的劑型和方法。本發明的這些和其它特征和優點在閱讀以下具體實施方式的正文以及查看隨附圖式后將顯而易見。

附圖說明

圖1描繪了體現本發明的特征的微球;

圖2描繪了用于制造本發明的一個或多個微球的裝置;

圖3示出了在SH-SY5Y成神經細胞瘤細胞中苔蘚抑素-1誘導的sAPP-a形成在3小時由2μM和4μM視黃酸增加。視黃酸,一種ADAM10/α-分泌酶誘導劑,增加由SH-SY5Y細胞產生sAPP-a。左圖示出了sAPP-a的6E10西方墨點,右圖示出了光密度分析。*-p<0.05對比對照,**-p<0.01對比對照,n=3;以及

圖4描繪了視黃酸(RA,2μM)和苔蘚抑素-1對SH-SY5Y細胞中sAPPα的水平的影響。用RA、苔蘚抑素-1(10-9M)+RA、苔蘚抑素-1(10-10M)、RA+苔蘚抑素-1(10-10M)處理細胞3小時。代表性的西方墨點示出了從培養基回收的sAPPα。苔蘚抑素-1與RA相較于對照都顯著增加sAPPα(p<0.05,p<0.01)。組合RA與苔蘚抑素-1顯著增加從培養基回收的sAPPα。

具體實施方式

本發明的實施方案將關于用于治療由阿爾茨海默氏病例示的神經退化疾病的單一和組合療法、藥物遞送系統、劑型以及方法來描述,應了解,論述也涉及其它神經退化疾??;癌癥,諸如前列腺癌;以及病毒潛伏,諸如HIV和皰疹。這個論述將關于本發明的優選實施方案,應了解,本發明的特征能夠在不脫離教義的情況下進行修改和變更。

首先轉向圖1,描繪了體現本發明的特征的微球,一般以數字11指示。微球11當與足夠數量的同樣的微球組合時,包括有效劑量的于生物聚合物中的苔蘚抑素。每個微球11具有1至1000納米的直徑。盡管以微球描繪,但制品可以具有不規則形狀、粗糙度,或形式呈絲狀。

如本文所用的術語“苔蘚抑素”指的是任何和所有苔蘚抑素和類苔蘚抑素以及其衍生物。根據Castor的美國專利5,750,709和Castor的“苔蘚抑素-1的超臨界流體分離(SupercriticalfluidIsolationofBryostatin-1)”,第1I階段最終報告(PhaseIIFinalReport),SBIR批準號5R44CA64017-03,2001年4月21日來分離苔蘚抑素和類苔蘚抑素。

某些實施例關于作為苔蘚抑素-1的苔蘚抑素。苔蘚抑素-1在本領域中良好表征,并且所述化合物的結構無須在這里重現。具有很高效力的幾種苔蘚抑素是苔蘚抑素-3,以及先前所提及的第一苔蘚抑素、第二苔蘚抑素和第三苔蘚抑素,以及以引用的方式并入的共同未決專利申請的主題。

苔蘚抑素以刺激α分泌酶產生的量施用。舉例來說,苔蘚抑素以每周每平方米表面積0.1至50微克的劑量施用。本發明的另一個實施方案關于以每周每平方米表面積5至10微克的劑量施用的苔蘚抑素。

在關于共同施用視黃素的實施方案中,視黃素存在于同一生物聚合物中,或在施用之前獨立地制得并組合,或同時或在時間上接近地施用以與苔蘚抑素具有組合效應。

視黃素以口服形式是生物可利用的并且選自包含視黃酸、視黃醇、視黃醇乙酸酯、視黃醇棕櫚酸酯、13-順視黃酸以及蓓薩羅丁的群組。視黃酸可用作口服施用的藥物并且以藥品名維甲酸(Tretinoin)和商標名出售。不受特定理論約束,據信視黃素與苔蘚抑素協同起作用以增加α分泌酶的表達。出于這個目的,視黃素以每天1.0至240mg的劑量施用。

本發明的實施方案關于對酸具抗性的生物聚合物。出于本發明論述的目的,對酸具抗性指的是在pH為約1至3的胃酸中維持約0.5至4.0小時的時段。一種生物聚合物是聚(D,L-丙交酯-共乙交酯)。這種生物聚合物具有兩種組分,丙交酯和乙交酯組分。本發明的實施方案關于丙交酯與乙交酯的比率為25-75%丙交酯并且其余部分包含乙交酯的聚(D,L-丙交酯-共-乙交酯)。如以重量測定,常用比率為50∶50的丙交酯∶乙交酯。這種生物聚合物對酸降解具抗性并且允許口服遞送藥物至小腸以供吸收。

