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维戈塞尔塔vs巴萨: 一種胡柚提取物的用途.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201410786811.9

申請日:

20141218

公開號:

CN104547166A

公開日:

20150429

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A61K36/752,A23L1/212,A23L1/29,A61P3/06 主分類號: A61K36/752,A23L1/212,A23L1/29,A61P3/06
申請人: 浙江大學
發明人: 李鮮,賈勝,孫崇德,陳昆松
地址: 310027 浙江省杭州市西湖區浙大路38號
優先權: CN201410786811A
專利代理機構: 杭州求是專利事務所有限公司 代理人: 張法高;趙杭麗
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201410786811.9

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明提供一種胡柚提取物在制備降脂功能食品、保健品或藥物中的應用。胡柚油胞層、白皮層和囊衣層提取物的冷凍干燥粉末,經過丙酮超聲提取、旋轉蒸發、過固相萃取柱、真空干燥得到。胡柚提取物能夠在高脂誘導肥胖C57BL/6小鼠體內降低體重,顯著降低肝臟和脂肪組織質量,顯著降低血清中含有的甘油三酯、總膽固醇以及低密度脂蛋白膽固醇,降低肝臟中含有的甘油三酯和總膽固醇??勺魑δ蓯稱?、保健品或防治藥物用于脂肪代謝異常相關疾病的防治。

權利要求書

1.一種胡柚提取物在制備降脂藥物中的應用,其特征在于,所述胡柚提取物是將胡柚油胞層、白皮層和囊衣層的提取物的冷凍干燥粉末,經過丙酮超聲提取、旋轉蒸發、過固相萃取柱、真空干燥得到。2.一種胡柚提取物在制備降脂功能食品中的應用,其特征在于,所述胡柚提取物是將胡柚油胞層、白皮層和囊衣層的提取物的冷凍干燥粉末,經過丙酮超聲提取、旋轉蒸發、過固相萃取柱、真空干燥得到。3.一種胡柚提取物在制備降脂保健品中的應用,其特征在于,所述胡柚提取物是將胡柚油胞層、白皮層和囊衣層的提取物的冷凍干燥粉末,經過丙酮超聲提取、旋轉蒸發、過固相萃取柱、真空干燥得到。4.根據權利要求1-3任一所述的一種胡柚提取物的應用,其特征在于,所述降脂是降低肝臟和脂肪組織重量,降低血清中含有的甘油三酯、總膽固醇以及低密度脂蛋白膽固醇,降低肝臟中含有的甘油三酯和總膽固醇。5.一種胡柚提取物在制備脂肪代謝異常相關降脂產品中的應用,其特征在于,所述胡柚提取物是將胡柚油胞層、白皮層和囊衣層的提取物的冷凍干燥粉末,經過丙酮超聲提取、旋轉蒸發、過固相萃取柱、真空干燥得到,所述脂肪代謝異常相關降脂產品為功能食品、保健品或防治藥物。

說明書

技術領域

本發明屬醫藥領域,涉及天然來源的胡柚提取物在制備降脂功能食品、保健品或藥物中的應用,尤其涉及胡柚提取物的制備方法和在小鼠體內水平上降脂的應用。

背景技術

????近幾十年來,肥胖已經成為世界范圍內主要的公共健康問題。肥胖可以增加諸如2?型糖尿病、冠心病、高血壓等慢性病的發病風險。肥胖是由能量攝入和代謝支出不平衡誘發的代謝綜合癥,具體表現為脂肪組織的脂肪積累,導致脂肪細胞數量增多,脂肪細胞尺寸增大。目前,用于肥胖治療的方法主要有節食、吃減肥藥等,但具有很多限制因素,比如副作用和容易反彈等。因此,副作用較小的天然產物越來越引起人們的研究興趣。

