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维戈塞尔塔队: 一種用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201610618504.9

申請日:

20160801

公開號:

CN106212284B

公開日:

20181207

當前法律狀態:

有效性:

有效

法律詳情:
IPC分類號: A01H4/00 主分類號: A01H4/00
申請人: 中寧縣智才技術服務有限公司
發明人: 韋波
地址: 751200 寧夏回族自治區中衛市中寧縣郭莊枸杞市場杞福商務賓館209室
優先權: CN201610618504A
專利代理機構: 北京華仁聯合知識產權代理有限公司 代理人: 蘇雪雪
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201610618504.9

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,包括以下原料:哈密瓜汁、香瓜汁、李子汁、葡萄汁、茶多酚、硝酸鉀、磷酸鐵、硝酸銨、硝酸鈣、硝酸鎂、碘酸鉀、硼酸鈉、鉬酸鉀、氯化鋅、硫酸亞錳、氯化銅、硝酸鐵、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6?芐基腺膘呤、異戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、瓊脂、激動素、助溶劑、分散劑、相容劑、穩定劑、抗菌劑、水。本發明的用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,搭配合理,營養全面,能夠快速促根生莖,提高移栽存活率,同時也能促進黃酮類化合物的積累,提高經濟效益;本發明的用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基制備方法,操作簡單,易于實現產業化、規范化和標準化生產。

權利要求書

1.一種用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,其特征在于,以重量份為單位,包括以下原料:哈密瓜汁210-292份、香瓜汁158-242份、李子汁128-200份、葡萄汁105-180份、茶多酚50-80份、硝酸鉀5-8份、磷酸鐵4-6份、硝酸銨4-6份、硝酸鈣0.8-1份、硝酸鎂0.6-0.8份、碘酸鉀0.3-0.5份、硼酸鈉0.3-0.5份、鉬酸鉀0.3-0.5份、氯化鋅0.2-0.4份、硫酸亞錳0.2-0.4份、氯化銅0.2-0.3份、硝酸鐵0.2-0.3份、維生素0.1-0.3份、氨基酸0.1-0.3份、吲哚丁酸0.06-0.1份、赤霉素0.06-0.1份、6-芐基腺膘呤0.06-0.1份、異戊烯氨基嘌呤0.08-0.12份、萘乙酸0.04-0.08份、瓊脂0.2-0.4份、激動素0.06-0.09份、助溶劑1-3份、分散劑0.8-2.5份、相容劑1.2-2份、穩定劑1-2份、抗菌劑1.5-3份、水8000-12000份;所述分散劑以重量份為單位,包括以下原料:羧甲基纖維素鉀4-6份、改性淀粉3-6份、聚丙烯酸鉀2-4份、海藻酸鉀1-3份;所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基的制備方法,包括以下步驟:S1:將哈密瓜、香瓜、李子汁、葡萄混合用攪碎機攪碎,所得榨汁過2000-6000目篩子,制得混合汁;S2:茶多酚的制備,包括以下步驟:S21:將綠茶粉碎后過50-90目篩,與質量分數為36%-62%的乙醇水溶液按質量比為1:13-19混合,在溫度為30-36℃,超聲波功率為180-260W下,提取2-3次,每次7-15min,過濾,合并濾液,濃縮,制得茶多酚粗提取液;S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH調節至6.2-6.7,在離心轉速為3000-6000r/min下除去雜質,采用0.05-0.1μm濾膜在溫度為30-37℃下對離心后的溶液進行過濾,制得過濾液;S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取,在溫度≤-12℃下冷凍濃縮,在溫度為78-88℃下干燥后制得茶多酚;S3:將步驟S1制得的混合汁、步驟S2制得的茶多酚、硝酸鉀、磷酸鐵、硝酸銨、硝酸鈣、硝酸鎂、碘酸鉀、硼酸鈉、鉬酸鉀、氯化鋅、硫酸亞錳、氯化銅、硝酸鐵、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、異戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、瓊脂、激動素、助溶劑、分散劑、相容劑、穩定劑、抗菌劑、水按比例混合均勻,制得混合液;S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5-5.6,接著采用脈動真空壓力蒸氣滅菌器在溫度為134-136℃,壓力為210-230KPa下,滅菌1.5-2min,制得用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基。2.根據權利要求1所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,其特征在于,所述維生素由以下組分組成:維生素A0.06-0.1份、維生素B0.06-0.1份、維生素B0.04-0.05份、維生素D0.04-0.05份。3.根據權利要求1所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,其特征在于,所述氨基酸由以下組分組成:甘氨酸0.08-0.1份、胱氨酸0.06-0.08份、脯氨酸0.04-0.07份、絲氨酸0.02-0.05份。4.根據權利要求1所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,其特征在于,所述助溶劑為聚乙烯吡咯烷酮。5.根據權利要求1所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,其特征在于,所述相容劑為美國杜邦EEA2112AC。6.根據權利要求1所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,其特征在于,所述穩定劑為黃原膠。7.根據權利要求1所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,其特征在于,所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯。

