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维戈塞尔塔vs皇家贝蒂斯预测: 降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合及制備方法.pdf

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降低 奶牛 體細胞 中藥 生態 制劑 組合 制備 方法
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摘要
申請專利號:

CN201410463657.1

申請日:

2014.09.11

公開號:

CN104208118A

公開日:

2014.12.17

當前法律狀態:

實審

有效性:

審中

法律詳情: 實質審查的生效IPC(主分類):A61K 36/296申請日:20140911|||公開
IPC分類號: A61K36/296; A61P31/04; A61K35/74(2006.01)N 主分類號: A61K36/296
申請人: 保定冀中藥業有限公司
發明人: 郭立佳; 徐立蕭; 田繼業; 李定剛; 邵譜
地址: 071500 河北省保定市高陽工業城
優先權:
專利代理機構: 石家莊元匯專利代理事務所(特殊普通合伙) 13115 代理人: 劉聞鐸
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201410463657.1

授權公告號:

|||

法律狀態公告日:

2015.01.07|||2014.12.17

法律狀態類型:

實質審查的生效|||公開

摘要

降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物60-80份,乳酸菌發酵制劑20-40份。本發明還提供了一種降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合的制備方法。淫羊藿提取物和乳酸菌發酵制劑隸屬于中藥和微生態制劑范疇,是國家倡導的替代抗生素等化學藥產品的有利替代者,具有安全高效、無殘留、不違禁等優勢。該組合通過間接增強免疫功能、直接殺菌作用、以及提供營養成分,快速起到降低奶牛體細胞數的效果,而且,本發明的制備方法簡單、易操作,最大程度的得到淫羊藿提取物和乳酸菌發酵制劑,不破壞淫羊藿提取物和乳酸菌發酵制劑的有效成分。

權利要求書

1.  降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其特征在于:其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物60-80份,乳酸菌發酵制劑20-40份。

2.
  根據權利要求1所述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其特征在于:其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物60份,乳酸菌發酵制劑40份。

3.
  根據權利要求1所述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其特征在于:其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物65份,乳酸菌發酵制劑35份。

4.
  根據權利要求1所述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其特征在于:其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物70份,乳酸菌發酵制劑30份。

5.
  根據權利要求1所述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其特征在于:其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物75份,乳酸菌發酵制劑25份。

6.
  根據權利要求1所述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其特征在于:其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物80份,乳酸菌發酵制劑20份。

7.
  制備權利要求1所述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合的方法,其特征在于:包括以下步驟:
A:將淫羊藿藥材粉碎,得到粒度在10-20目的淫羊藿粉,然后將淫羊藿粉置于8-10倍重量的70%乙醇中,回流提取兩次,每次30-60分鐘,將兩次回流提取的浸提液合并,得到合并浸提液,利用酒精回收塔回收乙醇,并將合并浸提液通過濃縮罐于80-100℃進行濃縮,直至濃縮至合并浸提液 總體積的1/15-1/10,得到濃縮液,然后將濃縮液進行噴霧干燥,得淫羊藿提取物,備用;
B:將試管中保存的乳酸菌菌種接種于MRS液體種子培養基中,厭氧培養48小時,得乳酸菌液體種子,然后將該乳酸菌液體種子按體積百分比0.5%的接種量接于液體改良MRS培養基中,于30-32℃厭氧發酵60-72小時,發酵結束后,將發酵液于40-50℃濃縮至發酵液原體積的1/10-1/6,得到發酵濃縮液,將所得發酵濃縮液進行噴霧干燥,得乳酸菌發酵制劑,備用;
C:將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和乳酸菌發酵制劑按比例混合均勻,即得降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合。

8.
  根據權利要求7所述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合的制備方法,其特征在于:所述的步驟A中粒度在10-20目的淫羊藿粉,粒度分布為:100%通過10目篩,98.1-98.9%不通過20目篩。

9.
  根據權利要求7所述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合的制備方法,其特征在于:所述的步驟B中乳酸菌菌種選自植物乳桿菌、屎腸球菌、嗜酸乳桿菌發酵中的一種。