????胡柚(Citrus?changshanensis)是柚和酸橙的雜交后代,是浙江省衢州市常山縣特有的雜柑類良種,至今己有上百年的種植歷史。其香氣獨特、濃郁,果實外形美觀,呈鮮黃色,富有光澤,果肉金黃色,汁液豐富,食之酸甜適中,略帶苦味,食后使人覺得非常爽口。胡柚具有清涼祛火,鎮咳化痰,潤喉醒酒,養顏益壽等諸多藥理功效,營養價值很高。然而,對于胡柚提取物在活體內是否具有降脂活性、胡柚不同組織部位提取物降脂是否具有組織特異性,尚未見諸報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種胡柚提取物在制備降脂功能食品、保健品或藥物中的應用,所述胡柚提取物是指胡柚油胞層、白皮層和囊衣層的提取物的冷凍干燥粉末,經過丙酮超聲提取、旋轉蒸發、過固相萃?。⊿PE)柱、真空干燥得到。

本發明強調胡柚提取物這種天然產物在降脂中的最新發現。本發明證實胡柚油胞層、白皮層和囊衣層提取物(劑量均為40mg/kg?BW)能夠在高脂誘導肥胖C57BL/6小鼠體內(in?vivo)降低體重,顯著降低肝臟和脂肪組織質量,顯著降低血清中含有的甘油三酯、總膽固醇以及低密度脂蛋白膽固醇,降低肝臟中含有的甘油三酯和總膽固醇。

本發明的另一個目的是提供一種胡柚提取物在制備脂肪代謝異常相關降脂產品中的應用,所述胡柚提取物是將胡柚油胞層、白皮層和囊衣層的提取物的冷凍干燥粉末,經過丙酮超聲提取、旋轉蒸發、過固相萃取柱、真空干燥得到,所述脂肪代謝異常相關降脂產品為功能食品、保健品或防治藥物。

本發明提供的胡柚提取物能夠降低高脂誘導肥胖C57BL/6小鼠體內(in?vivo)體重,顯著降低肝臟和脂肪組織質量,顯著降低血清中含有的甘油三酯、總膽固醇以及低密度脂蛋白膽固醇,降低肝臟中含有的甘油三酯和總膽固醇??勺魑δ蓯稱?、保健品或防治藥物用于脂肪代謝異常相關疾病的防治。

附圖說明

圖1是以高脂飲食誘導C57BL/6小鼠為飼喂對象,胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉末對其小鼠狀態的影響。低脂+清水組為低脂飲食組,高脂+清水組為高脂飲食誘導糖尿病組,3個處理組劑量都為40?mg/kg?BW,n=10。

圖2-1是以高脂飲食誘導C57BL/6小鼠為飼喂對象,胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉末對其肝臟質量的影響。

圖2-2是以高脂飲食誘導C57BL/6小鼠為飼喂對象,胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉末對其睪周脂肪質量的影響。

圖2-3是以高脂飲食誘導C57BL/6小鼠為飼喂對象,胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉末對其腎周脂肪質量的影響。

圖3-1是以高脂飲食誘導C57BL/6小鼠為飼喂對象,胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉末對其血清甘油三酯的影響。

圖3-2是以高脂飲食誘導C57BL/6小鼠為飼喂對象,胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉末對其血清總膽固醇的影響。

圖3-3是以高脂飲食誘導C57BL/6小鼠為飼喂對象,胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉末對其血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)的影響。

圖4-1是以高脂飲食誘導C57BL/6小鼠為飼喂對象,胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉末對其肝臟甘油三酯的影響。

圖4-2是以高脂飲食誘導C57BL/6小鼠為飼喂對象,胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉末對其肝臟總膽固醇的影響。

具體實施方式

本發明結合附圖和實施例作進一步的說明。

實施例1?胡柚提取物的制備

????胡柚果實經過手工分離得到油胞層、白皮層和囊衣層,液氮速凍后經過低溫真空干燥,磨樣后得到冷凍干燥粉末。分別稱取胡柚油胞層、白皮層和囊衣層冷凍干燥粉末1?g,用80%丙酮20?mL(固液比1:20)?超聲30?min,頻率為60?kHz,功率為30?W。提取液通過減壓抽濾得到澄清提取液,如此重復3次,合并上清液,在旋轉蒸發儀上蒸去丙酮,得到胡柚提取物水溶液。

