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莱加内斯对维戈塞尔塔: 一種組織工程軟骨支架材料及其制備方法和裝置.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201210088049.8

申請日:

2012.03.29

公開號:

CN102580156B

公開日:

2014.10.08

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 專利權質押合同登記的注銷IPC(主分類):A61L 27/40授權公告日:20141008申請日:20120329登記號:2015990000623出質人:廣東博溪生物科技有限公司、陜西博鴻生物科技集團有限公司質權人:中信銀行股份有限公司西安分行解除日:20190313|||專利權質押合同登記的變更IPC(主分類):A61L 27/40登記號:2015990000623變更日:20190312變更事項:出質人變更前:陜西博鴻生物科技有限公司、陜西博溪生物科技有限公司變更后:陜西博鴻生物科技集團有限公司、廣東博溪生物科技有限公司|||專利權人的姓名或者名稱、地址的變更IPC(主分類):A61L 27/40變更事項:專利權人變更前:陜西博鴻生物科技有限公司變更后:陜西博鴻生物科技集團有限公司變更事項:地址變更前:710065 陜西省西安市南二環青龍小區偉業都市遠景1幢11003號變更后:710065 陜西省西安市南二環青龍小區偉業都市遠景1幢11003號|||專利權質押合同登記的生效IPC(主分類):A61L 27/40登記號:2015990000623登記生效日:20150731出質人:陜西博鴻生物科技有限公司、陜西博溪生物科技有限公司質權人:中信銀行股份有限公司西安分行發明名稱:一種組織工程軟骨支架材料及其制備方法和裝置申請日:20120329授權公告日:20141008|||授權|||實質審查的生效IPC(主分類):A61L 27/40申請日:20120329|||公開
IPC分類號: A61L27/40; A61L27/36; A61L27/24; A61L27/20; A61F2/28 主分類號: A61L27/40
申請人: 陜西博鴻生物科技有限公司
發明人: 姚瑤
地址: 710065 陜西省西安市南二環青龍小區偉業都市遠景1幢11003號
優先權:
專利代理機構: 中國科學院西安專利中心 61001 代理人: 任越
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201210088049.8

授權公告號:

||||||||||||102580156B||||||

法律狀態公告日:

2019.04.05|||2019.04.05|||2017.01.18|||2015.09.23|||2014.10.08|||2012.09.19|||2012.07.18

法律狀態類型:

專利權質押合同登記的生效、變更及注銷|||專利權質押合同登記的生效、變更及注銷|||專利權人的姓名或者名稱、地址的變更|||專利權質押合同登記的生效、變更及注銷|||授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

一種組織工程軟骨支架材料,本發明的軟骨支架材料由上至下依次為表層、中層和鈣化層;表層由凍干軟骨基質和II型膠原組成,基質纖維在水平方向平行分布;中層由凍干軟骨基質、GAG、X型膠原和II型膠原及TGF-β組成,基質纖維呈縱向排列;鈣化層由凍干軟骨基質、GAG和X型膠原及煅燒骨粉組成,其纖維呈三維交錯分布。所制備的軟骨支架材料具有軟骨修復效果,有利于支架材料植入后與軟骨下骨的融合,促進軟骨下骨的再生;在復合軟骨細胞后,能夠用于全層軟骨缺損修復,再生的軟骨組織具有與天然軟骨一致的空間結構和蛋白組分;適于膝關節等負重部位關節軟骨的修復,再生抗壓強度較大的新生軟骨,提高軟骨支架表面的耐磨性和抗壓能力。

權利要求書

1.一種組織工程軟骨支架材料,其特征在于,由上至下依次為表層、
中層和鈣化層;其中表層由凍干軟骨基質和II型膠原組成,基質纖維在水平
方向平行分布;中層由凍干軟骨基質、GAG、X型膠原和II型膠原及TGF-β
組成,其基質纖維呈縱向排列;鈣化層由凍干軟骨基質、GAG和X型膠原及
煅燒骨粉組成,鈣化層內的纖維在三維空間交錯分布。
2.制備權利要求1所述的組織工程軟骨支架材料的方法,其特征在于,
是將天然軟骨基質制備成凝膠,添加GAG、X型膠原及煅燒骨粉后,凍干制
備鈣化層;將天然軟骨基質與GAG、X型膠原、II型膠原及TGF-β混合后,
在鈣化層表面進行低溫定向結晶,經冷凍干燥后形成中層;將天然軟骨基質
與II型膠原復合后,采用旋轉涂層方法在中層表面制備表層,晾干后得到組
織工程軟骨支架材料。
3.根據權利要求1所述的的制備方法,其特征在于,具體步驟包括:
步驟一、天然軟骨基質的制備:在4℃條件下,將哺乳動物無軟骨膜的
關節軟骨塊放入液氮冷凍3小時后,轉入預冷的粉碎機中粉碎,采用體積濃
度為1%的醋酸溶液溶解,經真空凍干得到軟骨基質;
步驟二、鈣化層的制備:將凍干軟骨基質、GAG和X型膠原溶于體積濃
度為1%的醋酸溶液中,使終濃度分別為5~12mg/ml、8~15mg/ml和5~
10mg/ml,用氫氧化鈣溶液調pH至中性,得到軟骨基質溶液;將粒徑0.05~
0.2mm的煅燒骨粉按0.1~0.5g/ml的量與軟骨基質溶液混合均勻,得到凝膠
溶液,將其注入培養器皿底盒,使凝膠層厚度為1~4mm,加蓋后在37℃條
件下待凝膠溶液凝固后,連同器皿一起置入-80℃環境中冷凍,形成鈣化層;
步驟三、中層的制備:將凍干軟骨基質、GAG、X型膠原和II型膠原溶于
體積濃度為1%的醋酸溶液中,使終濃度分別為5~12mg/ml、4~10mg/ml、2~
5mg/ml和4~10mg/ml,用氫氧化鈣溶液調pH至中性,再加入終濃度為2~
15ng/ml的TGF-β,得到支架材料的中層凝膠溶液;將步驟二冷凍的盛有鈣
化層的培養器皿置于-80℃的底板上,在0~10℃的空氣環境中,將中層凝膠
溶液注入培養器皿內的鈣化層表面,該凝膠層厚度為1~3mm,加蓋后待凝膠
溶液結冰,轉入-80℃環境下冷凍3小時以上;再經低溫真空干燥,得到軟
骨支架材料的中層與鈣化層結構;
步驟四、表層的制備:將凍干軟骨基質和II型膠原溶于體積濃度為1%
的醋酸溶液中,使終濃度分別為1~3mg/ml和9~30mg/ml,用氫氧化鈉溶液
調pH至中性,采用真空旋轉涂膜方法將其均勻涂布于低溫真空干燥的中層
表面,其旋轉速度500~3000rpm,時間20~100s,晾干后得到組織工程軟
骨支架材料。
4.制備權利要求1所述組織工程軟骨支架材料的培養器皿,其特征在
于,培養器皿由下至上依次為底盒、增高圈及上蓋,其相互之間能夠密封扣
合;底盒的內徑為5~30mm,深度為1~10mm;增高圈深度為1~5mm。

關 鍵 詞:
一種 組織 工程 軟骨 支架 材料 及其 制備 方法 裝置
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