說明書

【技術領域】

本發明屬于半枝蓮種植技術領域,具體涉及一種用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基。

【背景技術】

半枝蓮(Scutellaria barbate D.Don)為唇形科黃芩屬植物,別名并頭草、狹葉韓信草、赴山鞭、牙刷草、勺把草、蘭花草等,屬唇形科多年生野生藥用草本植物,全草入藥。其性味辛、苦、寒,歸肺、肝、腎經,具有清熱解毒、散瘀止血、利尿消腫的功效。半枝蓮中含有多種化合物,黃酮類成分是其主要的活性成分,具有抗腫瘤、抗氧化、抗菌等多種藥理活性。

半枝蓮是治癌的首選藥物,在醫學方面的用量逐年增加,是國家中醫藥管理局近年重點推薦發展的63種緊缺中藥材之一。野生資源不斷減少頻臨滅絕,而家種半枝蓮受氣候和地理條件等多種因素的影響,產量很不穩定,經常有供不應求的局面出現。鑒于半枝蓮的良好療效,為了更好地開發和利用中藥半枝蓮資源,可以通過組織培養技術組織培養半枝蓮,可以短期內提供大量優質的半枝蓮種苗,減低生產成本,提高種苗質量,從而提高種苗成活率及藥材產量。

專利申請文獻“一種半枝蓮組培種苗工廠化生產方法(公開號:CN103518626A)”公開了一種以MS為基本培養基,添加各種植物激素的培養基,達到了快速組培半枝蓮組培苗的效果,而然該專利申請未涉及促進半枝蓮黃酮類化合物和多糖積累的技術。

【發明內容】

本發明提供一種用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,以解決如何提高半枝蓮的主要有效成分黃酮類化合物和多糖的含量,提高經濟效益等問題。本發明的用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,搭配合理,營養全面,能夠快速促根生莖,提高移栽存活率,同時也能促進黃酮類化合物的積累,提高經濟效益。

為解決以上技術問題,本發明采用以下技術方案:

一種用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,以重量份為單位,包括以下原料:哈密瓜汁210-292份、香瓜汁158-242份、李子汁128-200份、葡萄汁105-180份、茶多酚50-80份、硝酸鉀5-8份、磷酸鐵4-6份、硝酸銨4-6份、硝酸鈣0.8-1份、硝酸鎂0.6-0.8份、碘酸鉀0.3-0.5份、硼酸鈉0.3-0.5份、鉬酸鉀0.3-0.5份、氯化鋅0.2-0.4份、硫酸亞錳0.2-0.4份、氯化銅0.2-0.3份、硝酸鐵0.2-0.3份、維生素0.1-0.3份、氨基酸0.1-0.3份、吲哚丁酸0.06-0.1份、赤霉素0.06-0.1份、6-芐基腺膘呤0.06-0.1份、異戊烯氨基嘌呤0.08-0.12份、萘乙酸0.04-0.08份、瓊脂0.2-0.4份、激動素0.06-0.09份、助溶劑1-3份、分散劑0.8-2.5份、相容劑1.2-2份、穩定劑1-2份、抗菌劑1.5-3份、水8000-12000份;

所述分散劑以重量份為單位,包括以下原料:羧甲基纖維素鉀4-6份、改性淀粉3-6份、聚丙烯酸鉀2-4份、海藻酸鉀1-3份;

所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基的制備方法,包括以下步驟:

S1:將哈密瓜、香瓜、李子汁、葡萄混合用攪碎機攪碎,所得榨汁過2000-6000目篩子,制得混合汁;

