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维戈塞尔塔对皇家贝蒂斯: 一種茶樹種質資源苗期抗寒性的鑒定方法.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201110338124.7

申請日:

20111101

公開號:

CN102498873B

公開日:

20130925

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A01G1/00,A01G7/06,A01C1/00 主分類號: A01G1/00,A01G7/06,A01C1/00
申請人: 青島農業大學
發明人: 丁兆堂,王玉,范凱
地址: 266000 山東省青島市城陽區長城路700號青島農業大學
優先權: CN201110338124A
專利代理機構: 代理人:
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201110338124.7

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明涉及一種茶樹種質資源苗期抗寒性的鑒定方法,所述的步驟如下:(1)材料的培養;(2)茶樹幼苗的脅迫處理;(3)茶樹葉片生理生化指標的測定;(4)實驗數據處理;(5)抗寒性評價。本發明操作簡便、成本低廉、鑒定快速準確。其中,葉片的質膜相對透性反應了葉片細胞膜受破壞的程度;可溶性糖和可溶性蛋白是茶樹葉片重要的滲透調節物質,其含量越高,茶樹的抗寒性越強。利用本發明評價茶樹的抗寒性簡便易行。

權利要求書

1.一種茶樹種質資源苗期抗寒性的鑒定方法,所述的步驟如下:(1)材料的培養采集茶樹種子,將茶籽用25-30℃溫水浸泡4-5天,每天換水兩次,浮在水面的茶籽撈出淘汰,然后將剩余種子攤放于砂畦上并蓋以稻草,每天灑水一次,當50%的茶籽露出胚根時,進行播種;(2)茶樹幼苗的脅迫處理當茶樹生長至7-8片葉時,將茶樹幼苗移至15℃,光照60k?lx,光照12h/d的環境條件下平衡生長15d,然后將溫度調至4℃進行冷馴化;(3)茶樹葉片生理生化指標的測定采集茶樹葉片3片,分別測定葉片的質膜相對透性X1,可溶性糖含量X2,可溶性蛋白含量X3;(4)實驗數據處理計算茶樹葉片抗寒生理指數,茶樹葉片抗寒生理指數Y=0.18-0.02X1+0.161X2+0.74X3;(5)抗寒性評價采用歐氏距離,將抗寒生理指數用類平均法進行聚類分析,通過聚類分析結果和抗寒生理指數對茶樹種質資源的抗寒性做出綜合評價。2.如權利要求1所述的茶樹種質資源苗期抗寒性的鑒定方法,其特征在于:所述的砂畦首先鋪砂5-6厘米,砂上鋪茶籽7-10厘米,茶籽上面蓋一層5-6厘米厚的細砂,砂上蓋稻草或麥秸。3.如權利要求1所述的茶樹種質資源苗期抗寒性的鑒定方法,其特征在于:所述的葉片的質膜相對透性采用電導儀測定。4.如權利要求1所述的茶樹種質資源苗期抗寒性的鑒定方法,其特征在于:所述的葉片可溶性糖含量采用硫酸蒽酮比色法測定。5.如權利要求1所述的茶樹種質資源苗期抗寒性的鑒定方法,其特征在于:所述的葉片可溶性蛋白含量采用考馬斯亮藍G-250染色法測定。

說明書

技術領域

本發明屬于茶樹種質資源早期鑒定技術領域,具體介紹了一種茶樹種質資源苗期抗寒性的鑒定方法。

背景技術

茶樹原產于熱帶及亞熱帶地區,是一種喜溫暖氣候條件的葉用植物。近年來,一方面隨著茶葉需求量的不斷增加,茶葉種植面積不斷北移;另一方面,隨著氣候變化的不穩定,越冬期及初春茶樹頻繁遭遇“霜凍”或“倒春寒”等低溫傷害,造成茶樹新梢受害,影響茶葉的產量和品質,嚴重時甚至會導致整株死亡。因此,提高茶樹的抗寒性,使茶樹安全越冬至關重要。

其中,選育抗寒良種,利用茶樹自身的遺傳因素來抵御低溫脅迫是最根本的途徑。而抗寒良種選育的關鍵則是種質資源抗寒性的早期鑒定。目前,鑒定茶樹抗寒性強弱最可靠的方法是直接鑒定法。即當試驗地遭遇嚴寒時,實地進行觀測和比較鑒定。但直接鑒定成本較高,受自然環境限制較大。為了克服這個困難,人們依據相關指標進行間接鑒定,但目前大多數只是利用單個指標(如質膜透性)進行鑒定。因此,如何對茶樹種質資源進行苗期抗寒性準確、快速鑒定,成為生產中亟待解決的技術問題。