本發明的實施方案關于被凍干用于在水溶液中復原的微球。另一個實施方案關于保持于供口服施用的懸浮液中和/或保持于選自片劑、膠囊、凝膠帽以及粉末的群組的口服劑型中的微球。制造片劑、膠囊、凝膠帽以及粉末的方法在本領域中廣為熟知。(Remington,‘制藥科學與實踐(TheScienceandPracticeofPharmacy)’-第20版Lippincott,WilliamsandWilliams)。供口服施用的懸浮液優選地加以調味以改善患者接受性。

本發明的另一個實施方案關于含有有效量的苔蘚抑素的醫藥學上口服可接受的油。確定供施用的油量,并且以本領域中已知的方式將有效量的苔蘚抑素溶解于所述油中。優選地,以本領域中已知的方式將意圖用于口服施用的油量封入凝膠帽中。舉例來說,常常將維生素D和維生素E補充物封入凝膠帽制劑中。

本發明方法和裝置將關于圖2來描述,圖2以示意圖形式描繪了聚合物球裝置,一般以數字13指示。聚合物球裝置由以下主要元件組成:聚合物容器15、苔蘚抑素藥物注射組合件17、摻合室19、減壓容器21以及孔口式噴嘴23。

聚合物容器15經由管道27a、27b以及27c與超臨界、臨界或近臨界注射泵25流體連通。超臨界、臨界或近臨界泵25與超臨界、臨界或近臨界流體的來源流體連通。

聚合物容器15還經由管道33與改性劑注射泵31流體連通,管道33在接點35處與管道27a相交。改性劑注射泵31與改性劑和/或夾帶劑的來源(未示出)連通。

聚合物容器15加載有聚合物。這個聚合物容器經由管道27a、27b以及27c從超臨界、臨界或近臨界泵25接收超臨界、臨界或近臨界流體。聚合物容器15經由管道33從改性劑泵31接收改性劑和/或夾帶劑。將聚合物溶解于超臨界、臨界或近臨界流體和改性劑中以形成聚合物溶液。通過使聚合物和超臨界、臨界或近臨界流體在具有管道27d、27d、27e、27f以及27g、總閥29、靜態混合器31以及循環泵33的回路中循環來促進聚合物溶液的形成。

聚合物容器15經由管道37和39與摻合室19流體連通。摻合室19還與苔蘚抑素藥物注射組合件17流體連通。苔蘚抑素藥物注射組合件17包括苔蘚抑素藥物注射泵43、苔蘚抑素來源41以及管道45。苔蘚抑素藥物注射泵43與苔蘚抑素物質的來源連通并且加壓并迫使所述物質通過管道45。管道45經由管道39與摻合室連通,管道39在接點47處與管道45相交。優選地,接點47是混合“T”。

摻合容器19具有在線混合器的性質并且充分混合來自聚合物容器15和苔蘚抑素藥物注射組合件17的引入流。摻合容器19經由管道49與孔口式噴嘴23連通??卓謔腳繾?3具有背壓調節器的性質并且具有界定經由管道51排料至減壓容器21中的一個或多個孔口的噴嘴。優選地,孔口式噴嘴23控制壓力和減壓速率以使得超臨界、臨界或近臨界二氧化碳以約0.425ml/min與0.075ml/min丙酮或約0.5ml/min二氧化碳與乙醇組合的速率進入孔口以維持2,500psig的系統壓力。

可以經由作為注射泵的一部分的計算機控制器(未示出)將系統的操作壓力預置為精確水平。通過將裝置11封入1/4″Lexan板材中,同時利用與熱交換器(未示出)耦接的Neslab加熱/冷卻系統以維持整個系統中的均勻溫度來達成系統中的溫度控制。

在操作中,將聚合物質首先包裝于聚合物容器15中。將超臨界、臨界或近臨界流體以及一種或多種苔蘚抑素化合物的乙醇溶液分別饋入超臨界、臨界或近臨界注射泵25和31中,并且使其達到所需操作壓力。在替代方案中,將一種或多種苔蘚抑素化合物的乙醇溶液饋入生物活性注射泵43中。

在關于一種或多種苔蘚抑素化合物和一種或多種視黃素化合物的制劑中,將超臨界、臨界或近臨界流體以及苔蘚抑素和視黃素化合物的乙醇溶液分別饋入超臨界、臨界或近臨界注射泵25和31中,并且使其達到所需操作壓力。在替代方案中,將苔蘚抑素和視黃素化合物的乙醇溶液饋入生物活性注射泵43中。