S2:茶多酚的制備,包括以下步驟:

S21:將綠茶粉碎后過50-90目篩,與質量分數為36%-62%的乙醇水溶液按質量比為1:13-19混合,在溫度為30-36℃,超聲波功率為180-260W下,提取2-3次,每次7-15min,過濾,合并濾液,濃縮,制得茶多酚粗提取液;

S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH調節至6.2-6.7,在離心轉速為3000-6000r/min下除去雜質,采用0.05-0.1μm濾膜在溫度為30-37℃下對離心后的溶液進行過濾,制得過濾液;

S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取,在溫度≤-12℃下冷凍濃縮,在溫度為78-88℃下干燥后制得茶多酚;

S3:將步驟S1制得的混合汁、步驟S2制得的茶多酚、硝酸鉀、磷酸鐵、硝酸銨、硝酸鈣、硝酸鎂、碘酸鉀、硼酸鈉、鉬酸鉀、氯化鋅、硫酸亞錳、氯化銅、硝酸鐵、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、異戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、瓊脂、激動素、助溶劑、分散劑、相容劑、穩定劑、抗菌劑、水按比例混合均勻,制得混合液;

S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5-5.6,接著采用脈動真空壓力蒸氣滅菌器在溫度為134-136℃,壓力為210-230KPa下,滅菌1.5-2min,制得用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基。

進一步地,所述維生素由以下組分組成:維生素A0.06-0.1份、維生素B10.06-0.1份、維生素B20.04-0.05份、維生素D0.04-0.05份。

進一步地,所述氨基酸由以下組分組成:甘氨酸0.08-0.1份、胱氨酸0.06-0.08份、脯氨酸0.04-0.07份、絲氨酸0.02-0.05份。

進一步地,所述助溶劑為聚乙烯吡咯烷酮。

進一步地,所述相容劑為美國杜邦EEA2112AC。

進一步地,所述穩定劑為黃原膠。

進一步地,所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯。

本發明用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基中部分成分的作用如下:

果汁的添加有利于多糖含量的積累。

茶多酚作為一種抗氧劑,既能使細胞生長緩慢,也可以促進黃酮積累。

鉀元素的營養功效可以提高光合作用的強度,促進作物體內淀粉和糖的形成,增強作物的抗逆性和抗病能力,還能提高作物對氮的吸收利用。

磷是形成細胞核蛋白、卵磷脂等不可缺少的元素。磷元素能加速細胞分裂,促使根系和地上部加快生長,促進花芽分化,提早成熟,提高果實品質。

氮是蛋白質構成的主要元素,蛋白質是細胞原生質組成中的基本物質。氮元素能促進蛋白質和葉綠素的形成,使葉色深綠,葉面積增大,促進碳的同化,有利于產量增加,品質改善。

缺少鈣植物分生組織的生長變慢,缺鈣和癥初在生長點和幼葉,嚴重時,葉子變形和失綠,在葉子的邊緣出現壞死斑點。

鎂是葉綠素的組成成分。如果缺少鎂,葉片失去了綠色,不能制造營養物質。

碘是植物生長不可缺少的元素,被譽為生命元素、智慧元素。

硼在植物體內比較集中于莖尖、根尖、葉片和花器官中,雙子葉植物中的含量常常高于單子葉植物。硼可以提高豆科作物根瘤菌的固氮活性,增加固氮量,缺硼時,根留不發達,影響固氮量。硼還能增強作物抗逆性。

鉬是固氮微生物,特別是與豆科作物共生的根瘤菌固定大氣氮素時所必需的。同時又能增進葉片光合作用強度。缺鉬時植株矮小,葉片脈間失綠,葉緣枯焦,向內卷曲,成萎蔫態。

鋅能促進作物進行光合作用,它是多種酶的組成成分,缺鋅時作物生長發育出現停滯。

植物葉綠體中含有錳,錳能促進種子發芽和幼苗時期生長,缺錳時影響作物的光合作用、呼吸作用、硝態氮在體內的積累。表現為葉片脈間失綠黃化,有褐色斑點。

銅參加植物的光合作用、呼吸作用、氮代謝、增強植物的抗性。缺銅時植株生長瘦弱,新葉發黃,凋萎干枯,葉尖卷曲發白,有壞死斑點。

鐵是葉綠素形成不可缺少的,在植株體內很難轉移,所以葉片“失綠癥”是植物缺鐵的表現,并且這種失綠首先表現在幼嫩葉片上。

維生素對植物的生根有效應,能夠促進植物生根。

氨基酸是植物生長所必需的營養物質,由于氨基酸本身的特性,對植物生長特別是光合作用具有獨特的促進作用,它可以增加植物葉綠素含量,提高酶的活性,促進二氧化碳的滲透,使光合作用更加旺盛,對提高作物品質,增加Vc和糖的含量都有著重要作用。

