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马德里竞技ⅴs维戈塞尔塔: 一種以蒼術為主的抗柔嫩艾美耳球蟲的中藥方劑.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201410782461.9

申請日:

20141216

公開號:

CN104547375A

公開日:

20150429

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A61K36/889,A61P33/02 主分類號: A61K36/889,A61P33/02
申請人: 北京農學院
發明人: 安健,張建軍,阮文科,張成昆
地址: 102206 北京市昌平區回龍觀鎮北農路7號
優先權: CN201410782461A
專利代理機構: 代理人:
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201410782461.9

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法律狀態類型:

摘要

一種抗柔嫩艾美耳球蟲病的中藥,包括如下成分:青蒿、鉤藤、黃芩、黃柏、黃連、甘草、黃芪、酒大黃、黑丑、皂角、大棗、丹皮、丹參、蒼術、陳皮、檳榔,各組分按重量份數為:青蒿70-80;鉤藤1-5、黃芩1-5、黃柏1-5、黃連2-3、甘草1-5、黃芪1-4、酒大黃1-5、黑丑1-2、皂角1-5、大棗1-3、丹皮1-5、丹參1-2、蒼術3-5、陳皮2-5、檳榔1-5。

權利要求書

1.一種以蒼術為主的抗柔嫩艾美耳球蟲的中藥方劑,包括如下成分:蒼術、青蒿、鉤藤、黃芩、黃柏、黃連、甘草、黃芪、酒大黃、黑丑、皂角、大棗、丹皮、丹參、陳皮、檳榔,各組分按重量份數為:蒼術70-80、青蒿3-5、鉤藤1-5、黃芩1-5、黃柏1-5、黃連2-3、甘草1-5、黃芪1-4、酒大黃1-5、黑丑1-2、皂角1-5、大棗1-3、丹皮1-5、丹參1-2、陳皮2-5、檳榔1-5。2.如權利要求1所述的抗柔嫩艾美耳球蟲病的中藥,其特征在于,各組分按重量份數為:術70-80、青蒿3-5、鉤藤2-8、黃芩2-5、黃柏2-3、黃連1-2、甘草2-3、黃芪1-4、酒大黃1-5、黑丑1-2、皂角2-4、大棗2-3、丹皮1-5、丹參1-2、陳皮1-3、檳榔1-5。3.如權利要求1所述的抗柔嫩艾美耳球蟲病的中藥在治療雞柔嫩艾美耳球蟲病上的應用。

說明書

技術領域

本發明涉及一種抗柔嫩艾美耳球蟲病的中藥,屬于養殖技術領域。

背景技術

雞球蟲病是一種對養雞業危害最大的原蟲病,是影響養雞業發展的三大疾病之一,它可以引起雞只死亡,發育停滯,產蛋減少,飼料報酬降低等,給養雞業造成了嚴重經濟損失。目前,化學藥物和抗生素類藥物是控制球蟲病的主要手段,自1939年研究發現磺胺藥在臨床上具有抗球蟲效果以來,臨床上已經出現了百余種抗球蟲藥。據統計從2000年起,英國每年使用的抗球蟲藥高達230噸。我國有二十多種常用的抗球蟲藥物,主要有地克珠利、百球清、鹽霉素和磺胺類藥物等。隨著抗球蟲藥的長期使用,耐藥性柔嫩艾美耳球蟲蟲株也相繼出現,而且,有的球蟲產生了針對藥物表現出了多重耐藥性和交叉耐藥性。近來研究證實,幾乎針對所有使用過的抗球蟲藥物都會有耐藥蟲株出現??追毖熱送ü勻喔齙厙氖秩崮郯藍虺娉嬤甑奈逯摯骨虺嬉┪錈舾行越屑觳?,結果發現,只有殺球靈具有普遍敏感性,而氯苯胍、莫能菌素等常用抗球蟲藥物均不敏感。汪明等人通過對山東、廣東等地區的多種不同的柔嫩艾美耳球蟲蟲株對百球清等常用抗球蟲藥物進行治療,發現各地蟲株都存在較為嚴重的耐藥性,其中鹽霉素最為明顯,且有明顯的交叉耐藥性。雖然通過交替使用不同的抗球蟲藥物可以緩解耐藥性的出現,但這種緩解只是暫時的,并非長久之計。耐藥性是一種遺傳學現象,一旦在某一蟲株建立,將會保持很多年。隨著耐藥性、藥物殘留等問題日益嚴重,歐盟通過決議于2013年1月1日起禁止使用抗球蟲藥物,同時也禁止從其他各國進口含有抗球蟲藥物殘留的肉雞及其產品,這對我國肉雞出口造成了嚴重的影響,我國雖然允許使用抗球蟲藥,但是人民群眾也對藥物殘留等一系列問題越來關注。

