• / 5
  • 下載費用:30 金幣  

维戈塞尔塔VS皇家贝蒂斯: 一種礁膜孢子集塊化的培養方法.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201610550725.7

申請日:

20160711

公開號:

CN106106119A

公開日:

20161116

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A01G33/00 主分類號: A01G33/00
申請人: 象山旭文海藻開發有限公司
發明人: 朱文榮,胡偉,王重彬,繆芳芳,趙明林
地址: 315700 浙江省寧波市象山縣黃避岙鄉高泥村
優先權: CN201610550725A
專利代理機構: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙) 代理人: 李靜
PDF完整版下載: PDF下載
法律狀態
申請(專利)號:

CN201610550725.7

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種礁膜孢子集塊化的培養方法,具體步驟如下:步驟一,礁膜前處理;步驟二,孢子放散;步驟三,孢子收集;步驟四,集塊化法培養。本發明解決了礁膜渡夏過程中的保存問題;本發明的培養方法穩定性高,可控性強,有效解決了大面積推廣所需種源問題;本發明的培養方法可緩解種質退化問題,相比較傳統養殖,懸浮培養采收容易,可節省人力物力,使用效果好。

權利要求書

1.一種礁膜孢子集塊化的培養方法,其特征在于,具體步驟如下:步驟一,礁膜前處理:挑選顏色健康并且藻體完整的礁膜,然后用滅菌海水沖洗2-6次,去除表面的附著物,培養于20℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h的無菌海水中并且添加質量分數為0.05%的營養液;步驟二,孢子放散:待培養礁膜幾乎處于同一生長狀態時,使用無菌刀片將其切斷至5-10mm,用無菌純水沖洗3-8次,然后培養于25℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h,海水鹽度為10-15ppt無菌人工海水中并且添加質量分數為0.05%的營養液;步驟三,孢子收集:孢子大量迅速釋放后,使用拉絲后的移液器(針孔允許孢子通過),吸取孢子,并置于無菌12或24孔的培養板,培養板中添加含有質量分數為0.05%的營養液的無菌人工海水,重復2-5次上述步驟,直至達到期望的孢子濃度,然后立即進行24-36h的暗處理;步驟四,集塊化法培養:暗處理后的孢子立即更換新鮮培養液,然后培養于20℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h的無菌海水中,無菌海水中添加有質量分數為0.05%的營養液,待藻體長至1mm以上,用無菌解剖刀輕輕刮取附著的藻苗,使用目數為200-300目的篩網過濾,將藻苗轉至無菌三角瓶中,無菌三角瓶中存有添加0.05%營養液的無菌海水,無菌三角瓶密封通氣培養,每3天更換一次培養液,即可得到成品。2.根據權利要求1所述的礁膜孢子集塊化的培養方法,其特征在于,所述移液器采用高溫拉絲處理。3.根據權利要求1所述的礁膜孢子集塊化的培養方法,其特征在于,所述營養液采用ES營養液。

說明書

技術領域

本發明涉及一種海洋藻類的培養方法,具體是一種礁膜孢子集塊化的培養方法。

背景技術

藻類是原生生物界一類真核生物,主要為水生,無維管束,能進行光合作用。地球上的光合作用90%由藻類進行,在地球早期的歷史上藻類在創造富氧環境中發揮重要作用。浮游的藻類是海洋食物鏈中非常重要的環節,所有高等水生生物的生存最終依靠藻類的存在。礁膜是食用價值很高的經濟藻類,多生長于入???、淺海區等低鹽度海水的巖石或石塊上,其中有性礁膜的生長溫度適應范圍較廣,是養殖的主要品種,目前市場上現已有礁膜培育及栽培成功的報道,但未出現設施化養殖成功的案例。礁膜的人工養殖的關鍵技術在于礁膜孢子采集培育及礁膜的懸浮集塊化培養,目前國內尚無完善的礁膜孢子采集培育技術。

發明內容

本發明的目的在于提供一種礁膜孢子集塊化的培養方法,以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的,本發明提供如下技術方案:

一種礁膜孢子集塊化的培養方法,具體步驟如下:

步驟一,礁膜前處理:挑選顏色健康并且藻體完整的礁膜,然后用滅菌海水沖洗2-6次,去除表面的附著物,培養于20℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h的無菌海水中并且添加質量分數為0.05%的營養液;