本發明具有以下有益效果:

(1)茶多酚能促進半枝蓮黃酮類化合物的積累;茶多酚作為抗氧劑,同時能抑制植物細胞的生長,然而本發明在其他培養基組分協同作用下,茶多酚的抑制半枝蓮作用較??;

(2)本發明的用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基有利于提高半枝蓮苗的移栽存活率,達到99%-100%;

(3)本發明的用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,搭配合理,營養全面,能夠快速促根生莖,提高移栽存活率,同時也能促進黃酮類化合物和多糖的積累,提高經濟效益;

(4)采用本發明的用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基制備方法,能夠縮短消毒時間,提高滅菌效果可靠性和產業化生產效率,降低生產成本;

(5)本發明的用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基制備方法,操作簡單,易于實現產業化、規范化和標準化生產。

【具體實施方式】

為便于更好地理解本發明,通過以下實施例加以說明,這些實施例屬于本發明的?;し段?,但不限制本發明的?;し段?。

在實施例中,所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,以重量份為單位,包括以下原料:哈密瓜汁210-292份、香瓜汁158-242份、李子汁128-200份、葡萄汁105-180份、茶多酚50-80份、硝酸鉀5-8份、磷酸鐵4-6份、硝酸銨4-6份、硝酸鈣0.8-1份、硝酸鎂0.6-0.8份、碘酸鉀0.3-0.5份、硼酸鈉0.3-0.5份、鉬酸鉀0.3-0.5份、氯化鋅0.2-0.4份、硫酸亞錳0.2-0.4份、氯化銅0.2-0.3份、硝酸鐵0.2-0.3份、維生素0.1-0.3份、氨基酸0.1-0.3份、吲哚丁酸0.06-0.1份、赤霉素0.06-0.1份、6-芐基腺膘呤0.06-0.1份、異戊烯氨基嘌呤0.08-0.12份、萘乙酸0.04-0.08份、瓊脂0.2-0.4份、激動素0.06-0.09份、助溶劑1-3份、分散劑0.8-2.5份、相容劑1.2-2份、穩定劑1-2份、抗菌劑1.5-3份、水8000-12000份;

所述維生素由以下組分組成:維生素A0.06-0.1份、維生素B10.06-0.1份、維生素B20.04-0.05份、維生素D0.04-0.05份;

所述氨基酸由以下組分組成:甘氨酸0.08-0.1份、胱氨酸0.06-0.08份、脯氨酸0.04-0.07份、絲氨酸0.02-0.05份;

所述助溶劑為聚乙烯吡咯烷酮;

所述分散劑以重量份為單位,包括以下原料:羧甲基纖維素鉀4-6份、改性淀粉3-6份、聚丙烯酸鉀2-4份、海藻酸鉀1-3份;

所述相容劑為美國杜邦EEA2112AC;

所述穩定劑為黃原膠;

所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯;

所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基的制備方法,包括以下步驟:

S1:將哈密瓜、香瓜、李子汁、葡萄混合用攪碎機攪碎,所得榨汁過2000-6000目篩子,制得混合汁;

S2:茶多酚的制備,包括以下步驟:

S21:將綠茶粉碎后過50-90目篩,與質量分數為36%-62%的乙醇水溶液按質量比為1:13-19混合,在溫度為30-36℃,超聲波功率為180-260W下,提取2-3次,每次7-15min,過濾,合并濾液,濃縮,制得茶多酚粗提取液;

S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH調節至6.2-6.7,在離心轉速為3000-6000r/min下除去雜質,采用0.05-0.1μm濾膜在溫度為30-37℃下對離心后的溶液進行過濾,制得過濾液;

S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取,在溫度≤-12℃下冷凍濃縮,在溫度為78-88℃下干燥后制得茶多酚;