10.
  根據權利要求7所述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合的制備方法,其特征在于:所述的步驟B中MRS液體種子培養基的配方為:蛋白胨10.0g/L、牛肉膏10.0g/L、酵母膏5.0g/L、檸檬酸氫二銨2.0g/L、葡萄糖20.0g/L、吐溫-801.0mL/L、乙酸鈉5.0g/L、磷酸二氫鉀2.0g/L、硫酸鎂0.58g/L、硫酸錳0.25g/L,溶劑為蒸餾水,pH值6.2~6.6;液體改良MRS培養基的配方為:蛋白胨12.0g/L、牛肉膏5.0g/L、酵母膏6.0g/L、檸檬酸氫二銨2.0g/L、葡萄糖20.0g/L、吐溫-801.0mL/L、乙酸鈉5.0g/L、磷酸二氫鉀2.0g/L、硫酸鎂0.2g/L、硫 酸錳0.05g/L,溶劑為蒸餾水,pH值6.2。

說明書

降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合及制備方法
技術領域
本發明涉及一種降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合及制備方法。
背景技術
乳房炎是困擾奶牛業的第一大疾病,臨床型乳房炎一般都是由隱性乳房炎進一步發展所致。而隱性乳房炎的一個主要特征往往是體細胞數的增加。體細胞數越高,隱性乳房炎越嚴重,越容易轉化成臨床型乳房炎。
體細胞數增加,說明有病原菌感染乳腺,奶牛免疫系統啟動并處理病原菌,當免疫系統不能完全清除病原菌時,體細胞數會持續上升,產奶量顯著下降,并朝乳房炎的方向發展。
現在,越來越多的奶業公司開始關注體細胞數,當牛奶中體細胞數超過一定數量時,會降價收奶或拒絕收奶。因此開發降低體細胞數的產品尤為急迫。目前市面上降低體細胞數的產品主要為中藥散劑、左旋咪唑,甚至是偷著添加的抗生素等。中藥散劑用量大,生物利用度低,且效果不明顯,主要是以提高免疫力為主。左旋咪唑已經禁止在奶牛藥物中添加??股賾捎誆辛粑侍飧敲髁罱?。因此,發明一種高效、綠色、無殘留的產品,能夠快速降低體細胞數,并將其維持在較低水平,從而減少牧場及奶農損失具有很高的經濟價值。
發明內容
本發明為解決現有技術中根據體細胞數增加的表現,奶牛乳房炎導致產奶量下降、奶業經濟效益降低,現有技術降低體細胞數的藥物效果不明 顯的技術問題,設計了一種安全、效果明顯的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合及制備方法。
本發明為實現其目的采用的技術方案是:
降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物60-80份,乳酸菌發酵制劑20-40份。
其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物60份,乳酸菌發酵制劑40份。
其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物65份,乳酸菌發酵制劑35份。
其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物70份,乳酸菌發酵制劑30份。
其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物75份,乳酸菌發酵制劑25份。
其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物80份,乳酸菌發酵制劑20份。
制備權利要求1所述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合的方法,包括以下步驟:
A:將淫羊藿藥材粉碎,得到粒度在10-20目的淫羊藿粉,然后將淫羊藿粉置于8-10倍重量的70%乙醇中,回流提取兩次,每次30-60分鐘,將兩次回流提取的浸提液合并,得到合并浸提液,利用酒精回收塔回收乙醇,并將合并浸提液通過濃縮罐于80-100℃進行濃縮,直至濃縮至合并浸提液總體積的1/15-1/10,得到濃縮液,然后將濃縮液進行噴霧干燥,得淫羊藿提取物,備用;