為了避免抗球蟲藥物帶來的負面影響,疫苗和中藥成為當今控制球蟲病的首選。疫苗的研究和開發引起了國內外專家和學者的高度關注。目前效果較好的是不同蟲株活球蟲的混合疫苗,如Coccivac等。但由于疫苗中所用的蟲株是未經致弱的蟲株,易引發球蟲病的發生,因此,人們探索艾美耳球蟲致弱,經過科學家的共同努力,已經取得了一些成效,有Immucox苗、Paracox和Liva-cox苗等。但是,野生疫苗如果使用不當的話,有可能存在潛在的散毒風險,弱毒球蟲活疫苗存在一些特殊性,如只能經口免疫、攝入量不均、疫苗毒性返強、在短期內難以達到良好地效果,并具有生產成本高、周期長、毒性不穩定等缺點。因此,現在球蟲疫苗并沒有廣泛應用于商品雞。

柔嫩艾美耳球蟲在中獸醫屬蟲積范疇,屬于虛癥,由濕癥引起,濕熱困脾,進而引起其他病癥。根據雞球蟲病的特點,在治療當中采取清熱燥濕為主、輔以止血活血、補血補氣、殺蟲抑蟲等方法并依據中獸醫辨證再進行組方治療配伍。為了更好的解決球蟲耐藥性問題和降低球蟲病的發生。國內外科研人員對中藥防治球蟲病進行了大量的研究,普遍認為中藥抗球蟲的作用機理:是通過調節動物機體的免疫功能,產生非特異性免疫以增強機體抗病力,達到消除病原體及減輕其對組織細胞的損傷恢復機體正常生理功能。中草藥中含生物堿成分有殺滅或抑制病原微生物的作用,增強白細胞的吞噬能力,激發機體的抗感染免疫力。馬海利等研究發現,中藥可明顯提高免疫器官中T淋巴細胞、B淋巴細胞的活性和數量,并提高肉雞外周血液的淋巴細胞尤其是T淋巴細胞的數量,從而提高機體的體液及細胞免疫的水平,增強機體抗球蟲的能力。Emilio研究發現,青蒿素能夠顯著減少球蟲卵囊的產量和病變計分。Muhammad等人用甘蔗汁和甘蔗渣的水性和酒精提取物進行了抗球蟲?;ば悅庖哂Υ鴟從κ匝?,發現甘蔗提取物具有抗球蟲免疫和治療作用。也有報道其具有相關的生物學和免疫學特性,包括對免疫應答的輔助作用和對艾美耳球蟲感染的治療作用,以及對雞的免疫刺激和免疫調節作用,通過使用甘蔗提取物(水提取物和酒精提取物)可降低盲腸扁桃體CD4+T細胞的量,增強機體對球蟲的抵抗力,誘導體液免疫應答,使體重增加,提高ACI百分比,同時減少卵囊排出和損傷評分。王芝英用馬鞭草、黃柏、郁金、梔子等中藥對柔嫩艾美耳球蟲感染雞的免疫水平研究發現,接種柔嫩艾美耳球蟲后,感染不給藥組CD4+T細胞亞群、CD8+T細胞亞群數目及百分比均低于感染給中藥組。近年來,對中藥有效成分的研究越來越多,如苦參含有苦參素,常山含有常山堿,大蒜含有大蒜素。大蒜、苦參、常山、青蒿、白頭翁等都具有抗球蟲作用,可作復方制劑或單獨使用。