步驟二,孢子放散:待培養礁膜幾乎處于同一生長狀態時,使用無菌刀片將其切斷至5-10mm,用無菌純水沖洗3-8次,然后培養于25℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h,海水鹽度為10-15ppt無菌人工海水中并且添加質量分數為0.05%的營養液;

步驟三,孢子收集:孢子大量迅速釋放后,使用拉絲后的移液器(針孔允許孢子通過),吸取孢子,并置于無菌12或24孔的培養板,培養板中添加含有質量分數為0.05%的營養液的無菌人工海水,重復2-5次上述步驟,直至達到期望的孢子濃度,然后立即進行24-36h的暗處理;

步驟四,集塊化法培養:暗處理后的孢子立即更換新鮮培養液,然后培養于20℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h的無菌海水中,無菌海水中添加有質量分數為0.05%的營養液,待藻體長至1mm以上,用無菌解剖刀輕輕刮取附著的藻苗,使用目數為200-300目的篩網過濾,將藻苗轉至無菌三角瓶中,無菌三角瓶中存有添加0.05%營養液的無菌海水,無菌三角瓶密封通氣培養,每3天更換一次培養液,即可得到成品。

作為本發明進一步的方案:移液器采用高溫拉絲處理。

作為本發明進一步的方案:營養液采用ES營養液。

與現有技術相比,本發明的有益效果是:本發明解決了礁膜渡夏過程中的保存問題;本發明的培養方法穩定性高,可控性強,有效解決了大面積推廣所需種源問題;本發明的培養方法可緩解種質退化問題,相比較傳統養殖,懸浮培養采收容易,可節省人力物力,使用效果好。

具體實施方式

下面結合具體實施方式對本專利的技術方案作進一步詳細地說明。

實施例1

一種礁膜孢子集塊化的培養方法,具體步驟如下:

步驟一,礁膜前處理:挑選顏色健康并且藻體完整的礁膜,然后用滅菌海水沖洗2次,去除表面的附著物,培養于20℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h的無菌海水中并且添加質量分數為0.05%的ES營養液;

步驟二,孢子放散:待培養礁膜幾乎處于同一生長狀態時,使用無菌刀片將其切斷至5mm,用無菌純水沖洗4次,然后培養于25℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h,海水鹽度為10ppt無菌人工海水中并且添加質量分數為0.05%的ES營養液;

步驟三,孢子收集:孢子大量迅速釋放后,由于孢子的正/負趨光性,孢子會集中于一側,使用高溫拉絲后的移液器(針孔允許孢子通過),吸取孢子,并置于無菌12孔的培養板,培養板中添加含有質量分數為0.05%的ES營養液的無菌人工海水,重復2次上述步驟,直至達到期望的孢子濃度,然后立即進行24h的暗處理;

步驟四,集塊化法培養:暗處理后的孢子立即更換新鮮培養液,然后培養于20℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h的無菌海水中,無菌海水中添加有質量分數為0.05%的ES營養液,待藻體長至2mm,用無菌解剖刀輕輕刮取附著的藻苗,使用目數為200目的篩網過濾,將藻苗轉至無菌三角瓶中,無菌三角瓶中存有添加0.05%ES營養液的無菌海水,無菌三角瓶密封通氣培養,每3天更換一次培養液,即可得到成品。

實施例2

一種礁膜孢子集塊化的培養方法,具體步驟如下:

步驟一,礁膜前處理:挑選顏色健康并且藻體完整的礁膜,然后用滅菌海水沖洗3次,去除表面的附著物,培養于20℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h的無菌海水中并且添加質量分數為0.05%的ES營養液;

步驟二,孢子放散:待培養礁膜幾乎處于同一生長狀態時,使用無菌刀片將其切斷至8mm,用無菌純水沖洗6次,然后培養于25℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h,海水鹽度為12ppt無菌人工海水中并且添加質量分數為0.05%的ES營養液;

步驟三,孢子收集:孢子大量迅速釋放后,由于孢子的正/負趨光性,孢子會集中于一側,使用高溫拉絲后的移液器(針孔允許孢子通過),吸取孢子,并置于無菌24孔的培養板,培養板中添加含有質量分數為0.05%的ES營養液的無菌人工海水,重復4次上述步驟,直至達到期望的孢子濃度,然后立即進行28h的暗處理;