經由超臨界、臨界或近臨界注射泵25用超臨界、臨界或近臨界流體將系統加壓至等于在改性劑注射泵31和生物活性注射泵43中設置的壓力水平的壓力水平,并且用噴嘴孔口23維持在這個水平下。設置所有泵的動態操作模式以使得每個泵可以在其自身所需的流動速率下操作。超臨界、臨界或近臨界流流經聚合物容器15,溶解聚合物,并且在接點47處接觸一種或多種苔蘚抑素化合物、或一種或多種苔蘚抑素和視黃素化合物的流。超臨界、臨界、近臨界流體、苔蘚抑素藥物、或苔蘚抑素和視黃素、或單獨的視黃素與聚合物物質的混合物然后通過摻合室19以供進一步混合。最后,混合溶液進入孔口式噴嘴23并且被注射至減壓容器21中的含有0.1%聚乙烯醇、40%乙醇與微量乙酸的10%蔗糖溶液中。作為超臨界流體減壓的結果,在10%蔗糖溶液、0.1%聚乙烯醇、40%乙醇與微量乙酸中形成含有一種或多種苔蘚抑素化合物的聚合物球、或含有一種或多種苔蘚抑素和視黃素化合物的聚合物球、或含有視黃素化合物的聚合物化合物。膨脹的超臨界流體經由減壓容器21上的排氣管線退出系統。

聚合物納米球具有微球11的性質。這些微球11在-80℃(攝氏度)下冷凍并且凍干。

實施例

視黃酸增強苔蘚抑素-1介導的α分泌酶活性。圖3示出了在SH-SY5Y成神經細胞瘤細胞中苔蘚抑素-1誘導的sAPP-a形成在3小時由2μM和4μM視黃酸增加。視黃酸,一種ADAM10/α-分泌酶誘導劑,增加由SH-SY5Y細胞產生sAPP-a。左圖示出了sAPP-a的6E10西方墨點,右圖示出了光密度分析。*-p<0.05對比對照,**-p<0.01對比對照,n=3;以及

因為苔蘚抑素-1能夠增強我們的AD模型的記憶和認知,并且能夠有效力地刺激SH-SY5Y成神經細胞瘤細胞中α-分泌酶的活性,所以我們研究了用視黃酸(RA,2或4μM)共同處理這些細胞以增加a-分泌酶(ADAM10,以及可能的ADAM17、ADAM9、ADAM19)表達是否將使得總體APP加工增強。實際上,我們確實發現用苔蘚抑素-1與2μM或4μMRA處理的SH-SY5Y細胞顯示較高sAPP-α釋放(如由sAPP-α釋放所測量)。

苔蘚抑素-1+視黃酸2μM(紅條)或4μM(藍條)視黃酸(RA)為時24小時顯示APP至sAPP-α的α分泌酶加工增強。這些發現顯示用RA+苔蘚抑素-1共同處理神經元培養物展現APP加工成sAPP-α的增強,并且表明體內RA與苔蘚抑素-1的組合可以協同增強α-分泌酶活化(圖1)。

這個資料在這里表明RA+苔蘚抑素-1代表創新的組合,其(1)提高α-分泌酶水平,以及(2)活化更豐富的α-分泌酶至(3)達成APP加工成sAPP-α的較高總體水平。

視黃酸+苔蘚抑素-1

圖2示出了在SH-SY5Y成神經細胞瘤細胞中,sAPP□形成由2μM視黃酸增加(p<0.01),類似于10-9M苔蘚抑素-1。當視黃酸(RA)以2μM濃度與10-9M和10-10M的苔蘚抑素-1一起添加時,觀測到相加效應。

令人感興趣的是,圖2示出了RA與苔蘚抑素-1都可以各自顯著增加ADAM10(α-分泌酶的主要形式)的表達,并且組合起來對表達至少存在相加效應。這將首次證實苔蘚抑素-1增加□-分泌酶的表達,其為苔蘚抑素-1的新穎并且未預期的作用。因此,苔蘚抑素-1可以經由2個獨立的機制增加□-分泌酶加工:(i)刺激□□分泌酶的PKC活化;以及(ii)□-分泌酶的表達增加。

還有可能的是,增加的ADAM10豐度可能反映增加的ADAM10穩定性并且未必反映更多的蛋白質合成。在任何情況下,對ADAM10的作用是新穎的。ADAM10mRNA合成可以由苔蘚抑素-1增加,最終得到更多α-分泌酶。