水溶液用固相萃?。⊿PE)Sep-Pak??C18柱進行純化(12?cc/2?g,Waters),純化過程分為活化、平衡、上樣、淋洗和洗脫五個步驟:SPE小柱首先用20?mL甲醇活化,再用20?mL去離子水平衡,然后水溶液上樣,待充分吸附后,小柱用40?mL去離子水淋洗以洗去果實中的糖酸等極性物質,真空抽干后用80?mL甲醇充分洗脫,洗脫液用真空干燥儀蒸干,分別得到粉末66.3?mg、63.6?mg和42.1?mg,得到的粉末即為胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉末。

實施例2?胡柚提取物的C57BL/6小鼠試驗

C57BL/6小鼠購自上海斯萊克實驗動物有限責任公司,飼喂的低脂飼料(含10%脂肪)和高脂飼料(含45%脂肪)購自江蘇美迪森生物醫藥有限公司。所有小鼠在恒溫恒濕環境下飼養,提供12?h光照12?h黑暗環境。每組10只小鼠,低脂+清水組為低脂飲食組,高脂+清水組為高脂飲食誘導肥胖組,胡柚油胞層、白皮層和囊衣層提取物3個處理組劑量都為40?mg/kg?BW。所有小鼠可以自由攝取食物和蒸餾水,處理組通過灌胃針灌胃的方式進行給藥,低脂和高脂對照組灌胃蒸餾水。試驗為期16周,1周連續給藥6天,停藥1天。試驗每周測定1次小鼠重量,1次小鼠攝食量,數據用平均值±標準誤(????????????????????????????????????????????????)表示,使用SPSS軟件進行數據分析,進行Duncan多重比較,不同的上標字母表示具差異顯著性(p<0.05),具體的小鼠初始體重、最終體重和平均攝食量見附表1。表1是以高脂飲食誘導C57BL/6小鼠為飼喂對象,胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉末對其體重和攝食量的影響。給藥16周,每周監測小鼠體重變化,第1周測定初始體重,第16周測定最終體重。每周監測1次小鼠攝食量,16周平均得到平均攝食量。低脂+清水組為低脂飲食組,高脂+清水組為高脂飲食誘導肥胖組,3個處理組劑量都為40?mg/kg?BW,n=7-10。用SPSS軟件進行差異顯著性分析,進行Duncan多重比較,不同的上標字母表示具差異顯著性(p<0.05)。

?。

試驗進行16周后處死小鼠,胡柚油胞層、白皮層和囊衣層提取物處理組的小鼠狀態見附圖1。

試驗進行16周后處死小鼠,分離得到肝臟、睪周脂肪和腎周脂肪,分別稱重,低脂+清水組為低脂飲食組,高脂+清水組為高脂飲食誘導糖尿病組,3個處理組劑量都為40?mg/kg?BW,n=7-8。數據用平均值±標準誤()表示,使用SPSS軟件進行數據分析,進行Duncan多重比較,不同的上標字母表示具差異顯著性(p<0.05),具體的臟器質量見附圖2-1、附圖2-2和附圖2-3。

試驗進行16周后處死小鼠,采集血清,使用羅氏Cobas?8000生化儀測定血清甘油三酯、總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c),低脂+清水組為低脂飲食組,高脂+清水組為高脂飲食誘導糖尿病組,3個處理組劑量都為40?mg/kg?BW,n=6-8。數據用平均值±標準誤()表示,使用SPSS軟件進行差異顯著性數據分析,進行Duncan多重比較,不同的上標字母表示具差異顯著性(p<0.05),具體的C57BL/6小鼠血清甘油三脂和總膽固醇含量見附圖3-1、附圖3-2和附圖3-3。

試驗進行16周后處死小鼠,分離得到肝臟,使用北京北化康泰臨床試劑有限公司的試劑盒測定肝臟甘油三酯和總膽固醇,低脂+清水組為低脂飲食組,高脂+清水組為高脂飲食誘導糖尿病組,3個處理組劑量都為40?mg/kg?BW,n=6-8。數據用平均值±標準誤()表示,使用SPSS軟件進行差異顯著性數據分析,進行Duncan多重比較,不同的上標字母表示具差異顯著性(p<0.05),具體的C57BL/6小鼠肝臟甘油三脂和總膽固醇含量見附圖4-1和附圖4-2。

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