S3:將步驟S1制得的混合汁、步驟S2制得的茶多酚、硝酸鉀、磷酸鐵、硝酸銨、硝酸鈣、硝酸鎂、碘酸鉀、硼酸鈉、鉬酸鉀、氯化鋅、硫酸亞錳、氯化銅、硝酸鐵、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、異戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、瓊脂、激動素、助溶劑、分散劑、相容劑、穩定劑、抗菌劑、水按比例混合均勻,制得混合液;

S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5-5.6,接著采用脈動真空壓力蒸氣滅菌器在溫度為134-136℃,壓力為210-230KPa下,滅菌1.5-2min,制得用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基。

下面通過更具體的實施例加以說明。

實施例1

一種用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,以重量份為單位,包括以下原料:哈密瓜汁250份、香瓜汁200份、李子汁160份、葡萄汁140份、茶多酚65份、硝酸鉀7份、磷酸鐵5份、硝酸銨5份、硝酸鈣0.9份、硝酸鎂0.7份、碘酸鉀0.4份、硼酸鈉0.4份、鉬酸鉀0.4份、氯化鋅0.3份、硫酸亞錳0.3份、氯化銅0.2份、硝酸鐵0.2份、維生素0.2份、氨基酸0.2份、吲哚丁酸0.08份、赤霉素0.08份、6-芐基腺膘呤0.08份、異戊烯氨基嘌呤0.1份、萘乙酸0.06份、瓊脂0.3份、激動素0.08份、助溶劑2份、分散劑1.6份、相容劑1.6份、穩定劑1.5份、抗菌劑2.2份、水10000份;

所述維生素由以下組分組成:維生素A0.08份、維生素B10.08份、維生素B20.04份、維生素D0.04份;

所述氨基酸由以下組分組成:甘氨酸0.09份、胱氨酸0.07份、脯氨酸0.06份、絲氨酸0.04份;

所述助溶劑為聚乙烯吡咯烷酮;

所述分散劑以重量份為單位,包括以下原料:羧甲基纖維素鉀5份、改性淀粉5份、聚丙烯酸鉀3份、海藻酸鉀2份;

所述相容劑為美國杜邦EEA2112AC;

所述穩定劑為黃原膠;

所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯;

所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基的制備方法,包括以下步驟:

S1:將哈密瓜、香瓜、李子汁、葡萄混合用攪碎機攪碎,所得榨汁過4000目篩子,制得混合汁;

S2:茶多酚的制備,包括以下步驟:

S21:將綠茶粉碎后過80目篩,與質量分數為50%的乙醇水溶液按質量比為1:16混合,在溫度為34℃,超聲波功率為220W下,提取2次,每次11min,過濾,合并濾液,濃縮,制得茶多酚粗提取液;

S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH調節至6.5,在離心轉速為5000r/min下除去雜質,采用0.08μm濾膜在溫度為34℃下對離心后的溶液進行過濾,制得過濾液;

S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取,在溫度為-12℃下冷凍濃縮,在溫度為84℃下干燥后制得茶多酚;

S3:將步驟S1制得的混合汁、步驟S2制得的茶多酚、硝酸鉀、磷酸鐵、硝酸銨、硝酸鈣、硝酸鎂、碘酸鉀、硼酸鈉、鉬酸鉀、氯化鋅、硫酸亞錳、氯化銅、硝酸鐵、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、異戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、瓊脂、激動素、助溶劑、分散劑、相容劑、穩定劑、抗菌劑、水按比例混合均勻,制得混合液;

S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5.3,接著采用脈動真空壓力蒸氣滅菌器在溫度為135℃,壓力為220KPa下,滅菌1.8min,制得用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基。

實施例2

一種用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,以重量份為單位,包括以下原料:哈密瓜汁210份、香瓜汁158份、李子汁128份、葡萄汁105份、茶多酚50份、硝酸鉀5份、磷酸鐵4份、硝酸銨4份、硝酸鈣0.8份、硝酸鎂0.6份、碘酸鉀0.3份、硼酸鈉0.3份、鉬酸鉀0.3份、氯化鋅0.2份、硫酸亞錳0.2份、氯化銅0.2份、硝酸鐵0.2份、維生素0.1份、氨基酸0.1份、吲哚丁酸0.06份、赤霉素0.06份、6-芐基腺膘呤0.06份、異戊烯氨基嘌呤0.08份、萘乙酸0.04份、瓊脂0.2份、激動素0.06份、助溶劑1份、分散劑0.8份、相容劑1.2份、穩定劑1份、抗菌劑1.5份、水8000份;