油基苔蘚抑素溶液

用所需量的溶解于橄欖油中的苔蘚抑素制得油基苔蘚抑素溶液,其中維生素E作為防腐劑并且卵磷脂和中鏈甘油三酯乳化劑用以增加生物利用度。用氮氣吹洗和壓頭將溶解有苔蘚抑素的油囊封于凝膠膠囊中。在替代方案中,將溶解有苔蘚抑素的油作為液體劑型施用。在替代方案中,還可以乳化溶解有苔蘚抑素的油并且作為液體制劑施用。乳化可以掩蔽一些與油基口服制劑相關的不合需要的味道和質地。

油基苔蘚抑素和視黃酸溶液

用所需量的溶解于橄欖油中的苔蘚抑素和視黃酸制得油基苔蘚抑素和視黃酸溶液,其中維生素E作為防腐劑并且卵磷脂和中鏈甘油三酯乳化劑用以增加生物利用度。用氮氣吹洗和壓頭將溶解有苔蘚抑素和視黃酸的油囊封于凝膠膠囊中。在替代方案中,將溶解有苔蘚抑素和視黃酸的油作為液體劑型施用。在另一個替代方案中,還可以乳化溶解有苔蘚抑素和視黃酸的油并且作為液體制劑施用。乳化可以掩蔽一些與油基口服制劑相關的不合需要的味道和質地。

苔蘚抑素微球

根據上文所描述的方法制備包含聚合物和苔蘚抑素1的微球。結果概述于下表1中。

表1:苔蘚抑素-1實驗的聚合物納米囊封的概述

實驗編號 SFS P T 粒度 Bryo-1 囊封

(巴) (℃) (nm) (mg/100ml) (%) ALZ-01-01 CO2∶丙酮::95∶5 171 45 259 0.0511 11.4 ALZ-02-01 Freon-22 205 22 973 0.3089 16.8 ALZ-03-01 CO2∶乙醇::85∶15 171 45 246* 0.0027 71.3 ALZ-04-01 CO2∶丙酮::95∶5 171 45 215* 0.0160 50.8 ALZ-05-01 CO2∶丙酮::95∶5 171 45 254* 0.1323 84.0 ALZ-06-01 CO2∶丙酮::85∶15 171 45 251* 0.2374 82.3

*在凍干和復原之后

納米球似乎在4-25℃(攝氏度)下穩定至少一周的持續時間。此外,納米球似乎在37℃(攝氏度)下在約pH1.13的溶液中穩定,類似于胃環境。

結果進一步表明,具有苔蘚抑素和苔蘚抑素1的納米球特別地誘導淀粉樣前體蛋白(APP)至s-APPα的α-分泌酶加工,并且活化SH-SY5Y成神經細胞瘤細胞系中的蛋白激酶C(PKC)同種型α、δ以及ε(由膜易位測量)。這些事件是與防止β-分泌酶介導的β-淀粉樣蛋白形成相關的良好描述的細胞和藥理事件,β-淀粉樣蛋白形成是人類阿爾茨海默氏病和阿爾茨海默氏病的sweAPP/PS1小鼠模型的癡呆的推定原因。

苔蘚抑素和視黃素微球

根據上文所描述的方法制備包含聚合物以及一種或多種苔蘚抑素和視黃素化合物的微球。

水迷宮研究

對帶有與早發型阿爾茨海默氏病相關的突變瑞典淀粉樣前體蛋白(sweAPP)和PS1(早老素-1(presenilin-1))基因的小鼠品系B6C3-Tg在5-6月齡進行水迷宮測試。這些測試表明,與在對照動物中觀察的記憶獲得技能相比,隔天口服接收于油制劑中的劑量為5微克/小鼠的苔蘚抑素-1的小鼠顯示出對抗阿爾茨海默氏病介導的由APP/PS1突變產生的記憶喪失的顯著?;?。

因此,我們已經關于優選的實施方案描述本發明,應了解,這些實施方案能夠在不脫離本文中的教義的情況下進行修改和變更。因此,本發明不應限于精確的細節,而應涵蓋以上權利要求書和其等效物的主題。

關 鍵 詞:
用于 治療 神經 退化 疾病 其它 組合 方法
  專利查詢網所有資源均是用戶自行上傳分享,僅供網友學習交流,未經上傳用戶書面授權,請勿作他用。
關于本文
本文標題:用于治療神經退化疾病和其它疾病的組合治療劑和方法.pdf
鏈接地址://www.vmyqew.com.cn/p-6872753.html
關于我們 - 網站聲明 - 網站地圖 - 資源地圖 - 友情鏈接 - 網站客服客服 - 聯系我們

[email protected] 2017-2018 www.vmyqew.com.cn網站版權所有
經營許可證編號:粵ICP備17046363號-1 
 


收起
展開