B:將試管中保存的乳酸菌菌種接種于MRS液體種子培養基中,厭氧培養48小時,得乳酸菌液體種子,然后將該乳酸菌液體種子按體積百分比0.5%的接種量接于液體改良MRS培養基中,于30-32℃厭氧發酵60-72小時,發酵結束后,將發酵液于40-50℃濃縮至發酵液原體積的1/10-1/6,得到發酵濃縮液,將所得發酵濃縮液進行噴霧干燥,得乳酸菌發酵制劑,備用;
C:將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和乳酸菌發酵制劑按比例混合均勻,即得。
所述的步驟A中粒度在10-20目的淫羊藿粉,粒度分布為:100%通過10目篩,98.1-98.9%不通過20目篩。
所述的步驟B中乳酸菌菌種選自植物乳桿菌、屎腸球菌、嗜酸乳桿菌發酵中的一種。
所述的步驟B中MRS液體種子培養基的配方為:蛋白胨10.0g/L、牛肉膏10.0g/L、酵母膏5.0g/L、檸檬酸氫二銨2.0g/L、葡萄糖20.0g/L、吐溫-801.0mL/L、乙酸鈉5.0g/L、磷酸二氫鉀2.0g/L、硫酸鎂0.58g/L、硫酸錳0.25g/L,溶劑為蒸餾水,pH值6.2~6.6;液體改良MRS培養基的配方為:蛋白胨12.0g/L、牛肉膏5.0g/L、酵母膏6.0g/L、檸檬酸氫二銨2.0g/L、葡萄糖20.0g/L、吐溫-801.0mL/L、乙酸鈉5.0g/L、磷酸二氫鉀2.0g/L、硫酸鎂0.2g/L、硫酸錳0.05g/L,溶劑為蒸餾水,pH值6.2。
本發明的有益效果是:淫羊藿提取物中含有多糖和蛋白質等營養成分,這些多糖及蛋白等成分可以作為乳酸菌的發酵基質,促進乳酸菌的快速增殖,乳酸菌增殖過程中產生乳酸、乳酸菌素及抗菌肽等活性殺菌物質,以及多種維生素等營養成分,經過腸道吸收后,迅速發揮作用。而多糖類成 分經過乳酸菌轉化,分子結構轉變,副作用降低,功效增強。蛋白成分經過乳酸菌分解酶的降解作用,生成小分子肽或氨基酸,從而增強免疫及營養功能。
淫羊藿提取物還富含淫羊藿苷、黃酮等物質,通過和乳酸菌發酵制劑協同,可增加組織中巨噬細胞的數量,顯著增強巨噬細胞的吞噬活力;可增強T淋巴細胞的增殖與轉化;另外,其對NK細胞、嗜酸性粒細胞、嗜中性粒細胞、嗜堿性粒細胞等也有明顯的增強作用。各種免疫細胞的增強,可以更快更高效的吞噬和殺滅侵入乳腺和機體的病原菌,從而快速降低體細胞數,提高奶牛的機體免疫能力、抑制體細胞數。
該組合物具有增強機體的免疫功能、直接殺滅入侵的病原菌,以及生成維生素、氨基酸等營養成分三方面的功效,通過這三種功效,可快速降低體細胞,加快患病奶牛的機體恢復。
淫羊藿提取物和乳酸菌發酵制劑隸屬于中藥和微生態制劑范疇,是國家倡導的替代抗生素等化學藥產品的有利替代者,具有安全高效、無殘留、不違禁等優勢。該組合通過間接增強免疫功能、直接殺菌作用、以及提供營養成分,快速起到降低奶牛體細胞數的效果,連續使用7-10天,效果非常明顯。相較于現有技術不僅效果明顯而且迅速,通過本發明的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,大大降低了奶牛體細胞數。
本發明的制備方法簡單、易操作,最大程度的得到淫羊藿提取物和乳酸菌發酵制劑,不破壞淫羊藿提取物和乳酸菌發酵制劑的有效成分,其中的制備參數是通過長期的研究和嚴格的的實驗總結得出的,對本產品組合物的有效成分和藥效有著關鍵的作用,是綜合組合物的生物利用度、毒副作用、理化性質以及結合后藥效的發揮、藥物濃度、奶牛的適用性和安全 性等多方面的考慮,而且本發明的各參數使得制得的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合應用到奶牛中體細胞數大大降低,相較于現有的產品效果明顯而且迅速。
具體實施方式
本發明為解決現有技術中根據體細胞數增加的表現,奶牛乳房炎導致產奶量下降、奶業經濟效益降低,現有技術降低體細胞數的藥物效果不明顯,設計一種安全、效果明顯的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合及制備方法。下面結合具體實施例對本發明作進一步說明。
實施例1.降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物60份,乳酸菌發酵制劑40份。
制備上述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合的方法,包括以下步驟:
A:將7kg淫羊藿藥材粉碎,得到粒度在10-20目的淫羊藿粉,粒度分布為:100%通過10目篩,98.1%不通過20目篩,然后將淫羊藿粉置于8倍重量的70%乙醇中,回流提取兩次,每次30-60分鐘,將兩次回流提取的浸提液合并,得到合并浸提液163L,利用酒精回收塔回收乙醇,并將合并浸提液通過濃縮罐于80℃進行濃縮,直至合并浸提液濃縮至16L,得到濃縮液,然后將濃縮液進行噴霧干燥,得淫羊藿提取物1.38kg,備用。
B:將試管中保存的植物乳桿菌菌種接種于MRS液體種子培養基中,厭氧培養48小時,得植物乳桿菌液體種子,然后將植物乳桿菌液體種子180mL按體積百分比0.5%的接種量接于液體改良MRS培養基中,于30℃厭氧發酵62小時,發酵結束后,得到發酵液34.6L,將發酵液于45℃濃縮至4.7L,得到發酵濃縮液,將所得發酵濃縮液進行噴霧干燥,得植物乳桿菌發酵制 劑0.73kg,備用。
C:將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和植物乳桿菌發酵制劑按比例,稱取淫羊藿提取物1.1kg,植物乳桿菌發酵制劑0.73kg,混合均勻,分裝即得。
實施例2.降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物65份,乳酸菌發酵制劑35份。
制備上述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合的方法,包括以下步驟:
A:將10kg淫羊藿藥材粉碎,得到粒度在10-20目的淫羊藿粉,粒度分布為:100%通過10目篩,98.3%不通過20目篩,然后將淫羊藿粉置于8.5倍重量的70%乙醇中,回流提取兩次,每次30-60分鐘,將兩次回流提取的浸提液合并,得到合并浸提液185L,利用酒精回收塔回收乙醇,并將合并浸提液通過濃縮罐于85℃進行濃縮,直至合并浸提液濃縮至15.1L,得到濃縮液,然后將濃縮液進行噴霧干燥,得淫羊藿提取物1.8kg,備用。
B:將試管中保存的屎腸球菌菌種接種于MRS液體種子培養基中,厭氧培養48小時,得屎腸球菌液體種子,然后將屎腸球菌液體種子200mL按體積百分比0.5%的接種量接于液體改良MRS培養基中,于30℃厭氧發酵64小時,發酵結束后,得到發酵液39.4L,將發酵液于45℃濃縮至5.5L,得到發酵濃縮液,將所得發酵濃縮液進行噴霧干燥,得屎腸球菌發酵制劑0.87kg,備用。
C:將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和屎腸球菌發酵制劑按比例,稱取淫羊藿提取物1.58kg,屎腸球菌發酵制劑0.85kg,混合均勻,分裝即得。
實施例3.降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物70份,乳酸菌發酵制劑30份。
制備上述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合的方法,包括以下步驟:
A:將15kg淫羊藿藥材粉碎,得到粒度在10-20目的淫羊藿粉,粒度分布為:100%通過10目篩,98.8%不通過20目篩,然后將淫羊藿粉置于10倍重量的70%乙醇中,回流提取兩次,每次30-60分鐘,將兩次回流提取的浸提液合并,得到合并浸提液277.2L,利用酒精回收塔回收乙醇,并將合并浸提液通過濃縮罐于90℃進行濃縮,直至合并浸提液濃縮至20.7L,得到濃縮液,然后將濃縮液進行噴霧干燥,得淫羊藿提取物2.7kg,備用。
B:將試管中保存的嗜酸乳桿菌菌種接種于MRS液體種子培養基中,厭氧培養48小時,得嗜酸乳桿菌液體種子,然后將嗜酸乳桿菌液體種子250mL按體積百分比0.5%的接種量接于液體改良MRS培養基中,于30℃厭氧發酵67小時,發酵結束后,得到發酵液49.3L,將發酵液于48℃濃縮至5L,得到發酵濃縮液,將所得發酵濃縮液進行噴霧干燥,得嗜酸乳桿菌發酵制劑1.2kg,備用。
C:將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和嗜酸乳桿菌發酵制劑按比例,稱取淫羊藿提取物2.67kg,屎腸球菌發酵制劑1.16kg,混合均勻,分裝即得。
實施例4.降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物75份,乳酸菌發酵制劑25份。