所述維生素由以下組分組成:維生素A0.06份、維生素B10.06份、維生素B20.04份、維生素D0.04份;

所述氨基酸由以下組分組成:甘氨酸0.08份、胱氨酸0.06份、脯氨酸0.04份、絲氨酸0.02份;

所述助溶劑為聚乙烯吡咯烷酮;

所述分散劑以重量份為單位,包括以下原料:羧甲基纖維素鉀4份、改性淀粉3份、聚丙烯酸鉀2份、海藻酸鉀1份;

所述相容劑為美國杜邦EEA2112AC;

所述穩定劑為黃原膠;

所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯;

所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基的制備方法,包括以下步驟:

S1:將哈密瓜、香瓜、李子汁、葡萄混合用攪碎機攪碎,所得榨汁過2000目篩子,制得混合汁;

S2:茶多酚的制備,包括以下步驟:

S21:將綠茶粉碎后過50目篩,與質量分數為36%的乙醇水溶液按質量比為1:13混合,在溫度為30℃,超聲波功率為180W下,提取2次,每次15min,過濾,合并濾液,濃縮,制得茶多酚粗提取液;

S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH調節至6.2,在離心轉速為3000r/min下除去雜質,采用0.05μm濾膜在溫度為30℃下對離心后的溶液進行過濾,制得過濾液;

S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取,在溫度為-18℃下冷凍濃縮,在溫度為78℃下干燥后制得茶多酚;

S3:將步驟S1制得的混合汁、步驟S2制得的茶多酚、硝酸鉀、磷酸鐵、硝酸銨、硝酸鈣、硝酸鎂、碘酸鉀、硼酸鈉、鉬酸鉀、氯化鋅、硫酸亞錳、氯化銅、硝酸鐵、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、異戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、瓊脂、激動素、助溶劑、分散劑、相容劑、穩定劑、抗菌劑、水按比例混合均勻,制得混合液;

S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5,接著采用脈動真空壓力蒸氣滅菌器在溫度為134℃,壓力為210KPa下,滅菌2min,制得用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基。

實施例3

一種用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基,以重量份為單位,包括以下原料:哈密瓜汁292份、香瓜汁242份、李子汁200份、葡萄汁180份、茶多酚80份、硝酸鉀8份、磷酸鐵6份、硝酸銨6份、硝酸鈣1份、硝酸鎂0.8份、碘酸鉀0.5份、硼酸鈉0.5份、鉬酸鉀0.5份、氯化鋅0.4份、硫酸亞錳0.4份、氯化銅0.3份、硝酸鐵0.3份、維生素0.3份、氨基酸0.3份、吲哚丁酸0.1份、赤霉素0.1份、6-芐基腺膘呤0.1份、異戊烯氨基嘌呤0.12份、萘乙酸0.08份、瓊脂0.4份、激動素0.09份、助溶劑3份、分散劑2.5份、相容劑2份、穩定劑2份、抗菌劑3份、水12000份;

所述維生素由以下組分組成:維生素A0.1份、維生素B10.1份、維生素B20.05份、維生素D0.05份;

所述氨基酸由以下組分組成:甘氨酸0.1份、胱氨酸0.08份、脯氨酸0.07份、絲氨酸0.05份;

所述助溶劑為聚乙烯吡咯烷酮;

所述分散劑以重量份為單位,包括以下原料:羧甲基纖維素鉀6份、改性淀粉6份、聚丙烯酸鉀4份、海藻酸鉀3份;

所述相容劑為美國杜邦EEA2112AC;

所述穩定劑為黃原膠;

所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯;

所述用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基的制備方法,包括以下步驟:

S1:將哈密瓜、香瓜、李子汁、葡萄混合用攪碎機攪碎,所得榨汁過6000目篩子,制得混合汁;

S2:茶多酚的制備,包括以下步驟:

S21:將綠茶粉碎后過90目篩,與質量分數為62%的乙醇水溶液按質量比為1:19混合,在溫度為36℃,超聲波功率為260W下,提取3次,每次7min,過濾,合并濾液,濃縮,制得茶多酚粗提取液;