發明內容

本發明的目的在于針對抗寒良種選育的關鍵問題,提供一種快速,準確的茶樹抗寒性鑒定方法。

本發明的技術方案為:一種茶樹種質資源苗期抗寒性的鑒定方法,所述的步驟如下:

(1)材料的培養

采集茶樹種子,將茶籽用25-30℃溫水浸泡4-5天,每天換水兩次,浮在水面的茶籽撈出淘汰,然后將剩余種子攤放于砂畦上并蓋以稻草,每天灑水一次,當50%的茶籽露出胚根時,進行播種;

(2)茶樹幼苗的脅迫處理

當茶樹生長至7-8片葉時,將茶樹幼苗移至15℃,光照60k?lx,光照12h/d的環境條件下平衡生長15d,然后將溫度調至4℃進行冷馴化;

(3)茶樹葉片生理生化指標的測定

采集茶樹葉片3片,分別測定葉片的質膜相對透性X1,可溶性糖含量X2,可溶性蛋白含量X3;

(4)實驗數據處理

計算茶樹葉片抗寒生理指數,茶樹葉片抗寒生理指數Y=0.18-0.02X1+0.161X2+0.74X3;

(5)抗寒性評價

采用歐氏距離,將抗寒生理指數用類平均法進行聚類分析,通過聚類分析結果和抗寒生理指數對茶樹種質資源的抗寒性做出綜合評價。

優選的是:所述的砂畦首先鋪砂5-6厘米,砂上鋪茶籽7-10厘米,茶籽上面蓋一層5-6厘米厚的細砂,砂上蓋稻草或麥秸。

優選的是:所述的葉片的質膜相對透性采用電導儀測定。

優選的是:所述的葉片可溶性糖含量采用硫酸蒽酮比色法測定。

優選的是:所述的葉片可溶性蛋白含量采用考馬斯亮藍G-250染色法測定。

本發明的有益效果為:本發明操作簡便、成本低廉、鑒定快速準確。其中,葉片的質膜相對透性反應了葉片細胞膜受破壞的程度;可溶性糖和可溶性蛋白是茶樹葉片重要的滲透調節物質,其含量越高,茶樹的抗寒性越強。利用本發明評價茶樹的抗寒性簡便易行。

附圖說明

圖1為本發明的具體實施例的聚類分析圖

具體實施方式

通過下面給出的具體實施例,可以進一步的了解本發明,但他們不是對本發明的限定。

1)從山東省日照市平家村1979年引種種植成園的‘黃山種’茶園中,采集長勢良好、未受過凍害的茶樹種子,在青島農業大學茶樹種質資源圃日照圃中混合播種。從中選取長勢良好的幼苗茶樹28株,以平陽特早和浙農117無性系良種作為對照。

2)茶樹越冬期按單株采集幼齡茶樹葉片3片備用。

3)分別采用電導儀測定葉片的質膜相對透性,硫酸蒽酮比色法測定葉片可溶性糖含量,考馬斯亮藍G-250染色法測定葉片可溶性蛋白含量。具體方法參照李合生《植物生理生化試驗原理和技術》。

4)基本的數據處理采用EXCELL軟件,將測定數據代入茶樹葉片抗寒生理指數的公式Y=0.18-0.02X1+0.161X2+0.74X3,求得茶樹葉片的抗寒生理指數。測定和分析結果詳見表1,表2。

結果表明,茶樹種質資源在抗寒相關生理指標上變異豐富。變異系數介于5.39-19.71,平均為11.68,可溶性糖的變異系數最大。供試材料的質膜透性從51.04-61.90變化不等,最小的為單株07082503,最大的為單株07080501;可溶性糖含量從2.30-4.85變化不等,最小的為單株07083502,最大的為單株07084701;可溶性蛋白含量從5.74-9.10變化不等,最小的為單株07092203,最大的為浙農117。供試材料的抗寒生理指數介于3.82-6.21,平均為5.13。

5)根據所得葉片抗寒生理指數,采用歐氏距離,按照類平均法對種質資源進行聚類分析。詳見圖1。

從聚類圖中可以看出,在閾值為0.64處,可以將供試材料分成三個大類群,第I類群包括浙農117等11份種質材料,主要是可溶性糖和可溶性蛋白含量高,質膜透性小的單株,屬于抗寒性強的單株;第III類群包括平陽特早在內的5份種質材料,主要是質膜透性較大,可溶性糖和可溶性蛋白含量較低的單株,屬于抗寒性弱的單株;第II類群的單株介于第I類群和第III類群之間,屬于抗寒性中等的單株。

表1供試材料抗寒生理指標測定結果

表2供試材料抗寒生理指標的變異

關 鍵 詞:
一種 茶樹 種質 資源 苗期 抗寒性 鑒定 方法
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