步驟四,集塊化法培養:暗處理后的孢子立即更換新鮮培養液,然后培養于20℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h的無菌海水中,無菌海水中添加有質量分數為0.05%的ES營養液,待藻體長至1mm,用無菌解剖刀輕輕刮取附著的藻苗,使用目數為240目的篩網過濾,將藻苗轉至無菌三角瓶中,無菌三角瓶中存有添加0.05%ES營養液的無菌海水,無菌三角瓶密封通氣培養,每3天更換一次培養液,即可得到成品

實施例3

一種礁膜孢子集塊化的培養方法,具體步驟如下:

步驟一,礁膜前處理:挑選顏色健康并且藻體完整的礁膜,然后用滅菌海水沖洗2次,去除表面的附著物,培養于20℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h的無菌海水中并且添加質量分數為0.05%的ES營養液;

步驟二,孢子放散:待培養礁膜幾乎處于同一生長狀態時,使用無菌刀片將其切斷至10mm,用無菌純水沖洗8次,然后培養于25℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h,海水鹽度為15ppt無菌人工海水中并且添加質量分數為0.05%的ES營養液;

步驟三,孢子收集:孢子大量迅速釋放后,由于孢子的正/負趨光性,孢子會集中于一側,使用高溫拉絲后的移液器(針孔允許孢子通過),吸取孢子,并置于無菌24孔的培養板,培養板中添加含有質量分數為0.05%的ES營養液的無菌人工海水,重復5次上述步驟,直至達到期望的孢子濃度,然后立即進行36h的暗處理;

步驟四,集塊化法培養:暗處理后的孢子立即更換新鮮培養液,然后培養于20℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h的無菌海水中,無菌海水中添加有質量分數為0.05%的ES營養液,待藻體長至1.5mm,用無菌解剖刀輕輕刮取附著的藻苗,使用目數為300目的篩網過濾,將藻苗轉至無菌三角瓶中,無菌三角瓶中存有添加0.05%ES營養液的無菌海水,無菌三角瓶密封通氣培養,每3天更換一次培養液,即可得到成品

實施例4

一種礁膜孢子集塊化的培養方法,具體步驟如下:

步驟一,礁膜前處理:挑選顏色健康并且藻體完整的礁膜,然后用滅菌海水沖洗2次,去除表面的附著物,培養于20℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h的無菌海水中并且添加質量分數為0.05%的ES營養液;

步驟二,孢子放散:待培養礁膜幾乎處于同一生長狀態時,使用無菌刀片將其切斷至5mm,用無菌純水沖洗6次,然后培養于25℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h,海水鹽度為15ppt無菌人工海水中并且添加質量分數為0.05%的ES營養液;

步驟三,孢子收集:孢子大量迅速釋放后,由于孢子的正/負趨光性,孢子會集中于一側,使用高溫拉絲后的移液器(針孔允許孢子通過),吸取孢子,并置于無菌12孔的培養板,培養板中添加含有質量分數為0.05%的ES營養液的無菌人工海水,重復3次上述步驟,直至達到期望的孢子濃度,然后立即進行27h的暗處理;

步驟四,集塊化法培養:暗處理后的孢子立即更換新鮮培養液,然后培養于20℃,光強為100μmol/m2s,光照周期為12h/12h的無菌海水中,無菌海水中添加有質量分數為0.05%的ES營養液,待藻體長至1mm以上,用無菌解剖刀輕輕刮取附著的藻苗,使用目數為300目的篩網過濾,將藻苗轉至無菌三角瓶中,無菌三角瓶中存有添加0.05%ES營養液的無菌海水,無菌三角瓶密封通氣培養,每3天更換一次培養液,即可得到成品。

上面對本專利的較佳實施方式作了詳細說明,但是本專利并不限于上述實施方式,在本領域的普通技術人員所具備的知識范圍內,還可以在不脫離本專利宗旨的前提下做出各種變化。

關 鍵 詞:
一種 孢子 集塊化 培養 方法
  專利查詢網所有資源均是用戶自行上傳分享,僅供網友學習交流,未經上傳用戶書面授權,請勿作他用。
關于本文
本文標題:一種礁膜孢子集塊化的培養方法.pdf
鏈接地址://www.vmyqew.com.cn/p-6850250.html
關于我們 - 網站聲明 - 網站地圖 - 資源地圖 - 友情鏈接 - 網站客服客服 - 聯系我們

[email protected] 2017-2018 www.vmyqew.com.cn網站版權所有
經營許可證編號:粵ICP備17046363號-1 
 


收起
展開