S22:將步驟S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH調節至6.7,在離心轉速為6000r/min下除去雜質,采用0.1μm濾膜在溫度為37℃下對離心后的溶液進行過濾,制得過濾液;

S23:將步驟S22制得的過濾液用乙醚提取,在溫度為-20℃下冷凍濃縮,在溫度為88℃下干燥后制得茶多酚;

S3:將步驟S1制得的混合汁、步驟S2制得的茶多酚、硝酸鉀、磷酸鐵、硝酸銨、硝酸鈣、硝酸鎂、碘酸鉀、硼酸鈉、鉬酸鉀、氯化鋅、硫酸亞錳、氯化銅、硝酸鐵、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、異戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、瓊脂、激動素、助溶劑、分散劑、相容劑、穩定劑、抗菌劑、水按比例混合均勻,制得混合液;

S4:將步驟S3制得的混合液pH值調節至5.6,接著采用脈動真空壓力蒸氣滅菌器在溫度為136℃,壓力為230KPa下,滅菌1.5min,制得用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基。

為驗證本發明用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基的效果,通過以下實驗驗證。

每組選用規格基本一致的2-3cm的半枝蓮帶芽莖段數量100,對照組1以哈密瓜汁、香瓜汁、李子汁、葡萄汁、硝酸鉀、磷酸鐵、硝酸銨、硝酸鈣、硝酸鎂、碘酸鉀、硼酸鈉、鉬酸鉀、氯化鋅、硫酸亞錳、氯化銅、硝酸鐵、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、異戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、瓊脂、激動素、助溶劑、分散劑、相容劑、穩定劑、抗菌劑、水組成的培養基,對照組2單獨以茶多酚為培養基,其他采用實施例1-3的培養基。培養110天后測量半枝蓮苗黃酮類化合物平均得率和長度,結果見表1。

表1培養基組培半枝蓮苗黃酮類化合物平均得率和長度情況

由表1可知,實施例1-3的半枝蓮苗黃酮類化合物平均得率比對照組1的半枝蓮苗黃酮類化合物平均得率高20.51%-26.92%;實施例1-3的半枝蓮苗長度比對照組1的半枝蓮苗長度短1.51%-2.18%,對照組2半枝蓮幾乎不生長,說明了茶多酚的存在能大大提高半枝蓮苗黃酮類化合物平均得率,但同時茶多酚作為抗氧劑,也抑制植物細胞的生長,然而在其他培養基組分伍配作用下,茶多酚的抑制作用較小。

每組選用規格基本一致的2-3cm的半枝蓮帶芽莖段數量100,對照組以茶多酚、硝酸鉀、磷酸鐵、硝酸銨、硝酸鈣、硝酸鎂、碘酸鉀、硼酸鈉、鉬酸鉀、氯化鋅、硫酸亞錳、氯化銅、硝酸鐵、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、異戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、瓊脂、激動素、助溶劑、分散劑、相容劑、穩定劑、抗菌劑、水組成的培養基,其他采用實施例1-3的培養基。培養110天后測量組培苗的多糖平均得率和長度,結果見表2。

表2培養基組培半枝蓮苗多糖平均得率和長度情況

由表2可知,實施例1-3的半枝蓮苗多糖平均得率比對照組的半枝蓮苗多糖平均得率高25.61%-30.4%;實施例1-3的半枝蓮苗長度比對照組的半枝蓮苗長度短0.34%-1.03%,說明了用培養基無水果汁,或水果汁與其他培養基組分伍配作用下,對半枝蓮苗高度增長作用不大。

表3是實施例1-3培養基組培半枝蓮苗移栽存活情況。

表3培養基組培半枝蓮苗移栽存活情況

由表3可以知道,以本發明的用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基組培半枝蓮苗的平均移栽存活率為99%-100%,說明了本發明用于提高黃酮類化合物和多糖的培養基有利于提高半枝蓮苗的移栽存活率。

以上內容不能認定本發明的具體實施只局限于這些說明,對于本發明所屬技術領域的普通技術人員來說,在不脫離本發明構思的前提下,還可以做出若干簡單推演或替換,都應當視為屬于本發明由所提交的權利要求書確定的專利?;し段?。

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一種 用于 提高 酮類 化合物 多糖 培養基
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