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皇马维戈塞尔塔直播: 血管緊張素轉化酶抑制肽及其制備方法和應用.pdf

摘要
申請專利號:

维戈塞尔塔vs皇家社会 www.vmyqew.com.cn CN201310212991.5

申請日:

2013.05.31

公開號:

CN103242430B

公開日:

2014.10.08

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 授權|||實質審查的生效IPC(主分類):C07K 7/06申請日:20130531|||公開
IPC分類號: C07K7/06; C07K1/20; C12P21/06; A61K38/08; A61P9/12 主分類號: C07K7/06
申請人: 南京中醫藥大學
發明人: 劉睿; 吳皓; 朱蘊菡; 程建明; 卞慧敏; 王令充; 王欣之
地址: 210029 江蘇省南京市漢中路282號
優先權:
專利代理機構: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200 代理人: 楊海軍
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201310212991.5

授權公告號:

103242430B||||||

法律狀態公告日:

2014.10.08|||2013.09.11|||2013.08.14

法律狀態類型:

授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明公開了一種血管緊張素轉化酶抑制肽及其制備方法和應用,該抑制肽的氨基酸序列為:Leu-Ala-Ser-Pro-Thr-Met。本發明采用現代生化技術手段,對四角蛤蜊中的抑制血管緊張素轉化酶的活性成分進行跟蹤篩選和評價,通過酶解、超濾、反相高效液相色譜法等純化方法制備得到,實驗結果表明,該抑制肽具有很好的抑制血管緊張素轉化酶的作用,具有很好的抗高血壓的功效,并且安全性能好,具有很好的應用前景。

權利要求書

權利要求書
1.   一種血管緊張素轉化酶抑制肽,其特征在于,該抑制肽具有下述的氨基酸序列:Leu?Ala?Ser?Pro?Thr?Met。

2.   權利要求1所述的血管緊張素轉化酶抑制肽的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)四角蛤蜊酶解物的制備:
將四角蛤蜊軟體洗凈泥沙,加入3至8倍量水煎煮1至3次,分離煎煮液與肉渣,瀝干;取肉渣,加3至8倍量水勻漿后,加入酶酶解,酶的加入重量為肉渣重量的0.01%?2.0%,酶解的溫度為37至50 ℃,酶解的pH為 7至9,酶解反應時間為2至6 h;酶解結束后于沸水浴滅活,然后離心,取上清液;
(2)超濾純化:
取步驟(1)酶解得到的上清液,用0.45 μm微孔濾膜抽濾,抽濾液透過平板膜進行超濾,取分子量小于3k Da的部分,濃縮,冷凍干燥,得到凍干粉;
(3)反向色譜分離純化:
取步驟(2)超濾后的凍干粉以甲醇溶解,經過反相高效液相色譜分離, 流動相為;A相:甲醇,B相:體積濃度為0.05%三氟乙酸水溶液,洗脫程序為:0至15分鐘,A相甲醇體積由2%至40%洗脫,流速:20mL/min;柱溫:30 ℃,檢測波長為220nm,收集保留時間約為5.4min的色譜峰,冷凍干燥,得到血管緊張素轉化酶抑制肽。

3.   根據權利要求2所述的血管緊張素轉化酶抑制肽的制備方法,其特征在于,所述的酶為胰蛋白酶,所述胰蛋白酶活性為10000至50000U/g。

4.   根據權利要求2所述的血管緊張素轉化酶抑制肽的制備方法,其特征在于,所述的酶的加入重量為肉渣重量的1.0%,酶解的溫度為48 ℃,酶解的pH為 8.5,酶解反應時間為2h。

5.   權利要求1所述的血管緊張素轉化酶抑制肽在制備防治高血壓藥物中的應用。

關 鍵 詞:
血管 緊張 轉化 抑制 及其 制備 方法 應用
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