制備上述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合的方法,包括以下步驟:
A:將12kg淫羊藿藥材粉碎,得到粒度在10-20目的淫羊藿粉,粒度分布為:100%通過10目篩,98.5%不通過20目篩,然后將淫羊藿粉置于9倍重量的70%乙醇中,回流提取兩次,每次30-60分鐘,將兩次回流提取的浸提液合并,得到合并浸提液232.3L,利用酒精回收塔回收乙醇,并將合并浸提液通過濃縮罐于95℃進行濃縮,直至合并浸提液濃縮至18.3L,得到濃縮液,然后將濃縮液進行噴霧干燥,得淫羊藿提取物2.3kg,備用。
B:將試管中保存的嗜酸乳桿菌菌種接種于MRS液體種子培養基中,厭氧培養48小時,得嗜酸乳桿菌液體種子,然后將嗜酸乳桿菌液體種子200mL按體積百分比0.5%的接種量接于液體改良MRS培養基中,于30℃厭氧發酵69小時,發酵結束后,得到發酵液42.7L,將發酵液于50℃濃縮至4.3L,得到發酵濃縮液,將所得發酵濃縮液進行噴霧干燥,得嗜酸乳桿菌發酵制劑1.03kg,備用。
C:將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和嗜酸乳桿菌發酵制劑按比例,稱取淫羊藿提取物2.1kg,嗜酸乳桿菌發酵制劑0.7kg,混合均勻,分裝即得。
實施例5.降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合,其成分包括:按重量比計,淫羊藿提取物80份,乳酸菌發酵制劑20份。
制備上述的降低奶牛體細胞數的中藥及微生態制劑組合的方法,包括以下步驟:
A:將13kg淫羊藿藥材粉碎,得到粒度在10-20目的淫羊藿粉,粒度分布為:100%通過10目篩,98.7%不通過20目篩,然后將淫羊藿粉置于9.5倍重量的70%乙醇中,回流提取兩次,每次30-60分鐘,將兩次回流提取的浸提液合并,得到合并浸提液245.7L,利用酒精回收塔回收乙醇,并將合 并浸提液通過濃縮罐于100℃進行濃縮,直至合并浸提液濃縮至16.4L,得到濃縮液,然后將濃縮液進行噴霧干燥,得淫羊藿提取物2.43kg,備用。
B:將試管中保存的植物乳桿菌菌種接種于MRS液體種子培養基中,厭氧培養48小時,得植物乳桿菌液體種子,然后將植物乳桿菌液體種子220mL按體積百分比0.5%的接種量接于液體改良MRS培養基中,于30℃厭氧發酵72小時,發酵結束后,得到發酵液44.3L,將發酵液于48℃濃縮至7.3L,得到發酵濃縮液,將所得發酵濃縮液進行噴霧干燥,得植物乳桿菌發酵制劑1.12kg,備用。
C:將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和植物乳桿菌發酵制劑按比例,稱取淫羊藿提取物2.4kg,植物乳桿菌發酵制劑0.6kg,混合均勻,分裝即得。
選取600頭體細胞數較高的奶牛樣本,奶牛平均初始體細胞數為158.2萬/mL,隨機分成6組,分別為對照組和實施例組,每組100頭奶牛,按每頭奶牛每天投喂產品50g,對照組投喂市場上現有的產品,實施例組分別投喂上述5組實施例產品,連用10天。每天采用CMT檢測法進行體細胞數測定,結果如下:
投喂市場上現有產品的對照組奶牛的體細胞數測定值,見表1:
表1:

投喂實施例1產品的奶牛的體細胞數測定值,見表2:
表2:

投喂實施例2產品的奶牛的體細胞數測定值,見表3:
表3:

投喂實施例3產品的奶牛的體細胞數測定值,見表4:
表4:

投喂實施例4產品的奶牛的體細胞數測定值,見表5:
表5:

投喂實施例5產品的奶牛的體細胞數測定值,見表6:
表6:

通過上述數據分析,可以看出該發明產品在降低奶牛體細胞數上具有優良的效果,連續使用10天,可將體細胞數降至原來的一半左右,相較于市場上現有的降低奶牛體細胞的產品,水平明顯提升,根據奶牛體細胞數的下降,表明隱性乳房炎減輕,其轉化成臨床型乳房炎的幾率大大減小,奶牛的體質更加健康,產奶量也增加,對奶業行業有著杰出的影響。
而且,通過對比上述表1-6,我們可以看到,使用到8天時,體細胞數的下降幅度趨于穩定。說明該組合用于降低奶牛體細胞的最佳使用時間為7-10天。

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