目前,臨床上治療球蟲病主要有5類藥物,常用的殺蟲藥有雄黃、青蒿、檳榔、仙鶴草和常山等。清熱燥濕類有龍膽草、黃柏、黃連、黃芩和白頭翁等。清熱解毒常用藥物有穿心蓮、大青葉,蒲公英、地錦草和敗醬草等。補益氣血類藥物,如黨參、當歸、熟地、黃芪等?;鈦寡嚶械賾芴?、仙鶴草、丹參、丹皮、蒲黃和白及等。其中,青蒿、常山等一般用作復方制劑的主藥;黃柏、黃芪、甘草和黃連等一般用作復方制劑的輔藥。研究發現,多種單味中藥對柔嫩艾美耳球蟲有治療效果。青蒿一直被認為有很好的抗球蟲作用,可以改善紅細胞壓積,調節免疫功能,促進淋巴細胞增加,產生非特異性免疫,清除自由基,加強抗氧化作用恢復機體的正常生理功能的作用,減輕各種臨床癥狀,提高相對增重率。馬海利研究發現,青蒿為主的復方中藥對體外柔嫩艾美耳球蟲卵囊的孢子化率有明顯抑制作用,并且隨著藥物作用時間延長而降低,柔嫩艾美耳球蟲卵囊經青蒿藥液處理后接種雞未發現有臨床癥狀,說明以青蒿為主的復方中藥對孢子化卵囊具有明顯的殺滅作用。

大量研究表明,中草藥具有不易產生藥物殘留、耐藥性和毒副作用小等優點。因此,尋找安全有效的中草藥防治雞球蟲病,是目前防治球蟲病的主要措施。我們根據中獸醫理論,通過動物實驗,以ACI為判斷標準,盲腸黏膜IgA為參考來評價抗球蟲病的效果,篩選出了有效的抗球蟲病中藥方劑。

發明內容

針對上述現有技術的缺點,本發明的目的是提供一種以青蒿為主要成分抗柔嫩艾美耳球蟲病的中藥組方。

抗柔嫩艾美耳球蟲感染中藥方劑,具體組方如下:青蒿、鉤藤、黃芩、黃柏、黃連、甘草、黃芪、酒大黃、黑丑、皂角、大棗、丹皮、丹參、蒼術、陳皮、檳榔。柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊懸液經口接種,當天用藥,至第8天捕殺,計算增重率、存活率、卵囊值、病變值及抗球蟲指數(ACI)。本發明的有益效果:尋找安全有效的防治雞球蟲病的中藥組方,減少在防治雞球蟲病中出現的耐藥性、藥物殘留、疫苗免疫效果不佳等問題,促進養雞業的健康發展。

具體實施方式

下面對本發明作進一步的詳細說明。

實施例1

一種以蒼術為主的抗柔嫩艾美耳球蟲的中藥方劑,包括如下成分:蒼術、青蒿、鉤藤、黃芩、黃柏、黃連、甘草、黃芪、酒大黃、黑丑、皂角、大棗、丹皮、丹參、陳皮、檳榔,各組分按重量份數為:

1.實驗蟲株

BJ4株柔嫩艾美耳球蟲,其孢子化卵囊感染8日齡雛雞,收集6-8天的糞便,經飽和食鹽水漂浮法純化分離卵囊,將卵囊置于2.5%的重鉻酸鉀溶液中,有氧條件下孢子化48h,經卵囊計數后4℃下恒溫保存。

2.實驗動物

1日齡無球蟲雛雞,購于昌平養雞場,飼養于無球蟲雞籠中,飼料和飲水無球蟲污染。雛雞飼料中未添加抗球蟲藥及其他抗生素。

實驗分組及給藥

中藥方劑分3個實驗組:高劑量組30g/L、中劑量組15g/L、低劑量組5g/L,均采取飲水給藥。第4組:地克珠利攻蟲用藥組,第5組:攻蟲不用藥組,第6組:不攻蟲不用藥組。第7組中藥飲水不攻蟲組,以20g/L的劑量飲水。

將體重均勻的12日齡小公雞分為7組,每組6只,每個樣本重復3次。將第1、2、3和7組雞進行中藥預防性給藥,第4組為化學藥物地克珠利組,按預防劑量0.1ml/L給藥自由飲水。2天后將14日齡雞逐只空腹稱重、編號。除第6、7組外,其它各組雞于當天經口接種含4×104個柔嫩艾美耳孢子化卵囊懸液,至第8天捕殺。稱重記錄,捕殺,剖開腹腔取盲腸,記錄盲腸病變,將盲腸勻漿,計算盲腸內卵囊數。

3.測定指標

無球蟲環境中飼養12日齡開始攻蟲,攻蟲后第8天,雞只稱重記錄,捕殺,剖開腹腔取盲腸,記錄盲腸病變,將盲腸勻漿,計數盲腸內卵囊數。統計存活率、相對增重率、病變值、卵囊值等,計算抗球蟲指數(ACI)。

(1)相對增重率(%)

相對增重率=感染不給藥組或用藥組的平均增重÷不攻蟲不用藥雞的平均增重×100%,不攻蟲不用藥組的相對增重率為100%。

(2)存活率(%)

存活率=實驗結束每組雞只數÷實驗初始每組雞只數×100%

(3)病變記分及病變值

Johnson?Reid(1970)制定的標準對盲腸病變進行評定記分。病變值=組內平均病變記分×10。具體方法為:兩側盲腸病變不一致時,以嚴重的一側為準。

腸道病變記分:

0:糞便、腸道正常

1:稀便,便中無可見血絲,黏膜有小出血點,腸道大小正常

2:糞便中有血絲,黏膜有小出血點,腸道大小正常

3:糞便中有較多血液,黏膜有出血斑

4:糞便中有大量血液,或者全為血液,或者為干酪樣凝塊,或者腸道極度萎縮,腸壁增厚

病變值=各實驗組平均病變記分×10

(4)卵囊值

取盲腸勻漿,根據McMaster的方法計算卵囊的數量,算出卵囊比,按日本角田清教授的方法換算卵囊值,卵囊比與卵囊值的關系:

卵囊比=感染給藥組糞便勻漿中卵囊÷感染不給藥組糞便勻漿中卵囊×100%

卵囊比<1.0,卵囊值0

卵囊比1-25,卵囊值1

卵囊比26-50卵囊值10

卵囊比51-75卵囊值20

卵囊比76-≥100卵囊值40

(5)抗球蟲指數(ACI)根據美國默克(Merck)公司計算方法。

ACI=(相對增重率+存活率)一(病變值+卵囊值)。

4.藥效判定標準

ACI>180為高效:160<ACI≤180為中效;120≤ACI≤160者為低效;ACI<120為無效。

抗球蟲藥效結果

本研究篩選的中藥方劑在不同濃度的情況下ACI結果存在較大的差異,高劑量組的ACI為141,而低、中劑量組ACI均為169。根據藥效判定標準:ACI在180以上為高效;180-160之間為中效;160-120為低效;120以下為無效。因此,通過動物實驗篩選出了以青蒿為主要成分的抗柔嫩艾美耳球蟲病的中藥組方。

應當理解的是,對本領域普通技術人員來說,可以根據上述說明加以改進或變換,而所有這些改進和變換都應屬于本發明所附權利要求的?;し段?。上述實施例只為說明本發明的技術構思及特點,其目的在于讓熟悉此領域技術的人士能夠了解本發明的內容并加以實施,并不能以此限制本發明的?;し段?,凡根據本發明精神實質所作的等效變化或修飾,比如天絲直徑略微變化,效果相似,都應涵蓋在本發明的?;し段?。

關 鍵 詞:
一種 蒼術 為主 柔嫩 艾美耳球蟲 中藥 方劑
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